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3 討 論
抑制腫瘤細胞增殖、誘導其凋亡已成為腫瘤化療的策略之一。Fas/FasL為凋亡相關(guān)基因，其表達失衡是一些疾病發(fā)生發(fā)展的重要原因之一。腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與Fas/FasL表達失衡密切相關(guān)[3-4]。
劉燦均等[5]的研究顯示，F(xiàn)as在癌變黏膜中表達率明顯低于癌前病變及正常黏膜，這提示Fas表達的下調(diào)及細胞凋亡的減少可能對胃癌的發(fā)生發(fā)展有著重要意義。化療藥物通過誘導低表達Fas的腫瘤細胞功能性Fas高表達，使腫瘤細胞凋亡增加，已成為腫瘤化療的思路之一。As2O3誘導腫瘤細胞凋亡在內(nèi)、外實驗中都得到了驗證，然而這一過程是否依賴Fas/FasL系統(tǒng)目前尚存在爭議。通過細胞培養(yǎng)的方法，ROJEWSKI等[6]的研究表明，As2O3誘導的CCRF-CEM和Jurkat細胞凋亡不依賴Fas/FasL系統(tǒng);而ZHU等[7]的研究則證明，As2O3誘導RL和HL-60細胞凋亡依賴Fas/FasL系統(tǒng)。
本研究結(jié)果顯示，As2O3對人胃癌移植瘤的生長具有明顯的抑制作用。光鏡、電鏡下觀察及TUNEL檢測都表明治療組胃癌細胞的凋亡明顯多于對照組，且凋亡細胞有集中分布現(xiàn)象;治療組Fas的表達也明顯高于對照組，并有集中高表達現(xiàn)象。由于本研究結(jié)合電鏡、TUNEL及免疫組化等形態(tài)學定位的優(yōu)勢，證明胃癌細胞凋亡集中的區(qū)域恰恰是Fas高表達的區(qū)域，也就是說胃癌細胞凋亡的增加與Fas表達的上調(diào)有關(guān)。這比其他通過細胞培養(yǎng)或流式細胞計數(shù)得到的結(jié)果更為可靠、直觀。鄔萬新等[8]通過原位觀察胃癌細胞的Fas/FasL表達和凋亡情況，并結(jié)合胃癌的臨床病理特征，結(jié)果顯示Fas(+)/FasL(+)組和Fas(+)/FasL(-)組之間的凋亡數(shù)量無差異，從而推論腫瘤細胞自身表達的FasL并不能增加腫瘤細胞的凋亡，只有表達FasL的淋巴細胞才能使表達Fas的細胞凋亡。這與本研究結(jié)果不符。因為裸鼠T細胞缺陷，只有極少量的巨噬細胞、NK細胞等腫瘤殺傷細胞浸潤到腫瘤組織，而在Fas高表達區(qū)域有大量的胃癌細胞凋亡，如果胃癌細胞自身表達的FasL不參與其凋亡，就很難有大量的胃癌細胞集中發(fā)生片狀凋亡。本研究從形態(tài)學定位的角度證明胃癌細胞凋亡的增加與其Fas表達的上調(diào)密不可分，由此推論：①細胞表面Fas的表達只有上調(diào)到一定程度才能發(fā)生凋亡;②腫瘤細胞的凋亡可能不是孤立行為，發(fā)生凋亡的細胞會影響其周圍細胞的生存狀態(tài);③腫瘤細胞凋亡集中的區(qū)域也是腫瘤細胞高增殖的區(qū)域，As2O3誘導高增殖的腫瘤細胞高表達Fas，繼而誘導其凋亡。腫瘤細胞表達的FasL不僅引起腫瘤細胞自身凋亡，亦可作用于免疫系統(tǒng)，造成表達Fas的免疫細胞凋亡，造成腫瘤細胞的免疫逃逸。本研究結(jié)果顯示，經(jīng)As2O3化療后，胃癌移植瘤FasL的表達無明顯變化， 即As2O3化療不會增加胃癌細胞的免疫逃逸。因為本實驗為體內(nèi)實驗，雖然裸鼠缺乏T細胞，但仍然有少量的巨噬細胞、NK細胞等腫瘤殺傷細胞。這一結(jié)果提示，As2O3抗人胃癌的過程可能不會增加免疫逃逸醫(yī).學全.在.線52667788.cn。
此外，以前的研究顯示As2O3能顯著誘導NB4細胞凋亡而并不依賴Fas/FasL系統(tǒng)，因為NB4細胞表面沒有Fas表達[9]。ZHU等[7]的研究也顯示，封閉腫瘤細胞表面Fas，只能部分抑制As2O3誘導的腫瘤細胞凋亡，并不能完全阻止其凋亡。這說明As2O3誘導腫瘤細胞凋亡，除了依賴Fas/FasL系統(tǒng)外，還可能有其他途徑。
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