動(dòng)物實(shí)驗(yàn)基本操作
目的和原理 生理實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常用蟾蜍作為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，本實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖煜ん蛤茏巧窠?jīng)一腓腸肌標(biāo)本的制備。
實(shí)驗(yàn)對(duì)象 蟾蜍
實(shí)驗(yàn)器材和藥品 蛙類手術(shù)器械一套、棉線、燒杯、滴管、任氏液。
實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目
坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本制備
（一)破壞脊髓左手握住蟾蜍，用食指下壓口吻端使頭前俯(圖1)，右手持腦脊髓穿刺針從枕骨大孔垂直刺入，再向前刺入顱腔，左右攪動(dòng)搗毀腦組織；然后將針退至皮下，再將針尖向后刺入脊髓管搗毀脊髓。若蟾蜍四肢肌肉松軟，呼吸消失表示脊髓已破壞完全。否則，按上述方法再行破壞。
圖1 破壞蟾蜍腦脊髓的圖示
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圖2 剪除軀干上部及內(nèi)臟
（三)剝皮 注意保護(hù)脊柱兩側(cè)的坐骨神經(jīng)束。用左手持大鑷子夾住脊柱的斷端(不要握夾住坐骨神經(jīng))。右手捏住背面皮膚邊緣，向下剝掉全部后肢的皮膚(圖3)。將標(biāo)本放入盛有任氏液的燒杯中。
圖3 剝52667788.cn掉后肢皮膚
（四)將手及用過的剪刀、鑷子等全部手術(shù)器械洗凈，再進(jìn)行下述步驟。
(五)分離兩腿 將已剝皮的下肢標(biāo)本放在蛙盤上， 用粗剪刀將腹側(cè)恥骨聯(lián)合及背側(cè)骶骨突起的部位剪平，沿正中線將兩側(cè)大腿分離(注意不可剪歪。以防損傷坐骨神經(jīng))。
(六)制作坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本 取一只腿腹側(cè)向上固定于蛙盤上。
1.游離坐骨神經(jīng) 用玻璃針沿脊柱側(cè)將坐骨神經(jīng)根游離。將標(biāo)本背側(cè)向上固定。用玻璃針在大腿背側(cè)循坐骨神經(jīng)溝(股二頭肌和半膜肌之間的裂隙中)找到坐骨神經(jīng)后分離清楚，用玻璃針在大腿根部沿神經(jīng)的走行穿至腹側(cè)，在確認(rèn)玻璃針上面無(wú)坐骨神經(jīng)后，用小剪刀將玻璃針上面的肌肉及結(jié)締組織剪斷暴露出整根坐骨神經(jīng)。 再用粗剪刀在坐骨神經(jīng)根部保留神經(jīng)發(fā)出部的約1厘米脊柱剪去其余部分，將坐骨神經(jīng)游離。用大鑷子提起坐骨神經(jīng)所連的脊柱塊，用小剪刀剪藥品數(shù)據(jù)斷坐骨神經(jīng)上的小分支將神經(jīng)干游離至腘窩。
2.完成坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本 分離腓腸肌跟踺，用線結(jié)扎，并在結(jié)扎線的遠(yuǎn)側(cè)剪斷跟腱將腓腸肌游離至腘窩處。將游離干凈的坐骨神經(jīng)搭在腓腸肌上。在膝關(guān)節(jié)周圍剪掉全部大腿肌肉并用粗剪刀將股骨下端刮干凈。在膝關(guān)節(jié)以上1厘米處剪斷股骨。再在膝下剪去脛骨。此時(shí)即完成坐骨神經(jīng)-腓腸肌標(biāo)本的制作。用浸有任氏液的鋅銅弓迅速接觸坐骨神經(jīng)，如腓腸肌有快速收縮，表明標(biāo)本興奮性良好。 將制備好的標(biāo)本放入盛有任氏液的燒杯中，待其興奮性穩(wěn)定后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng)
1.盡量用器械操作，忌用金屬器械觸、夾神經(jīng)。
2.操作過程中防止過度牽拉神經(jīng)。
3.用任氏液保持神經(jīng)濕潤(rùn)。
