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用于生產(chǎn)口蹄疫疫苗的山萵苣葉綠體轉(zhuǎn)化植物的獲得方法

公開(公告)號 CN1429906A  
公開(公告)日 2003.07.16  
申請(專利)號 CN01145165.3  
申請日期 2001.12.31  
專利名稱 用于生產(chǎn)口蹄疫疫苗的山萵苣葉綠體轉(zhuǎn)化植物的獲得方法  
主分類號 C12N15/33  
分類號 C12N15/33;C12N15/82;C12N15/90;A61K39/12  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 甘肅亞盛集團(tuán);中國科學(xué)院遺傳研究所  
發(fā)明(設(shè)計(jì))人 周長生;胡贊民;杜若甫;陳正華  
地址 730030甘肅省蘭州市張掖路219號基隆大廈21層  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu) 中科專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司  
代理人 李悅  
國省代碼 甘肅;62  
主權(quán)項(xiàng) 一種生產(chǎn)口蹄疫多肽疫苗的山萵苣葉綠體轉(zhuǎn)基因植物的獲得方法,包括以下步驟:(1)合成口蹄疫多肽疫苗基因序列,使之與報(bào)告基因或具有強(qiáng)免疫源性蛋白的基因串聯(lián)得到融合的疫苗基因,該融合的疫苗基因連接于萵苣葉綠體psbA基因啟動(dòng)子下游從而構(gòu)建為葉綠體表達(dá)框;(2)構(gòu)建用于向山萵苣葉綠體中定點(diǎn)轉(zhuǎn)化外源基因的萵苣葉綠體相關(guān)DNA序列;(3)將步驟(2)構(gòu)建出來的DNA序列與步驟(1)合成的融合的口蹄疫多肽疫苗基因重組,使融合的疫苗基因序列位于萵苣葉綠體相關(guān)DNA序列的中間;(4)將步驟(3)中重組得到的DNA片段插入到克隆載體的多克隆位點(diǎn)上,作為口蹄疫多肽疫苗基因山萵苣葉綠體定點(diǎn)轉(zhuǎn)化載體;和(5)用得到的轉(zhuǎn)化載體轉(zhuǎn)化山萵苣植物細(xì)胞,獲得葉綠體表達(dá)多肽疫苗的轉(zhuǎn)基因植物。  
摘要 本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)口蹄疫多肽疫苗的山萵苣葉綠體轉(zhuǎn)基因植物獲得的方法。該方法包括:口蹄疫多肽疫苗基因序列及其合成方法,如合成的SEQ ID NO:1及SEQ ID NO:2所示序列,將該序列與綠色熒光蛋白基因串聯(lián),得到融合的疫苗基因。該融合疫苗基因連接于萵苣葉綠體psbA基因啟動(dòng)子下游從而構(gòu)建為葉綠體表達(dá)框。同時(shí)將該疫苗基因構(gòu)建到SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示序列之間,構(gòu)建成山萵苣葉綠體定點(diǎn)轉(zhuǎn)化載體。用該轉(zhuǎn)化載體轉(zhuǎn)化山萵苣,并獲得表達(dá)口蹄疫多肽疫苗的山萵苣葉綠體轉(zhuǎn)基因植物。  
國際公布  
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