（2)夾心法（sandwich assay):將已知的特異抗體包裝在固相載體（塑料板凹孔或紙片上)，加入待檢標(biāo)本，標(biāo)本中的抗原即可與載體上的抗原結(jié)合，洗去未結(jié)合的材料后加入該抗原的酶標(biāo)記抗體，洗去未結(jié)合的酶標(biāo)抗體，加底物顯色，用酶免疫檢測儀測量顏色的光密度，可定量測定抗原。
間接法（indirecr ELISA)常用于檢查特異抗體。先將已知特異抗原包被固相載體，加入待檢標(biāo)本（可能含有相應(yīng)抗體)，再加入酶標(biāo)抗Ig的抗全（即第二抗體)，經(jīng)加底物顯色后，根據(jù)顏色的光密度計(jì)算出標(biāo)本中抗體的含量。
�。�3)BAS-ELISA：近年來對酶免設(shè)分析法的改進(jìn)是使用生物素-親合素-過氧化物酶復(fù)合物作為指示劑，組成一新的生物放大系統(tǒng)進(jìn)一步提高檢測的敏感度�？捎脕頇z測多種抗原抗體系統(tǒng)如細(xì)菌、病毒、腫瘤細(xì)胞表面抗原等。一個(gè)親合素（avidin)分子可以結(jié)合4個(gè)生物素分子（biotin)。結(jié)合非常穩(wěn)定。親合素和生物素都可與抗全、酶、熒光素等分子結(jié)合，而不影響后者的生物活性。一個(gè)抗體分子可偶聯(lián)90個(gè)生物素分子，通過生物素又可連接多個(gè)親合素。因此大提高檢測的敏感度。目前應(yīng)用生物-酶標(biāo)親合素系統(tǒng)（biotinavidin system- ELISA,BAS-ELISA)，它是通過生物素標(biāo)記抗體連接免疫反應(yīng)系統(tǒng)，同時(shí)借助生物素化酶或酶標(biāo)親合素引入酶與底物反應(yīng)系統(tǒng)。
表20－1 免疫學(xué)測定方法敏感性比較
| 測定方法 | 敏感性（每升) |
| 單向免疫擴(kuò)散試驗(yàn) | ＜1～2mg |
| 雙向免疫擴(kuò)散試驗(yàn) | ＜1mg |
| 火箭電泳 | ＜0.5mg |
| 對流電泳 | ＜0.1mg |
| 免疫電泳 | ＜5～10mg |
| 凝集試驗(yàn) | 1μg |
| 被動(dòng)血凝試驗(yàn) | 1μg |
| 血凝抑制試驗(yàn) | 0.1μg |
| 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) | 0.1μg |
| 放射免疫分析法 | ＜1pg |
| 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) | ＜1ng |
| 定量免疫熒光分析 | ＜1pg |
