熒光共振能量轉(zhuǎn)移類寡核苷酸基因芯片制備方法
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公開(公告)號
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CN1147592C
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公開(公告)日
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2004.04.28
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申請(專利)號
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CN01139251.7
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申請日期
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2001.12.27
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專利名稱
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熒光共振能量轉(zhuǎn)移類寡核苷酸基因芯片制備方法
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主分類號
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C12Q1/68
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分類號
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C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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上海交通大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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劉喜朋;劉建華;陳潔;林志新
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地址
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200030 上海市華山路1954號
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頒證日
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2004.04.28
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海交達(dá)專利事務(wù)所
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代理人
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毛翠瑩
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國省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種熒光共振能量轉(zhuǎn)移類寡核苷酸基因芯片制備方法，其特征在于將寡核苷酸片段兩端預(yù)先用相應(yīng)的熒光基團(tuán)標(biāo)記，一個(gè)是熒光供體基團(tuán)，另一個(gè)是熒光受體基團(tuán)，片段的中間用生物素標(biāo)記，熒光標(biāo)記的寡核苷酸片段以微點(diǎn)陣的形式固定于鏈親和素包被的玻片表面，具體步驟如下：第一步，將鏈親和素固定于玻片表面；第二步，化學(xué)合成寡核苷酸片段，這種片段的序列特征是5’-末端的序列將與目標(biāo)區(qū)域的3’-序列配對，3’-末端的序列將與目標(biāo)區(qū)域的5’-序列配對，中間序列是寡聚胸腺核苷酸，這種片段的修飾特征是兩個(gè)末端分別用熒光供體基團(tuán)和熒光受體基團(tuán)修飾，中間用生物素修飾，寡核苷酸片斷中間的生物素基團(tuán)用于寡核苷酸片段在鏈親和素包被玻片表面的固定；第三步，修飾過的寡核苷酸片段微點(diǎn)陣化固定于用鏈親和素包被的玻片表面，制備熒光共振能量轉(zhuǎn)移類寡核苷酸基因芯片。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種熒光共振能量轉(zhuǎn)移類寡核苷酸基因芯片制備方法，采用將寡核苷酸片段兩端分別用不同的熒光基團(tuán)進(jìn)行標(biāo)記，中間用生物素標(biāo)記的方法，將標(biāo)記的寡核苷酸片段以微點(diǎn)陣列的形式固定于鏈親和素包被的玻片表面，從而制備熒光共振能量轉(zhuǎn)移類基因芯片。本發(fā)明制備的基因芯片可用于檢測待測核酸的種類與含量，單核苷酸多態(tài)性分析以及疾病診斷等領(lǐng)域，待測樣品無需預(yù)先用熒光標(biāo)記，由于探針分子沒有莖環(huán)結(jié)構(gòu)，因此與目標(biāo)核酸雜交時(shí)沒有能量障礙，檢測的靈敏度高，目標(biāo)分子可以是DNA、RNA、單鏈核酸、雙鏈核酸，因此可以提高檢測通量。
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國際公布
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