2.1 模型建造結(jié)果
見圖1、圖2。在大鼠左側(cè)股骨中部做骨缺損并以克氏針做內(nèi)固定,35天后的實(shí)驗(yàn)組取材后缺損區(qū)域形成纖維連接,但沒有骨性連接。
2.2 大體X線及病理切片
見圖3、圖4。在圖3中我們可以看到骨缺損區(qū)域有模糊的軟組織影,骨顯影不明顯,圖4則證實(shí)了骨缺損區(qū)域確實(shí)沒有形成骨連接。
2.3 BMP2基因的相對(duì)表達(dá)變化
見表1。在3、7、14、21、28、35天時(shí),外周區(qū)和中心區(qū)BMP2基因的表達(dá)差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P<0.05。
在外周區(qū)1天沒有檢測(cè)到表達(dá),3天有明顯表達(dá),7天表達(dá)明顯增加接近表達(dá)高峰,14天以后表達(dá)已經(jīng)降低,28天至35天時(shí)表達(dá)數(shù)值接近1,即接近正常骨組織的表達(dá)。其中,3、28、35天之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而其他時(shí)段之間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,7天時(shí)的表達(dá)倍數(shù)最高,F=350.503,P<0.05。表1 大鼠骨不連模型愈合過程中BMP2基因的相對(duì)表達(dá)量
BMP2基因沒有檢測(cè)到表達(dá)以“-”表示, 在中心區(qū),1天、3天時(shí)都沒有檢測(cè)到BMP2基因表達(dá),7天可以檢測(cè)到表達(dá),14天表達(dá)明顯增加并接近表達(dá)高峰,21天表達(dá)減弱,28天至35天表達(dá)在正常值附近。其中,1天和3天之間、7天和35天之間、21天和28天之間表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,其他時(shí)段之間表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,14天時(shí)的表達(dá)倍數(shù)最高,F=217.620, P<0.05。
3 討 論
臨床上,引起骨不連的原因很多,損傷區(qū)域的局部因素是引起骨不連的始發(fā)和重要因素,這些不利因素影響骨的形成和轉(zhuǎn)化,使成骨細(xì)胞難以在缺損處形成新生骨而造成骨不連。針對(duì)不同的病因,骨不連的治療方法也各異。手術(shù)植骨仍是治療骨不連最常用的有效方法,自體骨移植效果較好但來源有限,人工骨因缺乏相關(guān)的生長(zhǎng)因子而誘導(dǎo)活性不足,現(xiàn)利用組織工程技術(shù)將相關(guān)生長(zhǎng)因子置于骨不連區(qū)域?yàn)榻鉀Q這一問題帶來了希望,其中最重要的生長(zhǎng)因子是BMP[2-3]醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站52667788.cn。
BMP是有效的骨誘導(dǎo)因子,可以誘導(dǎo)間充質(zhì)細(xì)胞增殖、分化為成骨細(xì)胞或軟骨細(xì)胞,在骨的發(fā)生、誘導(dǎo)、修復(fù)等方面發(fā)揮著關(guān)鍵的作用。Senta等[4]實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)BMP2具有很強(qiáng)的成骨能力。Eckardt等[5]研究證實(shí)rhBMP2可以有效地促進(jìn)兔子脛骨骨不連的愈合。Hsu等[6]將BMP2基因?qū)牍撬杓?xì)胞(bone marrow cells,BMCs)來修復(fù)骨缺損動(dòng)物模型,結(jié)果顯示BMP2基因轉(zhuǎn)染組的愈合明顯好于單純BMCs組。國內(nèi)也有研究表明BMP2可以增加成骨細(xì)胞數(shù)量[7]。
本實(shí)驗(yàn)在骨不連修復(fù)的不同時(shí)段,用RTPCR技術(shù)測(cè)定骨不連中心區(qū)及外周區(qū)BMP2基因的表達(dá),發(fā)現(xiàn)在骨不連修復(fù)的早期,中心區(qū)BMP2基因的表達(dá)時(shí)間及達(dá)到高峰時(shí)間都要明顯滯后于外周區(qū),強(qiáng)度也低于外周區(qū),該結(jié)果與Sojo等[8]的研究相符。