| 公開(公告)號(hào) | CN100338223C |
| 公開(公告)日 | 2007.09.19 |
| 申請(qǐng)(專利)號(hào) | CN02125767.1 |
| 申請(qǐng)日期 | 2002.08.16 |
| 專利名稱 | 一種單鏈DNA快速制備技術(shù)及試劑盒 |
| 主分類號(hào) | C12P19/34(2006.01)I |
| 分類號(hào) | C12P19/34(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 趙 翀 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 趙 翀 |
| 地址 | 100083北京市海淀區(qū)學(xué)院路丁11號(hào)西二樓408室 |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國(guó)省代碼 | 北京;11 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種用于核酸的測(cè)序、反義寡核苷酸藥物的合成、單鏈探針的制備以及SELEX分子文庫(kù)的構(gòu)建的單鏈核酸快速制備試劑盒，其特征在于它至少包括一管生物微粒，所述生物微粒是表面具有由環(huán)氧乙基、碘乙基、酰肼基、環(huán)化亞胺碳酸鹽、氰酸酯和吖內(nèi)酯組成的連接分子層的固相基質(zhì)微粒；一套用于固/液相分離的分離裝置；并含有下述所有成分：①至少有一管為DNA聚合酶或其酶活性的片段、基因重組產(chǎn)物或酶修飾物；②至少有一管為反轉(zhuǎn)錄酶；③至少有一管為核酸連接酶；④至少有一管為dNTP或rNTP，其中至少有一種成分為指示分子的標(biāo)記物；⑤至少有一管為非固相寡核苷酸引物；⑥至少有一管為電泳樣品緩沖液；⑦至少有一管為ddNTPs，其中有一種成分為指示分子的標(biāo)記物；⑧至少有一管為DNA依賴的RNA聚合酶；⑨至少有一管為緩沖液。 |
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種單鏈DNA快速制備技術(shù)及試劑盒的制備方法。該技術(shù)快速、靈敏、純度高，制備方法簡(jiǎn)便、成本低，適合各種規(guī)模不同核酸樣品的DNA測(cè)序和探針制備。主要特征在于將一條引物通過固相合成或化學(xué)偶聯(lián)等方法固定在固相基質(zhì)微粒的表面獲得固相引物，以靶核酸為模板在固相基質(zhì)的表面進(jìn)行固相PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物經(jīng)加熱變性，使DNA雙鏈解鏈，而由固相引物延伸獲得的DNA單鏈仍然保留在固相基質(zhì)的表面；分離固/液相獲得兩條互補(bǔ)的DNA單鏈。運(yùn)用本發(fā)明制備的單鏈DNA和RNA可用于核酸的測(cè)序，反義寡核苷酸藥物的合成、單鏈探針的制備以及SELEX分子文庫(kù)的構(gòu)建等，可廣泛地用于生物學(xué)、醫(yī)藥學(xué)、疾病預(yù)防、農(nóng)牧業(yè)、食品與衛(wèi)生、能源與化工、環(huán)境監(jiān)測(cè)以及醫(yī)學(xué)診斷與檢測(cè)等領(lǐng)域。 |
| 國(guó)際公布 |
