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吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑α2在酵母中的表達(dá)及生產(chǎn)方法

公開(公告)號 CN101109012A  
公開(公告)日 2008.01.23  
申請(專利)號 CN200710130674.3  
申請日期 2007.07.16  
專利名稱 吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑α2在酵母中的表達(dá)及生產(chǎn)方法  
主分類號 C12N15/09(2006.01)I  
分類號 C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;A61K38/48(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N  
分案原申請?zhí)?  
優(yōu)先權(quán)  
申請(專利權(quán))人 劉德虎  
發(fā)明(設(shè)計)人 劉德虎  
地址 100081北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號26樓丁單元208號  
頒證日  
國際申請  
進(jìn)入國家日期  
專利代理機(jī)構(gòu)  
代理人  
國省代碼 北京;11  
主權(quán)項 一種通過重組酵母高效表達(dá)和生產(chǎn)吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑α2的方法,它包括DSPAα2基因的人工合成、表達(dá)載體的構(gòu)建、高表達(dá)酵母重組子的篩選、重組酵母的發(fā)酵及重組蛋白的表達(dá)、純化,其特征在于編碼重組蛋白的基因是按照酵母所偏愛的密碼子進(jìn)行優(yōu)化的DSPAα2基因,并在DSPAα2基因的5’端前添加6組氨酸標(biāo)簽編碼序列,同時優(yōu)化重組酵母菌發(fā)酵及重組蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的條件。  
摘要 本發(fā)明涉及在酵母中高效表達(dá)和生產(chǎn)吸血蝙蝠唾液纖溶酶原激活劑α2(DSPAα2)重組蛋白的方法,其中包括使用密碼子得到優(yōu)化的DSPAα2基因、特定的酵母菌發(fā)酵培養(yǎng)生長條件以提高其生物產(chǎn)量以及在DSPAα2基因的5’端前添加6組氨酸標(biāo)簽編碼序列以方便DSPAα2重組蛋白的快速分離和純化。DSPAα2可激活人纖溶酶原并使其轉(zhuǎn)變成有活性的纖溶酶,由此進(jìn)一步造成纖維蛋白的水解,故該重組蛋白在今后非常有希望被開發(fā)成為一種治療人類各種急性血栓類疾病的蛋白類藥物。  
國際公布  
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