公開(公告)號
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CN1441057A
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公開(公告)日
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2003.09.10
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申請(專利)號
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CN02114901.1
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申請日期
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2002.02.27
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專利名稱
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動物乳腺內(nèi)表達(dá)表皮生長因子的重組DNA的構(gòu)建方法
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主分類號
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C12N15/63
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分類號
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C12N15/63;C12N15/87;C12N15/89;C12N15/12;A61K38/18;C07K14/485
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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黃偉民
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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黃偉民;溫漢平
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地址
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510075廣東省廣州市廣州大道北542號白云區(qū)軍休所11棟602號
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頒證日
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國際申請
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進(jìn)入國家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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代理人
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國省代碼
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廣東;44
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主權(quán)項(xiàng)
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一種用分子生物學(xué)技術(shù)構(gòu)建重組DNA以在動物乳汁中獲得表皮生長因子的方法,其特征是將包含有動物乳蛋白基因啟動子和/或增強(qiáng)子的DNA片段與表皮生長因子DNA的完整或不完整片段直接或間接相連,經(jīng)過一些必要的修飾后裝入適當(dāng)?shù)腄NA載體,構(gòu)成重組DNA,以此重組DNA配合乳腺導(dǎo)管內(nèi)注射或其它建立生物反應(yīng)器的方法,在乳汁中獲得活性表皮生長因子。
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摘要
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本發(fā)明涉及一種用分子生物學(xué)技術(shù)在乳汁中獲得表皮生長因子的方法,克服了用現(xiàn)有技術(shù)提取或人工生產(chǎn)表皮生長因子之技術(shù)難度大、成本高、產(chǎn)量低等不足,將包含有動物乳蛋白基因啟動子和/或增強(qiáng)子的DNA片段與表皮生長因子DNA的完整或不完整片段直接或通過T7RNA聚合酶與T7啟動子偶連系統(tǒng)等方法間接相連,經(jīng)過一些必要的修飾后裝入適當(dāng)?shù)腄NA載體,構(gòu)成重組DNA,經(jīng)過克隆篩選、擴(kuò)增、純化之后,與脂質(zhì)體等物質(zhì)混合,然后直接注入動物的乳腺導(dǎo)管內(nèi),讓重組DNA進(jìn)入乳腺分泌細(xì)胞,或用常規(guī)的建立生物反應(yīng)器的方法建立乳腺定位表達(dá)生物反應(yīng)器,在分泌細(xì)胞分泌乳汁時(shí),重組DNA得以表達(dá),用常規(guī)的方法擠得乳汁,可從乳汁中獲重組DNA的表達(dá)產(chǎn)物——表皮生長因子,本方法具有方法簡單、成本低、表皮生長因子活性高、產(chǎn)量高等優(yōu)點(diǎn)。
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國際公布
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