| 公開(公告)號 | CN101153278A |
| 公開(公告)日 | 2008.04.02 |
| 申請(專利)號 | CN200610116765.7 |
| 申請日期 | 2006.09.29 |
| 專利名稱 | 重組人粒細(xì)胞集落刺激因子的生產(chǎn)方法 |
| 主分類號 | C12N15/09(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/09(2006.01)I;C12N15/27(2006.01)I;C07K14/53(2006.01)I;C12N1/21(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權(quán) | |
| 申請(專利權(quán))人 | 上海新生源醫(yī)藥研究有限公司 |
| 發(fā)明(設(shè)計)人 | 黃陽濱;孫九如;張 翊;任 軍;張繼崗;梁光軍 |
| 地址 | 201203上海市徐匯區(qū)田林路398號4樓A座 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進(jìn)入國家日期 | |
| 專利代理機(jī)構(gòu) | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 上海;31 |
| 主權(quán)項(xiàng) | 一種重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)的生產(chǎn)方法，其特征在于，它包含以下步驟： a.獲得優(yōu)化的重組人巨噬細(xì)胞集落刺激因子的DNA序列； b.構(gòu)建合適表達(dá)載體； c.轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，篩選獲得高表達(dá)的工程細(xì)胞。 |
| 摘要 | 本發(fā)明提供了一種重組人粒細(xì)胞集落刺激因子(rhG-CSF)的編碼序列、生產(chǎn)該重組人粒細(xì)胞集落刺激因子的方法，以及用于該方法的表達(dá)載體和宿主細(xì)胞。采用了pET30a(+)表達(dá)rhG-CSF，獲得了高水平的表達(dá)菌株；通過控制發(fā)酵條件，達(dá)到了較高蛋白表達(dá)率；進(jìn)一步表達(dá)形式分析發(fā)現(xiàn)其為包涵體表達(dá)。在此基礎(chǔ)上對分泌表達(dá)的重組人粒細(xì)胞集落刺激因子的純化進(jìn)行了大量的摸索和研究后，得到了一套重組人粒細(xì)胞集落刺激因子純化方法。用本法，可得到高得率、高純度的重組人粒細(xì)胞集落刺激因子蛋白，并能滿足臨床需要。本發(fā)明可高效、簡便、低成本地獲得重組人粒細(xì)胞集落刺激因子純品。 |
| 國際公布 |
