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您現(xiàn)在的位置: 醫(yī)學(xué)全在線 > 理論教學(xué) > 基礎(chǔ)學(xué)科 > 人體寄生蟲學(xué) > 正文:寄生蟲學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù)
    

寄生蟲學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷技術(shù):病原檢查及免疫論斷及新技術(shù)應(yīng)用

 

 。ㄋ)其它器官組織檢查

  1.骨髓穿刺 主要檢查杜氏利什曼原蟲無鞭毛體。一般常作髂骨穿刺,患者側(cè)臥,露出髂骨部位。視年齡大小,選用17~20號帶有針芯的干燥無菌穿刺針,從髂骨前上刺后約1cm處刺入皮下,當(dāng)針尖觸及骨面時,再慢慢地鉆入骨內(nèi)約0.5~1.0cm,即可拔出針芯,接上2ml的干燥注射器,抽取骨髓液。取少許骨髓液作涂片;甲醇固定,同薄血膜染色法染色,油鏡檢。

  2.淋巴結(jié)穿刺

 、爬猜x:檢出率低于骨髓穿刺,但方法簡便、安全,且患者經(jīng)治療后,淋巴結(jié)內(nèi)原蟲消失較慢,故仍有一定價值。一般選腹股溝部,先將局部皮膚消毒,用左手拇指和食指捏住一個較大的淋結(jié),右手取干燥無菌的6號針頭刺入淋巴結(jié),此時淋巴結(jié)組織液自能進(jìn)入針內(nèi)。稍待片刻,拔出針頭,將針頭內(nèi)少量的淋巴結(jié)組織液注于載玻片上,作涂片染色檢查。也可用摘除的淋巴結(jié)的切面做涂片,染色后鏡檢。

  ⑵絲蟲成蟲:可用注射器從可疑的淋巴結(jié)節(jié)中抽取成蟲,或剖檢摘除的結(jié)節(jié)尋找成蟲,也可作病理組織切片檢查。

  3.肌肉活檢

 、判x幼蟲:用外科手術(shù)從患者的腓腸肌或肱或股二頭肌取米粒大小的肌肉一塊,置于載玻片上,加50%甘油滴,蓋上另一載玻片,均勻用力壓緊,低倍鏡下觀察。取下肌肉須立即檢查,否則幼蟲變得模糊,不易檢查。

 、曝i囊尾蚴:摘取肌肉內(nèi)的結(jié)節(jié),剝除外層纖維被膜,在2張載玻片間壓平、鏡檢。也可經(jīng)組織固定后作切片染色檢查。

  4.皮膚 檢查疥螨,蠕形螨,利什曼原蟲等。

 、沤牝簠⒖础敖牝疥瘡”!一節(jié)。
 ⑵蠕形螨:參看“蠕形螨和蠕形螨病”一節(jié)。
、抢猜x:在皮膚上出現(xiàn)丘疹和結(jié)節(jié)等疑似皮膚型黑熱病患者,可選擇皮損較明顯之處,作局部消毒,用干燥滅菌的注射器,刺破皮損處,抽取組織液作涂片;或用消毒的鋒利小剪,從皮損表面剪取一小片皮膚組織,以切面作涂片;也可用無菌解剖刀切一小口,刮取皮膚組織作涂片。以上涂片均用瑞氏或姬氏染液染色。如涂片未見原蟲,可割取小丘疹或結(jié)節(jié),固定后,作組織切片染色檢查。

  5.直腸粘膜 用直腸鏡從直腸粘膜病變組織內(nèi)可查見日本血吸蟲卵及溶組織阿米巴滋養(yǎng)體。

  日本血吸蟲卵:用直腸鏡自直腸取米粒大小的粘膜一塊,經(jīng)水洗后,放在2載玻片間,輕輕壓平,鏡檢。蟲卵鑒別見表21。-3。

表21-3 粘膜內(nèi)血吸蟲卵未染色之鑒別

活卵 近期變性卵 死卵(鈣化卵)
顏色 淡黃至黃褐色 灰白至略黃色 灰褐色至棕紅
卵殼 較薄 薄或不均勻 厚而不均勻
胚膜 清楚 清楚 不清楚
內(nèi)含物 卵黃細(xì)胞或胚團(tuán)或毛蚴 淺灰色或黑色小點(diǎn)或折光均勻的顆粒或萎縮的毛蚴 兩極可有密集的黑點(diǎn)含網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)或塊狀物

  溶組織阿米巴:用乙狀結(jié)腸鏡觀察潰瘍形狀,自潰瘍邊緣或深層刮取潰瘍組織,置于載玻片上,加少量生理鹽水,蓋上蓋片,輕輕壓平,立即鏡檢。也可取出一小塊病變的粘膜組織,固定切片,染色檢查。

  6.肺組織 檢查卡氏肺孢子蟲包囊。取一小塊肺組織作涂片,自然干燥后甲醇固定,用改良銀染色法進(jìn)行染色。

  改良銀染色法染色步驟:

  1.將肺涂片置于5%鉻酸,氧化15分鐘,溫度為20℃。氧化后的標(biāo)本均從流水沖洗數(shù)秒。
2.1%亞硫酸氫鈉經(jīng)1分鐘,自來水沖洗后,蒸餾水洗滌3~4次。
3.放入四胺銀工作液內(nèi),并在60℃孵育約90分鐘,至標(biāo)本轉(zhuǎn)至黃褐色為止。流水、蒸餾水各洗5分鐘。
4.0.1%氯化金2~5分鐘,蒸餾水洗4~5次。
5.2%硫代硫酸鈉5分鐘,流水至少洗10分鐘。
6.亮緣復(fù)染45秒。
7.95%,99%,100%乙醇逐級脫水。
8.二甲苯透明3次,樹膠封片。

  染色結(jié)果顯示,卡氏肺孢子蟲包囊呈圓形、卵圓形或不規(guī)則的多角形,囊壁為淡褐色或深褐色。紅細(xì)胞為淡黃色,其余背景呈淡綠色。

(陳佩惠 姜洪杰)

 

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