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川貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜鑒定方法

公開(公告)號(hào) CN1487091A  
公開(公告)日 2004.04.07  
申請(qǐng)(專利)號(hào) CN03131798.7  
申請(qǐng)日期 2003.07.30  
專利名稱 貝母類藥材聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜鑒定方法  
主分類號(hào) C12P19/34  
分類號(hào) C12P19/34;C12Q1/68  
分案原申請(qǐng)?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(qǐng)(專利權(quán))人 中國(guó)藥科大學(xué)  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 李萍;王沖之  
地址 210038江蘇省南京市神農(nóng)路1號(hào)  
頒證日  
國(guó)際申請(qǐng)  
進(jìn)入國(guó)家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 南京知識(shí)律師事務(wù)所  
代理人 胡錫瑜  
國(guó)省代碼 江蘇;32  
主權(quán)項(xiàng) 一對(duì)聚合酶鏈反應(yīng)擴(kuò)增引物的DNA堿基序列,其特征在于DNA序列為:P:5’-CGT AAC AAG GTT TCC GTA GGT GAA-3’,P2:5’-GCT ACG TTC TTCATC GAT-3’。  
摘要 本發(fā)明屬于中藥材種質(zhì)的品質(zhì)鑒定技術(shù)領(lǐng)域,目的是提供一種準(zhǔn)確鑒別川貝母與非川貝母類藥材的聚合酶鏈反應(yīng)-限制性酶切圖譜分子鑒定方法(PCR-RFLP)。PCR擴(kuò)增所用引物序列為:P1:5’-CGT AAC AAG GTT TCC GTA GGTGAA-3’,P2:5’-GCT ACG TTC TTC ATC GAT-3’;川貝母的特征DNA堿基序列為:5’-TGCCCGCCCT GCCCGGGACC TCGC-3’;限制性內(nèi)切酶Sma I及其同切酶可識(shí)別并切割該序列。鑒定過程如下:提取藥材DNA;用引物P1、P2進(jìn)行PCR擴(kuò)增;用限制性內(nèi)切酶Sma I或其同切酶消化PCR產(chǎn)物;瓊脂糖凝膠電泳分析結(jié)果;通過與川貝母PCR-RFLP特征結(jié)果相比較,即可判斷供試品是否川貝母藥材。  
國(guó)際公布  
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