醫(yī)學(xué)論文范文:CE�睧CL法同時(shí)測(cè)定復(fù)方磷酸可待因中三種成分的方法學(xué)研究

(electrochemiluminescence)試劑聯(lián)吡啶釕配合物Ru(bpy)2+3發(fā)生的電化學(xué)發(fā)光反應(yīng)，建立了對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定的新方法。

毛細(xì)管電泳(capillary electrophoresis)已成為一種重要的分離技術(shù)。在分析科學(xué)尤其是生命科學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)中起著很重要的作用[6]。在電化學(xué)發(fā)光體系中，電化學(xué)發(fā)光試劑聯(lián)吡啶釕配合物Ru(bpy)2+3已被成功地用于免疫分析、DNA分析、藥物分析和機(jī)理的研究等諸多領(lǐng)域[7��8]。把毛細(xì)管電泳與電化學(xué)發(fā)光分析法有機(jī)結(jié)合起來(lái)，可以將毛細(xì)管電泳的高分離能力與電化學(xué)發(fā)光高靈敏度檢測(cè)優(yōu)點(diǎn)相結(jié)合[9��11]。CE�睧CL聯(lián)用同時(shí)測(cè)定復(fù)方磷酸可待因口服溶液所含多種混合物中三種藥物含量的方法未見(jiàn)報(bào)道。本文建立的新方法對(duì)于科學(xué)準(zhǔn)確地控制和管理麻醉及精神藥品起到了很好的作用。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

MPI�睞型毛細(xì)管電泳電化學(xué)發(fā)光檢測(cè)器(西安瑞邁電子科技有限公司)。pHs��2C型酸度計(jì)(上海華僑儀器廠)。KQ218超聲清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。毛細(xì)管長(zhǎng)50cm、內(nèi)徑為25μm (河北永年光導(dǎo)纖維廠)。聯(lián)吡啶釕(Sigma公司)儲(chǔ)備液0.1mol/L：取聯(lián)吡啶釕約2.0g，精密稱定至1.8715g，用二次蒸餾水稀釋并定容至25mL，即得100mmol/L的儲(chǔ)備液，使用前逐級(jí)稀釋至所需濃度。用Na2HPO4和NaH2PO4(西安化學(xué)試劑廠)配制一系列pH值的磷酸鹽緩沖液。實(shí)驗(yàn)中所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水。實(shí)驗(yàn)中所有進(jìn)入毛細(xì)管的溶液須用0.22μm醋酸纖維素膜過(guò)濾。

磷酸可待因和鹽酸麻黃堿對(duì)照品均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供，純度分別為99.8%和99.7%。馬來(lái)酸溴苯那敏原料藥執(zhí)行企業(yè)內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，由沈陽(yáng)新地藥業(yè)有限公司提供，含量在98.5%以上(國(guó)藥準(zhǔn)字H20052113)。復(fù)方磷酸可待因口服溶液購(gòu)自香港澳美制藥廠。批號(hào)：0706302，0803302，0804302;規(guī)格：每5mL樣品中含有磷酸可待因4.5mg，馬來(lái)酸溴苯那敏2.0mg，鹽酸麻黃堿5.0mg和愈創(chuàng)木酚甘油醚。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

混合對(duì)照品溶液的配制：準(zhǔn)確稱取經(jīng)105℃干燥至恒重的磷酸可待因、鹽酸麻黃堿、馬來(lái)酸溴苯那敏對(duì)照品分別約為45，50，20mg，置50mL量瓶中，用二次蒸餾水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液1mL，置10mL量瓶中，用二次蒸餾水溶解并稀釋至刻度，搖勻，得混合對(duì)照品溶液。用0.22μm醋酸纖維素膜過(guò)濾,取過(guò)濾液進(jìn)行測(cè)定。用前逐級(jí)稀釋至所需濃度。

樣品溶液的配制：取復(fù)方磷酸可待因口服溶液1mL，置10mL容量瓶中，用二次蒸餾水溶解并稀釋至刻度，搖勻，再用0.22μm醋酸纖維素膜過(guò)濾,取過(guò)濾液進(jìn)行測(cè)定。

毛細(xì)管的預(yù)處理與檢測(cè)池的安裝：將未涂層的新毛細(xì)管使用前依次用1mol/L NaOH溶液在60℃沖洗30min，使毛細(xì)管內(nèi)壁生成硅醇基，再依次用0.1mol/L NaOH溶液、二次蒸餾水、運(yùn)行緩沖液各沖洗10min。每次使用前毛細(xì)管分別以NaOH溶液、二次蒸餾水、磷酸鹽緩沖液各沖洗5min。兩次進(jìn)樣中間可僅用緩沖液沖洗。

2 結(jié)果

2.1 分離條件的優(yōu)化

分離高壓對(duì)ECL光強(qiáng)的影響： 當(dāng)毛細(xì)管兩端所加分離高壓在3～19kV范圍內(nèi)變化時(shí)，發(fā)現(xiàn)當(dāng)其高于15kV時(shí)，基線噪音變得明顯，可能是由于較大的分離電壓使毛細(xì)管內(nèi)焦耳熱效應(yīng)增加，峰形變差。另一方面，參照進(jìn)樣體積公式[12]：Vi=Ei ×ti ×Vcapillary/Es×tm，Ei表示進(jìn)樣電壓，Es表示分離電壓，ti表示進(jìn)樣時(shí)間，tm表示分析物的遷移時(shí)間，Vcapillary表示毛細(xì)管的體積�？煽闯鲭S著分離高壓的增大，進(jìn)樣量的減少可能導(dǎo)致發(fā)光效率的降低。實(shí)驗(yàn)中采用15kV作為分離電壓醫(yī).學(xué)全.在.線網(wǎng)站52667788.cn。

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