| 公開(公告)號 | CN1322126C |
| 公開(公告)日 | 2007.06.20 |
| 申請(專利)號 | CN99804195.5 |
| 申請日期 | 1999.02.04 |
| 專利名稱 | 免疫原性降低和/或清除率降低的葡激酶衍生物的鑒定、生產(chǎn)和應用 |
| 主分類號 | C12N15/31(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/31(2006.01)I;C07K14/31(2006.01)I;A61K38/16(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | 1998.2.4 EP 98200323.8;1998.2.6 EP 98200365.9 |
| 申請(專利權(quán))人 | 思羅姆-X股份有限公司;德西雷·何塞·科倫 |
| 發(fā)明(設計)人 | 德西雷·何塞·科倫 |
| 地址 | 比利時勒芬 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | 1999-02-04 PCT/EP1999/000748 |
| 進入國家日期 | 2000.09.19 |
| 專利代理機構(gòu) | 中國國際貿(mào)易促進委員會專利商標事務所 |
| 代理人 | 樊衛(wèi)民 |
| 國省代碼 | 比利時;BE |
| 主權(quán)項 | 具有基本上如圖1所示的氨基酸序列的葡激酶衍生物，其特征在于所述衍生物具有至少氨基酸K130T和K135R的替換，且所述衍生物選自：SakSTAR(K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，K130T，K135R)，SakSTAR(K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(G36R，H43R，K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(E65A，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(K74Q，K86A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，T71S，K74Q，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，E108A，K109A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，K121A，K130T，K135R)，SakSTAR(E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K35A，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65D，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65S，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(S34G，G36R，K74R，K130T，K135R)，SakSTAR(E65A，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65N，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74R，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K57A，E58A，E61A，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65D，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65Q，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K35A，E65D，K74Q，E80A，D82A，K130T，K135R)，SakSTAR(K74R，E80A，D82A，S103A，K130T，K135R)，SakSTAR(E65D，K74R，E80A，D82A，K109A，K130T，K135R)，SakSTAR(K35A，E65Q，K74R，E80A，D82A，T90A，E99D，T101S，E108A，K109A，K130T，K135R)。 |
| 摘要 | 鑒定、生產(chǎn)和應用葡激酶衍生物的方法，其特征在于在對患者施用后免疫原性降低，并且能通過單次靜脈內(nèi)大劑量注射施用。本發(fā)明的衍生物的獲得方法包括，制備至少包含提供生物活性的葡激酶編碼序列部分的DNA片段；對該DNA片段進行體外定點誘變，以將野生型氨基酸的一個或多個密碼子替換為另一種氨基酸的密碼子；在適當?shù)妮d體中克隆突變的DNA片段；用該載體轉(zhuǎn)化或轉(zhuǎn)染適當?shù)乃拗骷毎辉谶m于表達該DNA片段的條件下培養(yǎng)該宿主細胞。將表達的葡激酶衍生物純化為均一的，并用硫醇基定點的聚乙二醇化學修飾置換的Cys；該DNA片段優(yōu)選地是質(zhì)粒pMEX602sakB(pMEX.sakSTAR)的453bp EcoRI-HindIII片段，通過剪接重疊延伸聚合酶鏈反應進行體外定點誘變，并在大腸桿菌株TG1或WK6中表達突變的DNA片段。本發(fā)明也涉及包含至少一種根據(jù)本發(fā)明的葡激酶衍生物與適當賦形劑的藥用組合物，用于動脈血栓形成的治療。 |
| 國際公布 | 1999-08-12 WO1999/040198 英 |
