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維血寧顆粒-大黃素的含量測(cè)定方法-HPLC-UV

  
方法名稱(chēng):
  維血寧顆粒-大黃素的含量測(cè)定-HPLC-UV
應(yīng)用范圍:
  用于維血寧顆粒中大黃素的含量測(cè)定
方法原理:
 本品細(xì)粉加甲醇超聲提取、加酸水解、氯仿提取,經(jīng)液相色譜分離,在437nm處測(cè)定峰面積,外標(biāo)法計(jì)算含量
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件:
 

儀器設(shè)備  :美國(guó) Waters 高效液相色譜系統(tǒng)(waters515泵、waters2487雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器、Millennium32:工作站);上海BransonSB3200(220/50赫茲)超聲波清洗儀;瑞士Mettler Toledo ae 240型電子分析天平

色譜條件:色譜柱:Kromasil C18柱(4.6 mm×250mm,5 μm);流動(dòng)相:乙腈-水-冰醋酸(60∶40∶1);檢測(cè)波長(zhǎng):437nm;流速:1.0 ml/min;柱溫:30℃。
試樣制備:
 

對(duì)照品溶液的制備  精密稱(chēng)取大黃素對(duì)照品7.49 mg,置100ml量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,精密量取1ml10ml量瓶中,加甲醇溶解并稀釋至刻度,搖勻,即得(1ml中含大黃素7.49μg)

供試品溶液的制備   取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物,混勻,研細(xì),取約5g,精密稱(chēng)定,置100ml量瓶中,加甲醇約90ml,超聲處理(功率250W,頻率30kHz)30min,放冷,加甲醇至刻度,搖勻,濾過(guò),精密量取續(xù)濾液20ml,置100ml圓底燒瓶中,揮去甲醇,加2.5mol/L硫酸溶液20ml,加熱回流1h,放冷,加氯仿約30ml,繼續(xù)回流2h,冷卻,移置分液漏斗中,用少量氯仿洗滌容器,洗液并入分液漏斗中,分取氯仿層,酸液用氯仿提取2次,每次約8ml,合并氯仿液,以無(wú)水硫酸鈉脫水,減壓回收至干,殘?jiān)蛹状际谷芙猓哭D(zhuǎn)移至25ml 量瓶中,用甲醇稀釋至刻度,搖勻,用0.45μm 濾膜過(guò)濾
操作步驟:
  在選定的色譜條件下,分別吸取對(duì)照品和供試品溶液各10μl進(jìn)樣,測(cè)定峰面積值,按外標(biāo)法計(jì)算含量
附件:
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備注:
 
參考文獻(xiàn):
  李建忠,朱文學(xué). 維血寧顆粒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究. 藥物鑒定. 2005,14(5):41~42
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