| 公開(kāi)(公告)號(hào) | CN1438314A |
| 公開(kāi)(公告)日 | 2003.08.27 |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利)號(hào) | CN03115725.4 |
| 申請(qǐng)日期 | 2003.03.07 |
| 專(zhuān)利名稱(chēng) | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2 基因修飾的組織工程化骨的構(gòu)建 |
| 主分類(lèi)號(hào) | C12N5/08 |
| 分類(lèi)號(hào) | C12N5/08;C12N5/10;A61L27/00 |
| 分案原申請(qǐng)?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 | 上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬第九人民醫(yī)院 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人 | 戴尅戎;湯亭亭;樓覺(jué)人;徐小良 |
| 地址 | 200011上海市制造局路639號(hào) |
| 頒證日 | |
| 國(guó)際申請(qǐng) | |
| 進(jìn)入國(guó)家日期 | |
| 專(zhuān)利代理機(jī)構(gòu) | 上海東亞專(zhuān)利代理有限公司 |
| 代理人 | 董梅 |
| 國(guó)省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨的構(gòu)建，涉及種子細(xì)胞分離培養(yǎng)與擴(kuò)增，和載體處理與組織工程化人工骨的構(gòu)建，其特征在于：所述種子細(xì)胞分離培養(yǎng)與擴(kuò)增是從髂前上嵴上穿刺抽取骨髓，與肝素化的低糖a-MEM完全培養(yǎng)基混勻，接種于培養(yǎng)皿上，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱孵育，3天后半量換液，一周后完全換液，以后每周更換培養(yǎng)基2次，約于12天，貼壁細(xì)胞幾乎90％匯合，吸凈培養(yǎng)基，以PBS沖洗2次，加入1ml0.05％胰蛋白酶(含0.02％EDTA)，置于37℃、5％CO2培養(yǎng)箱孵育5分鐘，加入9ml低糖a-MEM完全培養(yǎng)基以中和胰蛋白酶的活性，用吸管輕輕吹打細(xì)胞使成單細(xì)胞懸液，按1∶3進(jìn)行傳代培養(yǎng)，95％匯合后用攜帶有人BMP-2基因的腺病毒感染；所述載體處理與組織工程化人工骨的構(gòu)建是利用可吸收雙相煅燒骨為細(xì)胞載體材料，其內(nèi)表面經(jīng)可溶性膠原涂層，植入前收集BMP-2基因轉(zhuǎn)染后第3天的自體MSC，取總量為2×108細(xì)胞，用2ml無(wú)血清α-MEM制成細(xì)胞懸液，投入煅燒骨一顆，抽真空，將細(xì)胞懸液吸入煅燒骨中，37℃下培養(yǎng)4天。 |
| 摘要 | 本發(fā)明為骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨的構(gòu)建與應(yīng)用，涉及生物、醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2基因修飾的組織工程化骨的構(gòu)建，涉及種子細(xì)胞分離培養(yǎng)與擴(kuò)增，和載體處理與組織工程化人工骨的構(gòu)建，以及一種在體內(nèi)骨生成的方法。裸鼠皮下誘導(dǎo)成骨試驗(yàn)，復(fù)合BMSC的煅燒骨植入后3周，可見(jiàn)煅燒骨內(nèi)表面有大量新骨形成。尤其適用于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域各種類(lèi)型骨缺損的修復(fù)。 |
| 國(guó)際公布 |
