甘草浸膏—甘草酸的測(cè)定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測(cè)定甘草浸膏中甘草酸的含量。

本方法適用于生藥與制劑的分析。

取甘草浸膏研細(xì)，置50mL容量瓶中，加流動(dòng)相超聲提取，放冷，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，濾過，進(jìn)入高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外檢測(cè)器檢測(cè)甘草酸的吸收值，計(jì)算出其含量。

1.冰醋酸

2.甲醇（色譜純)

3.醋酸銨

1 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

C₁₈柱（250×4.6mm )。

2 色譜條件

2.1 流動(dòng)相：0.2mol/L醋酸銨溶液 冰醋酸溶液 甲醇=33 1 67

2.3柱溫：28℃

2.4 流速：1.0mL/min

2.5檢測(cè)波長(zhǎng)：250nm

1. 對(duì)照品溶液的制備

精密稱取甘草酸銨對(duì)照品20.9mg，置50ml量瓶中，加流動(dòng)相使溶解并稀釋至刻度，搖勻，得含甘草酸銨411.73μg/ml溶液（相當(dāng)于甘草酸403.3μg/ml)，作為對(duì)照品儲(chǔ)備液。

5.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

分別精密吸取1、2、3、5、8ml于10ml容量瓶中，以流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，得使成含甘草酸40.33、80.66、120.99、201.65、322.64、4.033μg/ml的濃度的對(duì)照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

取甘草浸膏研細(xì)，精密稱取粉末約0.1g，置50ml容量瓶中，加流動(dòng)相約40ml，超聲20min，取出，放冷，加流動(dòng)相至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

分別吸取各濃度溶液10μl注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以甘草酸量（μg)為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。的制備取續(xù)濾液，精密量取10μl注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算含量。

6.2 供試品的測(cè)定

精密量取10ul 注入高效液相色譜儀，測(cè)定峰面積。以外標(biāo)法計(jì)算含量。用紫外檢測(cè)器測(cè)定甘草酸的吸收度，以標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度對(duì)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，進(jìn)行線性回歸，得到回歸方程。

2. 供試品的測(cè)定

精密吸取上述供試品溶液10μL注入高效液相色譜儀，用紫外檢測(cè)器測(cè)定甘草酸的吸收度，計(jì)算出其含量。

王紫秋，雷凱琴，包冬香，HPLC法測(cè)定甘草浸膏中甘草酸的含量，浙江化工，2002，33（2)：20-21