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中國生物制品規(guī)程:枸櫞酸離子含量測定

1 試劑1.1 標準枸櫞酸鈉濃溶液精確稱取枸櫞酸鈉(Na3C6H標準5O7·2H2O)0.5882g,加蒸餾水溶解,并準確稀釋至100ml ,為20mmol/L 枸櫞酸鈉液。1.2 標準枸櫞酸鈉溶液精密量取標準枸櫞酸鈉濃溶液5ml,用5%三氯醋酸準確稀釋至50ml,為2mmol/L枸櫞酸鈉標準液。1.310%三氯醋…

1 試劑

1.1 標準枸櫞酸鈉濃溶液

精確稱取枸櫞酸鈉(Na3C6H標準5O7·2H2O)0.5882g,加蒸餾水溶解,并準確稀釋至100ml ,為20mmol/L 枸櫞酸鈉液。

1.2 標準枸櫞酸鈉溶液

精密量取標準枸櫞酸鈉濃溶液5ml,用5%三氯醋酸準確稀釋至50ml,為2mmol/L枸櫞酸鈉標準液。

1.310%三氯醋酸:稱取三氯醋酸10g,用蒸餾水稀釋至100ml。

1.45%三氯醋酸:稱取三氯醋酸5g,用蒸餾水稀釋至100ml。

1.5 砒啶(A·R)。

1.6 醋酸酐(A·R)。

2 操作

2.1 樣品

精確量取0.5ml樣品,加 4.5ml 蒸餾水,加5ml10%三氯醋酸,混勻,置60℃水浴 5分鐘,離心去沉淀。精確量取1ml上清液于25ml玻塞www.med126.com試管中,加1.3ml吡啶,混勻,加5.7ml 醋酸酐,立即混勻并置于31℃水浴,準確培育35分鐘后,于 425nm波長下測 OD值,同時做空白試驗:取1ml 5%三氯醋酸代替1ml去蛋白后樣品上清液,其余操作同樣品。

2.2 標準曲線

精確量取標準枸櫞酸鈉溶液0.0、0.25、0.50、0.75、1.0ml,分別加5%三氯醋酸1.0、0.75、0.5、0.25、0.0ml。ㄆ湎鄳蔫蹤此徕c離子含量為0、0.5、1.0、1.5、2.0mmol/l52667788.cn/jianyan/ ),其余操作從加1.3ml吡啶開始同樣品?傻靡粯藴是。

3 計算

由標準曲線查得樣品稀釋液相當標準枸櫞酸離子Ammol/L。

樣品枸櫞酸離子含量(mmol/L)=A×20

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