西藏紅豆杉葉—紫杉醇的含量測定方法—HPLC-DAD

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方法名稱：

西藏紅豆杉葉—紫杉醇的含量測定—HPLC-DAD

應(yīng)用范圍：

用于西藏紅豆杉葉中紫杉醇的含量測定

方法原理：

本品用甲醇超聲提取，過氧化鋁柱，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm處測定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：

儀器設(shè)備 Agilent1100高效液相色譜儀；DAD檢測器；Agilent1100色譜工作站。

色譜條件色譜柱：Kromasil-C18 (250mm×4.6mm，5 μm)柱；流動(dòng)相：甲醇-水 (65∶35) ；流量：0.8ml/min；檢測波長：227nm；柱溫：35 ℃。

試樣制備：

對(duì)照品溶液的制備準(zhǔn)確稱取對(duì)照品紫杉醇1.0mg，置于1.0mL容量瓶中，以甲醇溶解并定容，配制成相應(yīng)濃度的對(duì)照品儲(chǔ)備液，使用時(shí)用甲醇稀釋成濃度0.01mg/ml，作為對(duì)照品溶液。。

供試品溶液的制備準(zhǔn)確稱取粉碎至80目的樣品5g，，加入甲醇20mL，超聲提取1h，抽濾，以甲醇洗滌濾渣2次，每次1mL.濾渣重復(fù)上述操作，所得濾液與前一次濾液合并，回收大部分溶劑后，與2g中性氧化鋁吸附混合，干燥1小時(shí)裝入預(yù)先裝填好的中性氧化鋁(10g)小柱上，用氯仿100%淋洗至流出液無色，然后用三氯甲烷-甲醇(100：5)洗脫至綠色帶至柱底層止，溫水浴揮干，殘?jiān)眉状既芙獠⒍ㄈ葜?mL，即得供試品溶液。

操作步驟：

精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，依上述色譜條件測定，按外標(biāo)法計(jì)算含量。

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備注：

參考文獻(xiàn)：

吳江，盧永昌，朱小軍.固相萃取-反相高效液相色譜法測定西藏紅豆杉葉中紫杉醇的含量.青海師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版).2006，（3)：71～73

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