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一種通過重組前肽實(shí)現(xiàn)生物活性肽的基因治療方法

公開(公告)號(hào) CN1919343A  
公開(公告)日 2007.02.28  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN200510043139.5  
申請(qǐng)日期 2005.08.24  
專利名稱 一種通過重組前肽實(shí)現(xiàn)生物活性肽的基因治療方法  
主分類號(hào) A61K48/00(2006.01)I  
分類號(hào) A61K48/00(2006.01)I;C07K1/00(2006.01)I;C07K14/00(2006.01)I  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 楊廣孝  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 楊廣孝  
地址 710025陜西省西安市洪慶工業(yè)園區(qū)10號(hào)  
頒證日  
國際申請(qǐng)  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 西安新思維專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司  
代理人 李 罡  
國省代碼 陜西;61  
主權(quán)項(xiàng) 一種通過重組前肽實(shí)現(xiàn)生物活性肽的基因治療方法,依次包括下述步驟,(一)確定生物活性肽的序列:選定具有特異生物學(xué)活性的肽;(二)在目的肽的基端加裝信號(hào)肽酶識(shí)別序列:根據(jù)不同的目的肽進(jìn)行加裝;(三)根據(jù)目的肽序列推導(dǎo)cDNA編碼:根據(jù)已經(jīng)加裝了信號(hào)肽酶識(shí)別點(diǎn)的目的肽序列,依據(jù)優(yōu)勢(shì)密碼子原則推導(dǎo)出編碼目的肽的cDNA;(四)編碼目的肽的cDNA合成:按照真核表達(dá)生物活性肽技術(shù)的要求,在cDNA的3`-端加終止子和需要的限制性內(nèi)切酶識(shí)別序列;(五)將加裝了信號(hào)肽酶識(shí)別點(diǎn)-目的肽-終止子和內(nèi)切酶識(shí)別點(diǎn)的雙鏈cDNA片段插入表達(dá)生物活性肽的載體中制備表達(dá)盒;上述載體是一種插入了NT3或NT4長鏈信號(hào)肽/引導(dǎo)肽的真核細(xì)胞表達(dá)質(zhì)粒。  
摘要 本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種通過重組前肽實(shí)現(xiàn)生物活性肽的基因治療方法。本發(fā)明要克服現(xiàn)有技術(shù)存在的無法達(dá)到工業(yè)化生產(chǎn)要求,成本高昂、無法作為藥物進(jìn)入臨床同時(shí)表達(dá)的產(chǎn)物大多數(shù)不能實(shí)現(xiàn)生物活性肽的預(yù)防和治療作用問題。本發(fā)明的技術(shù)方案是:依次包括下述步驟,(一)確定生物活性肽的序列:選定具有特異生物學(xué)活性的肽;(二)在目的肽的氨基端加裝信號(hào)肽酶識(shí)別序列:根據(jù)不同的目的肽進(jìn)行加裝;(三)根據(jù)目的肽序列推導(dǎo)cDNA編碼;(四)編碼目的肽的cDNA合成;(五)將加裝了信號(hào)肽酶識(shí)別點(diǎn)一目的肽-終止子和內(nèi)切酶識(shí)別點(diǎn)的雙鏈cDNA片段插入表達(dá)生物活性肽的載體中制備表達(dá)盒。  
國際公布  
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