網(wǎng)站首頁
醫(yī)師
藥師
護士
衛(wèi)生資格
高級職稱
住院醫(yī)師
畜牧獸醫(yī)
醫(yī)學(xué)考研
醫(yī)學(xué)論文
醫(yī)學(xué)會議
考試寶典
網(wǎng)校
招聘
最新更新
網(wǎng)站地圖
您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 執(zhí)業(yè)獸醫(yī) > 養(yǎng)豬 > 養(yǎng)豬問答 > 正文:豬藍(lán)耳病毒的分離與鑒定是怎樣的?豬病咨詢診斷治療預(yù)防
    

豬病咨詢:豬藍(lán)耳病毒的分離與鑒定是怎樣的?

豬藍(lán)耳病毒的分離與鑒定是怎樣的?
-----
目前多將豬原代肺泡巨噬細(xì)胞、CL2621細(xì)胞系和Marc145細(xì)胞用于該病毒培養(yǎng)的分離。 細(xì)胞培養(yǎng)法:病毒分離樣品選擇和采取的所有操作應(yīng)為無菌規(guī)程進(jìn)行。用免疫組化技術(shù)檢查發(fā)現(xiàn),病毒存在于病豬的肺泡巨噬細(xì)胞,細(xì)支氣管上皮、肺泡上皮細(xì)胞,脾臟的紅髓及邊緣區(qū)的巨噬細(xì)胞內(nèi)。①病毒分離的首選材料是肺、扁體、脾、淋巴結(jié)和血清,死產(chǎn)和流產(chǎn)胎兒的脾肺血清和胸水是適宜的檢驗材料,弱胎豬和有呼吸道癥狀的急性感染豬的檢出率最高。②常用細(xì)胞培養(yǎng)法的細(xì)胞系:已知PRRS病毒能在豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)、傳代細(xì)胞CL2621和Marc145等細(xì)胞系生長。③病毒的分離取流產(chǎn)胎兒,新生仔豬的肺、脾、肝、腎、心、腦、扁桃體、支氣管、淋巴結(jié)、胸腺和骨髓勻漿制成懸液,進(jìn)行分離病毒。用含抗生素的維持液(含2%胎牛血清隨MEM營養(yǎng)液)做1:10稀釋,4500r/min離心30min,經(jīng)0.45nm濾膜過濾,上清用MEM做1:30稀釋,接種于豬肺泡巨噬細(xì)胞(PAM)或CL2621、MA104細(xì)胞單層,于35℃吸附24h,加含4%胎牛血清的MEM,培養(yǎng)7d,觀察CPE。首次傳代有時可能無CPE,需傳2-3代。不同的毒株可能適應(yīng)不同的細(xì)胞系,有些毒株僅能在PAM或僅能在CL2621細(xì)胞中生長,歐洲株在PAM_上的復(fù)制速度更快、效率更高,而CL2621更有利于北美毒株的分離。出現(xiàn)CPE并能被特異的抗血清中和的樣品即為PRRS病毒。也可將分離到的病毒用免疫過氧化物酶單層細(xì)胞試驗進(jìn)行鑒定。大多數(shù)分離物都能適應(yīng)PAM,尤其是用血清作為分離樣品,但不同的毒株對不同細(xì)胞是有選擇的。有的只能在一種細(xì)胞上生長,有的可在多種細(xì)胞上生長。以血清和肺組織分離成功率最高,木乃伊胎最低?捎糜诓《捐b定的技術(shù)有單克隆抗體或多克隆抗體免疫熒光抗體技術(shù)和單層過氧化物酶試驗,RT-PCR技術(shù)以及電鏡技術(shù)。
-----

學(xué)習(xí)了,
畜牧導(dǎo)航: 養(yǎng)豬資訊   豬價格行情   養(yǎng)豬技術(shù)   豬病防治   飼養(yǎng)管理   養(yǎng)豬問答   養(yǎng)豬視頻
 豬品種
關(guān)于我們 - 聯(lián)系我們 -版權(quán)申明 -誠聘英才 - 網(wǎng)站地圖 -網(wǎng)絡(luò)課程 - 幫助
醫(yī)學(xué)全在線 版權(quán)所有© CopyRight 2006-2046, MED126.COM, All Rights Reserved
浙ICP備12017320號
百度大聯(lián)盟認(rèn)證綠色會員 實名網(wǎng)站 360認(rèn)證 可信網(wǎng)站 中網(wǎng)驗證