豬圓環(huán)病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬鏈球菌、豬附紅細胞體混
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在華東地區(qū)某豬場暴發(fā)種母豬急性死亡為主要特征的疫情，種母豬體溫升高，全身
黃疸，排茶色尿等癥狀，引起大批死亡，給豬場造成嚴重的經(jīng)濟損失，根據(jù)
流行病學調(diào)查、臨床癥狀、病理變化并結(jié)合實驗室檢驗，診斷該病為豬圓環(huán)病毒、豬繁殖呼吸綜合征病毒、豬鏈球菌和豬附紅細胞體混合感染，報告如下。?1 材料1.1 病料 臨床上以全身黃疸，排茶色尿等典型癥狀病死豬2頭，取肺、扁
桃體、脾、淋巴結(jié)、腎等組織待檢。?1.2 小鼠
揚州大學實驗動物中心20 g的青年小鼠?2 方法和結(jié)果 ?2.1 流行病學調(diào)查 該豬場從外地購回種母豬100頭，商品豬500頭，建場以來生產(chǎn)正常。7月初，種母豬出現(xiàn)體溫升高，全身黃疸，發(fā)病1～2天，突然死亡，發(fā)病1個月，該豬場種母豬已死亡30頭，發(fā)病80頭，商品豬正常。2.2 癥狀表現(xiàn) 患豬精神沉郁，體溫40～42℃，食欲減少，
嗜睡，呼吸加快，體表淋巴結(jié)腫大，少數(shù)豬
腹瀉、關(guān)節(jié)腫大，不愿站立或行走，患豬病后期，全身黃疸，排茶色尿，
醬油色糞便，病程1～7天。?2.3 病理變化 剖檢2頭典型癥狀的病死豬，主要病變：皮下脂肪黃染、
水腫，腹股溝淋巴結(jié)、肺門淋巴結(jié)出血、腫大，腸系膜淋巴結(jié)實質(zhì)性腫大并見化膿性病灶，胸、
腹水增多，肺蝦肉樣變，呈紫褐色，肝小葉結(jié)締組織增生，脾腫大，腎水腫，被膜有白色壞死灶，膀胱出血，心冠脂肪出血，胃黏膜剝落，回結(jié)腸壁變薄。2.4 實驗室檢驗?2.4.1 細菌學檢查（1)無菌采集耳靜脈血滴于載玻片上，加生理鹽水稀釋后，蓋上蓋玻片，鏡檢，可見紅細胞周圍附著大量蟲體，有單個、多個，且具有較強的折光性，中央發(fā)亮，形似空泡，感染紅細胞形態(tài)也發(fā)生變化，呈齒輪等不規(guī)則形狀。取心血涂片，瑞氏染色，鏡檢，可見單個或成對的革蘭氏陽性球菌。（2)取心血分別接種普通瓊脂、血液瓊脂平板，置37℃溫箱中培養(yǎng)14～16 h后，可見普通瓊脂中生長有半透明、露滴狀菌落，直徑約1～2 mm，血液瓊脂中形成光滑、邊緣整齊、半透明小菌落，周圍呈β溶血，不形成莢膜，V-P反應為陽性。挑取單個菌落涂片，革蘭氏染色，鏡檢，可見大量成對或鏈狀排列的革蘭氏陽性球菌。（3)在
葡萄糖、蔗糖、乳糖、
麥芽糖、果糖、木糖、阿拉伯糖、山梨醇、
甘露醇、衛(wèi)矛醇等培養(yǎng)基中均為陽性，在水楊苷、棉子糖、菊糖、側(cè)
金盞花醇等培養(yǎng)基中呈陰性。（4)將細菌按5～10×108 CFU細菌/鼠的劑量腹腔接種20 g的青年小鼠4只，在2天?內(nèi)死亡，剖檢發(fā)現(xiàn)小鼠脾臟腫大，并從死亡小鼠的心血、脾臟分離到革蘭氏陽性的鏈球菌，確診為致病性鏈球菌。?2.4.2 圓環(huán)病毒診斷取送檢豬的肺、扁桃體、脾、腹股溝淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)按常規(guī)方法提取細胞中的DNA作模板，以PCR方法擴增，并將PCR產(chǎn)物在1.2%瓊脂糖電泳，EB染色，觀察拍照，結(jié)果在420 bp處出現(xiàn)明顯條帶，且與陽性對照一致，故可判為PCV2陽性，即送檢豬均發(fā)現(xiàn)有圓環(huán)病毒感染。?2.4.3 豬繁殖與呼吸綜合征病毒檢驗采用IIFIFC法，用本室保存的3株單克隆抗體（1f9、5A5、5H8)檢測，結(jié)果均為強陽性，可判定該送檢豬感染豬繁殖與呼吸綜合征病毒。?根據(jù)實驗室檢驗，2份檢樣中同時有PCV2、PRRSV、豬鏈球菌和豬附紅細胞體等病原存在，再結(jié)合臨床癥狀及病理剖檢，確診本病為豬圓環(huán)病毒2型、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、豬鏈球菌和豬附紅細胞體混合感染。
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