| 公開(公告)號 | CN1821423A |
| 公開(公告)日 | 2006.08.23 |
| 申請(專利)號 | CN200510028953.X |
| 申請日期 | 2005.08.19 |
| 專利名稱 | 一種抗關節(jié)炎藥物細胞靶標篩選系統(tǒng)及篩藥的方法 |
| 主分類號 | C12Q1/68(2006.01)I |
| 分類號 | C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/09(2006.01)I;C12N15/63(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 上海凱曼生物科技有限公司 |
| 發(fā)明(設計)人 | 龔邦強;郭 雷;連霽虹;紀 偉 |
| 地址 | 200233上海市漕河涇高科技開發(fā)區(qū)田林路219號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | 上海開祺知識產(chǎn)權代理有限公司 |
| 代理人 | 費開逵;謝文凱 |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權項 | 一種抗關節(jié)炎藥物的細胞靶標篩選系統(tǒng)由如下步驟組成： a)將mPGES-1promoter、COX-1promoter和COX-2promoter的部分基因克隆進pGL3BN載體Luciferase基因上游的克隆位點XhoI/HindIII、NheI/XhoI、XhoI/BglII之間重組載體pGL3BN/mPGES-1promoter、pGL3BN/COX-1promoter、pGL3BN/COX-2promoter； b)將構建好的重組質(zhì)粒pGL3BN/mPGES-1promoter、pGL3BN/COX-1promoter、pGL3BN/COX-2promoter利用脂質(zhì)體轉染法分別轉染人A549細胞株； c)利用有限稀釋法篩選得到基因水平上穩(wěn)定表達的篩藥細胞靶標M1、M2和M3； d)mPGES-1promoter的表達啟動其下游Luciferase的表達。以Luciferase表達水平反映mPGES-1promoter表達程度。同理適用COX-1promoter及COX-2promoter組成共同的靶標篩選系統(tǒng)。 |
| 摘要 | 本發(fā)明建立了一種抗關節(jié)炎藥物的細胞靶標篩選系統(tǒng)及篩藥的方法。本發(fā)明建立的細胞靶標篩藥系統(tǒng)是運用分子克隆技術，分別將mPGES-1 promoter、COX-1 promoter和COX-2promoter部分基因克隆進人細胞株，獲得在基因水平上表達的篩藥細胞靶標M1、M2和M3，進而共同組成細胞靶標篩藥系統(tǒng)。通過測定被篩選化合物抑制M1、M2和M3細胞luciferase表達的程度來篩選抗關節(jié)炎藥物。 |
| 國際公布 |
