對(duì)平末端的DNA，也可先連上人工設(shè)計(jì)合成的脫氧寡核苷酸雙鏈接頭，使DNA末端產(chǎn)生新的限制內(nèi)切酶位點(diǎn)，經(jīng)內(nèi)切酶割后，即可按粘性末端相連（圖20-7)。
圖20-7 人工接頭連接法
二、平末端連接
T4DNA連接酶也能催化限制性?xún)?nèi)切酶切割產(chǎn)生DNA平末端的連接。如果目的序列和載體上沒(méi)有相同的限制性?xún)?nèi)切酶位點(diǎn)可供利用，用不同的限制性?xún)?nèi)切酶切割后的粘性末端不能互補(bǔ)結(jié)合，則可用適當(dāng)?shù)拿笇NA突出的末端削平或補(bǔ)齊成平末端，再用T4DNA連接酶連接，但平末端連接要比粘性末端連接的效率低得多。
