如何通過血清學(xué)診斷豬
炭疽病?
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血清學(xué)診斷 炭疽沉淀反應(yīng)（Ascoli氏反應(yīng))：當(dāng)病料已經(jīng)腐敗用細菌學(xué)診斷得不到可靠結(jié)果，以及檢查大量畜產(chǎn)品時，可用炭疽沉淀反應(yīng)。采取病料以肝、脾、腎以及血液為適宜。將被檢血液或臟器研磨后，用生理鹽水稀釋5-10倍，煮沸15-20min，取浸出液用中性石棉濾過，用毛細管吸取透明濾液，徐徐重積于小試管內(nèi)的沉淀素血清上，于1-5min內(nèi)如接觸面出現(xiàn)清晰的白色沉淀環(huán)（白輪)，為陽性。莢膜腫脹試驗：有莢膜的炭疽桿菌與抗炭疽莢膜血清結(jié)合產(chǎn)生抗原一抗體反應(yīng)，在莢膜表面發(fā)生輕微的沉淀反應(yīng)，使莢膜增厚，鏡檢時，在炭疽桿菌的周圍可以看到折光性強的莢膜。涂有適當(dāng)稀釋（每個視野約10個菌的濃度)的純培養(yǎng)物的載玻片或感染7- 8h處死的小鼠腹腔液涂片，滴加一滴抗炭疽莢膜血清，混勻，制成濕片，鏡下觀察，如有大桿菌周圍可見邊緣清晰、肥厚不等的莢膜，即為陽性。也可用熒光抗體莢膜染色法，方法是將病料涂片，干燥，固定后用炭疽莢膜血清（即用異硫氰酸熒光素標(biāo)記的提純的抗炭疽莢膜血清抗體)染色后，用熒光顯微鏡觀察，則炭疽菌的菌體高度膨大，莢膜呈明亮黃綠色熒光。但應(yīng)注意類屬反應(yīng)問題。對炭疽芽孢可用炭凝集試驗，乳膠凝集試驗進行診斷，數(shù)分鐘之內(nèi)即可得出結(jié)果。 炭凝集試驗：玻璃板上滴加被檢標(biāo)本O.lmL（用0.2%
氯化鈉溶液稀釋)，然后加入炭疽炭粉血清0.05mL，混勻，靜置1-5min，凡出現(xiàn)“++”以上凝集者，即使炭粉一半凝集，且液體較透明者為陽性，該反應(yīng)可檢出每毫升約含78000個以上的炭疽桿菌芽孢標(biāo)本。乳膠凝集試驗：同一玻板上，分別滴加被檢材料2滴，每滴O.lmL，另一側(cè)分別滴加標(biāo)準(zhǔn)炭疽抗原2滴，每滴也為O.lmL，然后再分別往被檢材料滴及炭疽標(biāo)準(zhǔn)抗原滴中滴加炭疽乳膠血清及正常乳膠血清各0.05mL，分別混勻，室溫下靜置，5min內(nèi)判定結(jié)果。當(dāng)三個對照滴：炭疽乳膠血清加標(biāo)準(zhǔn)炭疽抗原呈“++++"，正常乳膠血清加標(biāo)準(zhǔn)炭疽抗原呈“一”，正常乳膠血清加被檢標(biāo)本呈“一”，出現(xiàn)上述結(jié)果，說明反應(yīng)條件正常，這時炭疽乳膠血清與被檢標(biāo)本滴發(fā)生反應(yīng)者為陽性，不發(fā)生反應(yīng)者為陰性。除以上所介紹的方法外，協(xié)同凝集反應(yīng)，酶聯(lián)植物凝集素吸附試驗，瓊脂擴散沉淀反應(yīng)，酶標(biāo)
葡萄球菌A蛋白(HRP-SPA)間接染色法等也逐步被應(yīng)用于炭疽的診斷。
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學(xué)習(xí)。。。。
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