公開(公告)號
|
CN101109012A
|
公開(公告)日
|
2008.01.23
|
申請(專利)號
|
CN200710130674.3
|
申請日期
|
2007.07.16
|
專利名稱
|
吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑α2在酵母中的表達(dá)及生產(chǎn)方法
|
主分類號
|
C12N15/09(2006.01)I
|
分類號
|
C12N15/09(2006.01)I;C12N15/12(2006.01)I;C12P21/02(2006.01)I;C07K14/435(2006.01)I;C12N1/19(2006.01)I;A61K38/48(2006.01)I;A61P7/02(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N
|
分案原申請?zhí)? |
|
優(yōu)先權(quán)
|
|
申請(專利權(quán))人
|
劉德虎
|
發(fā)明(設(shè)計)人
|
劉德虎
|
地址
|
100081北京市海淀區(qū)中關(guān)村南大街12號26樓丁單元208號
|
頒證日
|
|
國際申請
|
|
進(jìn)入國家日期
|
|
專利代理機(jī)構(gòu)
|
|
代理人
|
|
國省代碼
|
北京;11
|
主權(quán)項
|
一種通過重組酵母高效表達(dá)和生產(chǎn)吸血蝙蝠纖溶酶原激活劑α2的方法,它包括DSPAα2基因的人工合成、表達(dá)載體的構(gòu)建、高表達(dá)酵母重組子的篩選、重組酵母的發(fā)酵及重組蛋白的表達(dá)、純化,其特征在于編碼重組蛋白的基因是按照酵母所偏愛的密碼子進(jìn)行優(yōu)化的DSPAα2基因,并在DSPAα2基因的5’端前添加6組氨酸標(biāo)簽編碼序列,同時優(yōu)化重組酵母菌發(fā)酵及重組蛋白誘導(dǎo)表達(dá)的條件。
|
摘要
|
本發(fā)明涉及在酵母中高效表達(dá)和生產(chǎn)吸血蝙蝠唾液纖溶酶原激活劑α2(DSPAα2)重組蛋白的方法,其中包括使用密碼子得到優(yōu)化的DSPAα2基因、特定的酵母菌發(fā)酵培養(yǎng)生長條件以提高其生物產(chǎn)量以及在DSPAα2基因的5’端前添加6組氨酸標(biāo)簽編碼序列以方便DSPAα2重組蛋白的快速分離和純化。DSPAα2可激活人纖溶酶原并使其轉(zhuǎn)變成有活性的纖溶酶,由此進(jìn)一步造成纖維蛋白的水解,故該重組蛋白在今后非常有希望被開發(fā)成為一種治療人類各種急性血栓類疾病的蛋白類藥物。
|
國際公布
|
|