| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1304565C |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2007.03.14 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN200310113089.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.12.26 |
| 專利名稱 | 一種用稀土元素促進(jìn)新疆紫草愈傷組織生長(zhǎng)的方法 |
| 主分類號(hào) | C12N5/04(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12N5/04(2006.01)I;A01H4/00(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 中國(guó)科學(xué)院過(guò)程工程研究所 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 王玉春;葛 鋒;王曉東 |
| 地址 | 100080北京市海淀區(qū)中關(guān)村北二條1號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | 北京泛華偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 |
| 代理人 | 王鳳華 |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種使用稀土元素促進(jìn)新疆紫草愈傷組織生長(zhǎng)的方法，其特征在于，步驟如下： 1)誘導(dǎo)新疆紫草愈傷組織 將新疆紫草的外植體接種于含有植物激素的改良N6固體培養(yǎng)基I中進(jìn)行誘導(dǎo)培育，10-30天后長(zhǎng)出新疆紫草愈傷組織； 所述的改良N6固體培養(yǎng)基I的組分和含量為：每1L的N6固體培養(yǎng)基中含有0.1-0.7mg的萘乙酸、0.1-0.7mg的2，4-二氯苯氧乙酸和0.5-4.0mg的激動(dòng)素； 2)將步驟1)誘導(dǎo)培育獲得的新疆紫草愈傷組織置于改良N6固體培養(yǎng)基II中進(jìn)行繼代生長(zhǎng)2-3個(gè)周期，每個(gè)周期的培養(yǎng)時(shí)間為10-30天； 所述的改良N6固體培養(yǎng)基II的組分和含量為：每1L的N6固體培養(yǎng)基中含有0.5-5mg/L激動(dòng)素； 3)篩選高產(chǎn)紫草素及其衍生物的新疆紫草愈傷組織 將步驟2)中繼代生長(zhǎng)2-3個(gè)周期的新疆紫草愈傷組織轉(zhuǎn)接到合成培養(yǎng)基III上，在24-26℃溫度和無(wú)光條件下培養(yǎng)16-25天后，測(cè)定并選出其紫草素及其衍生物含量比天然新疆紫草藥材含量高出1倍的新疆紫草愈傷組織細(xì)胞系； 所述的合成培養(yǎng)基III的配方為：KNO3680mg/L；NaH2PO4·2H2O 19mg/L；NaSO41917mg/L；CuCl2·2H2O0.1364mg/L；H3BO31.6mg/L；FeSO4·7H2O 1.1mg/L；NaEDTA·2H2O1.5mg/L；激動(dòng)素0.5mg/L；肌醇100mg/L；蔗糖50g/L；瓊脂6g/L； 4)將步驟3)得到的新疆紫草愈傷組織細(xì)胞系置于步驟2)中所述的改良N6固體培養(yǎng)基II中進(jìn)行10-25天的預(yù)培養(yǎng)； 5)將步驟4)中經(jīng)預(yù)培養(yǎng)的新疆紫草愈傷組織細(xì)胞系轉(zhuǎn)入含有稀土元素Nd或混合稀土的改良N6固體培養(yǎng)基IV中，培養(yǎng)10-30天； 所述的改良N6固體培養(yǎng)基IV中Nd或混合稀土含量為：每1L的N6固體培養(yǎng)基中Nd或混合稀土含量為0.01-0.5mmol；所述混合稀土的成分和含量為：71.5％La2O3+25.9％CeO2+2.4％Pr6O11+0.2％Sm2O3，w/w。 |
| 摘要 | 本發(fā)明涉及使用稀土元素促進(jìn)新疆紫草愈傷組織生長(zhǎng)的方法：首先從新疆紫草外植體誘導(dǎo)出愈傷組織，愈傷組織繼代若干次后，選出紫草素及其衍生物高產(chǎn)細(xì)胞系，通過(guò)將不同種類和不同濃度的稀土元素添加到固體培養(yǎng)基上，使新疆紫草的愈傷組織快速增殖，從而建立了從外植體出發(fā)，快速獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)新疆紫草愈傷組織的培養(yǎng)體系，為實(shí)現(xiàn)工業(yè)規(guī)模生產(chǎn)紫草素及其衍生物奠定了基礎(chǔ)。 |
| 國(guó)際公布 |
