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雞馬立克氏病火雞皰疹病毒活疫苗的性狀檢驗(yàn)作用用途用法用量等相關(guān)知識(shí)
雞馬立克氏病火雞皰疹病毒活疫苗
JiMalikeshibingHuojiPaozhenbingduHuoyimiao
Marek’sDiseaseVaccine(HVT)，Living
本品系用火雞皰疹病毒Fc-126株，接種于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)，收獲感染細(xì)胞，加入適宜穩(wěn)定劑，經(jīng)裂解、冷凍真空干燥制成。用于預(yù)防雞馬立克氏�。∕D)。
本品為乳白色海綿狀疏松團(tuán)塊，易與瓶壁脫離，加稀釋液后迅速溶解。
依法檢驗(yàn)(附錄169頁)，應(yīng)無菌生長。
依法檢驗(yàn)(附錄172頁)，應(yīng)無支原體生長。
依法檢驗(yàn)(附錄173頁第二項(xiàng))，應(yīng)符合規(guī)定。
將含100～200PFU的疫苗用抗火雞皰疹病毒特異性血清等量混合，18～22℃中和30分鐘后，接種單層細(xì)胞上培養(yǎng)測(cè)定蝕斑，與接種病毒對(duì)照組比，蝕斑減少率應(yīng)不低于95%。
下列方法任選其一。
(1)用l～3日齡易感成SPF雛雞20羽，其中10羽肌肉注射疫苗0.2ml(含10個(gè)使用劑量)，觀察14日，對(duì)照組至少存活8只，免疫組非特異死亡數(shù)不得超過對(duì)照組，判合格。
(2)用10日齡易感成SPF雞胚10只，每胚尿囊腔接種疫苗0.1ml(含10個(gè)使用劑量)，接種后24～4B小時(shí)內(nèi)雞胚非特異死亡不超過20%，死亡雞胚尿囊液對(duì)雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)應(yīng)為陰性，120小時(shí)，收集活胚尿囊液混合，對(duì)雞紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)應(yīng)為陰性。
每批疫苗抽樣3瓶，分別用SPG稀釋，取適當(dāng)稀釋度，每個(gè)稀釋度接種3個(gè)已長成良好單層細(xì)胞的30ml容量瓶，每瓶加入0.2ml，在37～38℃吸附60分鐘，加入含2%牛血清199營養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24小時(shí)，棄去營養(yǎng)液，覆蓋含5%牛血清的E-MEM或199營養(yǎng)瓊脂(糖)，每瓶加3ml，待凝固后，將瓶倒置，繼續(xù)培養(yǎng)5～7日，進(jìn)行蝕斑計(jì)數(shù)。蝕斑應(yīng)典型，清晰，形態(tài)不規(guī)則，邊緣不整齊，直徑0.5～l.5mm，呈乳白色，與同時(shí)設(shè)立的參照品蝕斑一致。計(jì)數(shù)時(shí)，一般選蝕斑數(shù)在30～150個(gè)之間的細(xì)胞瓶進(jìn)行計(jì)數(shù)，用肉眼以蠟筆或記號(hào)筆在瓶底面點(diǎn)
數(shù)，求出同一稀釋度3瓶中平均蝕斑數(shù)，計(jì)算出每瓶疫苗所含蝕斑數(shù)。以3瓶疫苗各稀釋滴度中的最低平均數(shù)核定該批疫苗每羽份中所含的蝕斑數(shù)，每羽份應(yīng)不低于200OPFU。
依法檢驗(yàn)(附錄175頁)，應(yīng)符合獸用生物制品通則的規(guī)定。
依法檢驗(yàn)(附錄181頁)，應(yīng)符合獸用生物制品通則的規(guī)定。
用于預(yù)防雞馬立克氏玻
按瓶簽或說明書稀釋疫苗，每羽肌肉或皮下注射0.2ml(至少合2000PFU)。
(1)已發(fā)生過馬立克氏病的雞場(chǎng)，雛雞應(yīng)在出殼后立即進(jìn)行項(xiàng)防接種。
(2)疫苗應(yīng)隨配隨用，用專用稀釋液稀釋。稀釋后放入盛有冰塊的容器中，必須在l小時(shí)內(nèi)用完。
(1)200羽份／瓶(2)500羽份／瓶(3)1000羽份／瓶(4)1500羽份／瓶(5)2000羽份／瓶
-15℃以下保存，有效期為1年6個(gè)月。
附注
1.SPGA配制
蔗糖76.62gL-谷氨酸單鈉0.83g
磷酸二氫鉀0.52g牛血清白蛋白10g
磷酸氫二鉀(含3個(gè)結(jié)晶水)1.64g
(或磷酸氫二鉀1.25g
補(bǔ)滅菌無離子水或蒸餾水至1000ml，濾過除菌，冷凍保存?zhèn)溆谩?/P>
2.SPG配制同上，但不加牛血清白蛋白。
3.SPG的檢驗(yàn)
(52667788.cn/shouyi/yang/wenda/1)物理性狀為無色或微黃色、透明、不含雜質(zhì)和沉淀的液體。
(2)無菌檢驗(yàn)依法按附錄169頁進(jìn)行，應(yīng)無菌生長。
(3)pH值6.7±0.1
(4)復(fù)原疫苗后的穩(wěn)定性測(cè)定用SPG將疫苗作適當(dāng)稀釋，取稀釋后當(dāng)時(shí)和20℃±2℃靜止l小時(shí)后的疫苗接種細(xì)胞單層，進(jìn)行蝕斑計(jì)數(shù)。稀釋后20℃±2℃放1小時(shí)，疫苗滴度損失不應(yīng)超過40%，為合格。
用同批號(hào)試劑配制多批稀釋液，只需檢驗(yàn)第一批稀釋液，當(dāng)更換任何試劑的批號(hào)時(shí)，則重新抽樣進(jìn)行稀釋液對(duì)疫苗病毒的穩(wěn)定性試驗(yàn)。
