鼠疫耶爾森菌俗稱鼠疫桿菌,是烈性傳染病鼠疫的病原菌。鼠疫是自然疫源性傳染病,通過直接接觸染疫動物或節(jié)肢動物叮咬而感染。臨床常見腺鼠疫、敗血型鼠疫和肺鼠疫。
1.生物學(xué)特征
。1)形態(tài)與染色:鼠疫耶爾森菌為革蘭陰性桿菌,形態(tài)短而粗,兩端鈍圓,兩極濃染,大小為(1.0~2.0)μm×(0.5~0.7)μm.有莢膜,無鞭毛,無芽孢。陳舊培養(yǎng)物或3%氯化鈉瓊脂培養(yǎng)基上呈明顯多形性。
。2)培養(yǎng):需氧和兼性厭氧,在普通培養(yǎng)基上即可生長。最適生長溫度是28℃~30℃。培養(yǎng)基最適pH為6.9~7.1.培養(yǎng)16~18h,用顯微鏡觀察可見一層形狀不一,淺灰色小菌落,這是鼠疫耶爾森菌培養(yǎng)初期的菌落特征,這對本菌的鑒定有一定意義。在培養(yǎng)24~48h后可形成直徑0.1~0.2mm,圓形。中心突出,透明的淺灰色小菌落。72h后菌落直徑可達(dá)4mm.在液體培養(yǎng)基中生長良好,開始渾濁生長醫(yī)學(xué).全在.,線提,供52667788.cn,24h后為沉淀生長,48h后形成菌膜,稍加震動菌膜呈鐘乳石狀下垂。
。3)生化反應(yīng):不活躍,在雙糖鐵培養(yǎng)基上可分解葡萄糖,少數(shù)菌株可分解乳糖,不產(chǎn)生硫化氫,MIU培養(yǎng)基無動力,不產(chǎn)生靛基質(zhì),尿素酶試驗陰性。
2.微生物學(xué)檢驗
。1)標(biāo)本采集:主要采集血液、痰和淋巴結(jié)穿刺液。
。2)檢驗方法及鑒定:鼠疫耶爾森菌為甲類病原菌,傳染性極強,故應(yīng)嚴(yán)格遵守檢驗操作規(guī)程,要求實驗室有隔離設(shè)施,防鼠、防蚤和嚴(yán)密的個人防護(hù)措施;用過的實驗器材及物品隨時消毒處理。
1)直接涂片檢查:一般制片兩張,分別用于革蘭染色和美藍(lán)染色,可見革蘭陰性球桿菌,形似芝麻,兩端濃染。
2)分離培養(yǎng):鼠疫耶爾森菌學(xué)檢驗中分離培養(yǎng)步驟十分重要,分離培養(yǎng)時未污染標(biāo)本可直接接種血平板,污染標(biāo)本則需接種選擇性培養(yǎng)基,如龍膽紫亞硫酸鈉瓊脂。經(jīng)28℃~30℃培養(yǎng)24~48h后,挑選菌落作鑒定。
3)鑒定:根據(jù)菌落特征,細(xì)菌形態(tài)和肉湯中呈“鐘乳石”狀發(fā)育,KIA結(jié)果利用葡萄糖,不利用乳糖,不產(chǎn)H2S,MIU均為陰性反應(yīng)。為作最后鑒定應(yīng)補充以下實驗方法:①噬菌體裂解試驗;②動物試驗;③免疫學(xué)方法。