緒 言
一、病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的性質(zhì)及內(nèi)容
病理生理學(xué)是一門理論性的，同時(shí)也是一門實(shí)驗(yàn)性的科學(xué)，其主要研究方法之一為動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。即在人為控制的條件下，在動(dòng)物身上復(fù)制各種類似人類疾病的動(dòng)物模型。觀察疾病時(shí)機(jī)體的生理機(jī)能和生化代謝的變化及其發(fā)生發(fā)展的全部過程，進(jìn)而闡明疾病發(fā)生發(fā)展的原因和機(jī)制，揭示疾病演變和轉(zhuǎn)歸的基本規(guī)律及病理過程的動(dòng)物身上。采取各種措施進(jìn)行實(shí)驗(yàn)性治療，為治療學(xué)提供理論和實(shí)踐的依據(jù)。
病理生理學(xué)常用的實(shí)驗(yàn)方法有以下兩種：
（一)急性實(shí)驗(yàn)：在短期內(nèi)在動(dòng)物體內(nèi)復(fù)制疾病模型，觀察其發(fā)生民展及結(jié)局。因?yàn)榧毙詫?shí)驗(yàn)常常是在麻醉手術(shù)創(chuàng)傷、失血等條件下進(jìn)行，因此觀察到的現(xiàn)象，有時(shí)不能完全說明整體動(dòng)物在生理?xiàng)l件下的機(jī)能代謝活動(dòng)規(guī)律。因此在實(shí)際應(yīng)用中，我們必須最大限度地縮小和避免其缺點(diǎn)，如要選擇健康的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，麻醉方法要適宜，手術(shù)要輕巧迅速等。對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果要進(jìn)行全面、客觀地分析，才能比較如實(shí)的反映患病機(jī)體的客觀變化。由于實(shí)驗(yàn)課的學(xué)時(shí)有限，大多數(shù)教學(xué)多采用急性實(shí)驗(yàn)。
（二)慢性實(shí)驗(yàn)：這是在指無菌的條件下，給動(dòng)物實(shí)行一定的外科手術(shù)（例如各種瘺管、臟器的切除或移植)，待其恢復(fù)健康后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，或者把一定的致病因子作用于動(dòng)物復(fù)制近似人類的慢性疾病模型，對(duì)疾病過程的各種變化進(jìn)行細(xì)致而長(zhǎng)期的動(dòng)態(tài)觀察。這類方法的最大優(yōu)點(diǎn)是堅(jiān)持了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物機(jī)體的完整性及其與外界環(huán)境的統(tǒng)一性，動(dòng)物處于比較接近自然的狀態(tài)，因此所觀察到的結(jié)果比較接近實(shí)際。但由于慢性實(shí)驗(yàn)時(shí)間長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)設(shè)備和技術(shù)要求高，動(dòng)物園的飼養(yǎng)和護(hù)理要求較嚴(yán)不宜作為教學(xué)實(shí)驗(yàn)。既使根據(jù)教學(xué)需要做一些慢性實(shí)驗(yàn)，同學(xué)們也只能觀察到慢性實(shí)驗(yàn)全部過程中的一部分。
以上實(shí)驗(yàn)均是用動(dòng)物復(fù)制疾病模型，它和人體的疾病來比較，仍有一定的距離，因此所得的實(shí)驗(yàn)材料，不能無條件的照搬于人體，還必須和臨床觀察緊密的地聯(lián)系起來。
二、病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的和要求
病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)課的目的，在于使同學(xué)通過實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證和鞏固部分病理生理學(xué)講授的基本理論，了解和初步掌握復(fù)制疾病模型的實(shí)驗(yàn)方法及病理生理學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本操作技術(shù)，并通過實(shí)驗(yàn)逐步培養(yǎng)和提高學(xué)生的觀察事物、分析問題、解決問題的能力。培養(yǎng)同學(xué)對(duì)科學(xué)工作的嚴(yán)肅態(tài)度，嚴(yán)密的工作方法和實(shí)事求是的工作作風(fēng)。
為了達(dá)到實(shí)驗(yàn)課的目的，要求同學(xué)必須遵守以下實(shí)驗(yàn)規(guī)則：
（一)實(shí)驗(yàn)前要仔細(xì)閱讀實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)、了解實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?shí)驗(yàn)步驟和主要觀察指標(biāo)及其意義，同時(shí)結(jié)合實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，復(fù)習(xí)有關(guān)理論，以便對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和討論。
（三)實(shí)驗(yàn)前要仔細(xì)檢查器材、藥品有無短缺或損壞，如發(fā)現(xiàn)上述情況及時(shí)報(bào)告教師，然后到技術(shù)室登記領(lǐng)取。實(shí)驗(yàn)時(shí)，每組同學(xué)必須明分工，各盡其責(zé)、密切合作，使實(shí)驗(yàn)有條不紊地順利進(jìn)行。各種分工，在不同的實(shí)驗(yàn)中輪流擔(dān)任，使同學(xué)都能在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)方面得到學(xué)習(xí)和鍛煉。順利進(jìn)行。各種分工，在不同實(shí)驗(yàn)中輪流擔(dān)任。使同學(xué)都能在實(shí)驗(yàn)的各個(gè)方面得到學(xué)習(xí)和鍛煉。
（四)實(shí)驗(yàn)操作時(shí)，要按操作規(guī)程使用儀器，要愛護(hù)儀器和公共財(cái)物，無故損壞者，按超定進(jìn)行處理。
（五)仔細(xì)、耐心地觀察實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)的每一反應(yīng)和變化，實(shí)事求是地記錄下來，并運(yùn)用所學(xué)的理論，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析討論。
（六)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)將實(shí)驗(yàn)所用器材擦洗干凈、清點(diǎn)、整理，如有損壞、缺少，應(yīng)及時(shí)報(bào)告負(fù)責(zé)老師、說明儲(chǔ)況。同時(shí)做好實(shí)驗(yàn)室的清潔衛(wèi)生工作，關(guān)好門、窗、水電等，經(jīng)教師允許方能離開實(shí)驗(yàn)室。
（七)每次實(shí)驗(yàn)后，均應(yīng)告出實(shí)驗(yàn)報(bào)告，這是病生教學(xué)實(shí)驗(yàn)的組成部分，因此要求取學(xué)必須作為一項(xiàng)基本功認(rèn)真完成，實(shí)驗(yàn)報(bào)告書寫要精確，扼要，全面，字跡清楚，實(shí)驗(yàn)報(bào)告包括下列內(nèi)容。
1、系別：年級(jí)、小組、姓名、實(shí)驗(yàn)日期
2、實(shí)驗(yàn)題目
3、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
4、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：種類、性別、體重、數(shù)量，健威狀況或一般倘況。
5、實(shí)驗(yàn)方法：原則上應(yīng)寫出，因?qū)嶒?yàn)指導(dǎo)已寫清楚，一般從略。如果儀器、藥品或方法臨時(shí)有所變更，可作簡(jiǎn)短說明。
6、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：是實(shí)驗(yàn)中最重要的部分。應(yīng)將實(shí)驗(yàn)過程申觀察到的現(xiàn)象實(shí)事求是的記述。記述方式可包括為三種(1)文字描述 (2)曲絨圖 (3)表格等。根據(jù)不同的結(jié)果采用最準(zhǔn)確，清楚和適宜的形式。如血壓、呼吸變化，盡量用曲線圖記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
7、實(shí)驗(yàn)討論：討論是根據(jù)所學(xué)的理論知識(shí)對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析、推理、逐步導(dǎo)向結(jié)論的思維過程。討論必須依據(jù)本組的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，如果本組因故未能完成，則應(yīng)認(rèn)真總結(jié)本實(shí)驗(yàn)失敗的原因和教訓(xùn)，并另安排時(shí)間補(bǔ)做。
8、實(shí)驗(yàn)小結(jié)：通過分析討論。對(duì)本次實(shí)驗(yàn)所能驗(yàn)證的概念、原則和理論，用簡(jiǎn)明扼要的文字做一概括。其中也可以包括個(gè)人的體會(huì)和經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)。
三、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)
(一)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的捕捉與固定方法
1、大白鼠的捕捉與固定。
先用右手抓住鼠尾放于鼠籠上;在其向前爬行時(shí)， 甩左手拇指和食指迅速抓住小白鼠兩耳和頸后部的皮膚，用左手的無名指和小指夾住鼠尾和后肢，這樣即可以用左手將小白鼠固定，右手可作注射或其它實(shí)驗(yàn)操作。
2、兔的捕捉與固定。
先用右手抓住兔背部皮膚，輕輕提起，再用另一只收手托住其臀部使其呈坐位姿勢(shì)，放在兔臺(tái)上。最好不要提兔耳，以免家兔過度掙扎而將免耳軟骨折斷或失去生理儲(chǔ)況，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，然后用四根已打好活套的繩子綁住家兔四肢的踝部上一厘米處，將家兔放置呈仰臥位，先將兩前肢綁繩在背后交叉，交叉過來的繩子壓住上肢，分別對(duì)稱地綁在兔臺(tái)邊緣的圓孔或小立柱上，兩后肢不用交叉。然后將兔嘴固定于兔臺(tái)前端的立柱上。
(二)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的注射法
1、家兔耳緣靜脈注射法
首先將家兔耳緣部的毛剪去或拔去，井用一手壓迫耳靜脈近心端，使靜脈充血，用左手拇指和食指持52667788.cn/zhicheng/耳尖，右手持注射器，先從靠耳尖部的血管開始注射，使針尖指向近心端并與皮膚呈10度角，從正面刺入血管，待進(jìn)入血管后，立即使針頭與血管呈平行位置，用左手將兔耳及針頭固定右手食指和中指夾針管拇指推針心，將藥液注入，若針頭巳進(jìn)入血管，肉眼可見藥液流入血管內(nèi)。也可向外略抽一下注射器針心。如有血液回流，即可進(jìn)行藥物注射，如果阻力較大，針尖部皮膚發(fā)自腫脹。說明巳注入血管外，應(yīng)將針頭抽出，重新注射。注射完畢，用棚球壓迫刺口處，再抽出針頭，并輕輕揉壓片刻以防出血。
2、小白鼠腹腔注射;
將小白鼠固定在右手中，右手持汪射器，將針頭從左鼠下腹部朝頭部方向刺入腹腔，回抽注射器時(shí)，如無回血或尿液，表示針頭未刺入腹腔臟器和膀胱，即可進(jìn)行注射。注意針頭不宜靠近上腹部或太深。以免刺破內(nèi)臟。
(三)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的采血法
1.家兔耳緣靜脈取血法
如要采集少量血液，可按耳緣靜脈注射法取血，也可用二甲苯輕擦耳緣靜脈部。待其充血后，在靠近耳尖部的血管處刺破，兔血即由破口流出，取血后用棉球壓迫止血。
2.小白鼠尾部取血法
將鼠固定后，在鼠尾處1/3與內(nèi)2/3交界處，用剪刀剪去尾尖（或切斷)用手輕輕從尾根部向尾尖部擠幾下，血液即可流出。如要間隔多次采血，每次采血時(shí)，可將鼠尾剪去很少一段，取血后用線將鼠尾殘端結(jié)扎，以防繼續(xù)出血。
（四)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法
實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的麻醉方法，可分為全身麻碎和局部麻醉。我們教學(xué)實(shí)驗(yàn)多采用局部麻醉方法。其方法是，用1%普魯卡因溶液作皮下浸潤(rùn)麻醉，麻醉范圍稍大于手術(shù)切□，麻醉藥物劑量依切口大小和深度而定。
(五)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的呼吸血壓描記和常用手術(shù)操作
1、家兔的呼吸描記法
將家兔背位固定于兔臺(tái)上，剪去頸前部之毛，局麻后用手術(shù)刀沿頸中線切開皮膚，從胸骨柄上的1厘米處切至喉頭下lcm,切口約5~7cm,用止血鉗分離皮下組織，肌膜和肌肉，分離出氣管后;在其下面穿一粗線，做一虛結(jié)，在氣管軟骨環(huán)間做倒"T"形切口，插入氣管插管，并將續(xù)扎緊固定，用橡皮管連接氣管插管之另一側(cè)臂與換能器以描記呼吸運(yùn)動(dòng)曲線。
2、家兔的血壓描記方法
沿氣管一例分離組織。則可露出頸總動(dòng)脈，將頸總動(dòng)脈和神經(jīng)分開，分離出約1．5厘米長(zhǎng)頸總動(dòng)脈。在其下方穿二根浸有生理鹽水的細(xì)線備用。動(dòng)脈插管內(nèi)與相應(yīng)換能器連接并充滿生理鹽水。近心端結(jié)一虛結(jié)，然后于兔耳靜脈注入肝素(1%lmL/kg)，抗凝，在近心端用動(dòng)脈夾夾住頸總動(dòng)脈，其與遠(yuǎn)心端結(jié)扎線相距為1.5cm，左手的拇指和食指提起遠(yuǎn)心端的結(jié)扎線，小指墊在頸總動(dòng)脈下，右手持眼科剪，在靠近遠(yuǎn)心結(jié)扎處剪頸總動(dòng)脈周徑1/3左右，將已充滿生理鹽水的動(dòng)脈插管由切口向心臟方向插入動(dòng)脈立即將近心端虛結(jié)扎緊，使套管緊緊固定在動(dòng)脈管腔內(nèi)，然后慢慢打開動(dòng)脈夾，可見描計(jì)曲線有明顯波動(dòng)。如血壓比較平穩(wěn)，可將套管安置于適宜位置，使動(dòng)脈不致扭曲或拉得過長(zhǎng)。將血壓曲線描記下來。
3、家兔頸外靜脈分離插管術(shù)
頸外靜脈分布很淺，在頸部皮下胸鎖乳突肌外緣。將一切開的皮膚，用手在皮膚外面向上損起，即可見到該52667788.cn/yaoshi/靜脈，壁薄而粗大呈暗紫色。暴露靜脈以后，沿血管走行方向用血管鉗輕輕分離周圍的結(jié)締組織，頸外靜脈分離出來以后，插管方法與頸總動(dòng)脈相似，也是向心插入，注意的是，插管前先用動(dòng)脈夾夾住頸稱脈近心端。待血管充盈后，再結(jié)扎遠(yuǎn)心端。這樣便于剪口和插管。
4、家兔股動(dòng)脈分離插管術(shù)
家兔背部固定，腹股溝部剪毛，在腹股溝部陰手指觸及動(dòng)脈搏動(dòng)明顯處行局麻，然后沿血管行走方向，做4厘米左右切口。用蚊式鉗分離皮下筋腹、肌肉組織后，血管和神經(jīng)即完全暴露，股靜脈位于內(nèi)刨，股神經(jīng)位于外側(cè)，股動(dòng)脈位于中間偏后，細(xì)心分出股動(dòng)脈，于其下方穿過兩根細(xì)線，將遠(yuǎn)心端結(jié)扎、近心端用動(dòng)脈夾夾住，將遠(yuǎn)心端結(jié)扎線輕輕提起，用眼科小剪刀，靠近結(jié)扎處剪股動(dòng)脈周徑1/3左右，向心方向插入充滿生理鹽水的動(dòng)脈插管，用線結(jié)扎將插管固定在動(dòng)脈管腔內(nèi)。
