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一種RNA等溫轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增檢測(cè)方法及其試劑盒

公開(公告)號(hào) CN1944680A  
公開(公告)日 2007.04.11  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200610117085.7  
申請(qǐng)日期 2006.10.13  
專利名稱 一種RNA等溫轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增檢測(cè)方法及其試劑盒  
主分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分類號(hào) C12Q1/68(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 上海復(fù)星醫(yī)藥(集團(tuán))股份有限公司;上海復(fù)星醫(yī)學(xué)科技發(fā)展有限公司  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 吳大治;夏 懿;沈維祥  
地址 200010上海市黃浦區(qū)復(fù)興東路2號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 上海泰能知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所  
代理人 黃志達(dá);林德杰  
國省代碼 上海;31  
主權(quán)項(xiàng) 一種RNA等溫轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增檢測(cè)方法,步驟依次包括: (1)RNA模板在60~70℃下解鏈后降溫; (2)加入逆轉(zhuǎn)錄酶、核糖核酸酶H、RNA聚合酶,在引物的引導(dǎo)下37~42℃于進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增,獲得RNA擴(kuò)增子; (3)利用寡核苷酸標(biāo)記的納米金探針檢測(cè)RNA擴(kuò)增子,通過顯色反應(yīng)獲得檢測(cè)結(jié)果。  
摘要 本發(fā)明涉及一種RNA等溫轉(zhuǎn)錄擴(kuò)增檢測(cè)方法及其試劑盒,檢測(cè)步驟依次包括:RNA模板在60~70℃下解鏈后降溫;加入逆轉(zhuǎn)錄酶、核糖核酸酶H、RNA聚合酶,在引物的引導(dǎo)下37~42℃于進(jìn)行等溫?cái)U(kuò)增,獲得RNA擴(kuò)增子;利用寡核苷酸標(biāo)記的納米金探針檢測(cè)RNA擴(kuò)增子,通過顯色反應(yīng)獲得檢測(cè)結(jié)果。雜交液/微孔板/試紙顯示藍(lán)色為陽性,顯示紅色為陰性。采用本方法的試劑盒具有簡(jiǎn)便、快速、靈敏、易于保存等優(yōu)點(diǎn),能克服已有技術(shù)成本高、操作費(fèi)時(shí)費(fèi)力、特異性低等不足,適用于實(shí)驗(yàn)研究、臨床檢測(cè)、食品安全檢測(cè)、藥物篩選等領(lǐng)域中的RNA檢測(cè)。  
國際公布  
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