中醫(yī)藥學概論-實踐指導 :驗證理論性實驗

第一部分  驗證理論性實驗

實驗1  坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本的制備

【實驗目的】

熟悉蟾蜍(或蛙) 的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本的制備方法，初步掌握幾項基本實驗操作。

【實驗原理】

蛙類的一些基本生命活動和生理功能與溫血動物相類似，而其組織在離體狀態(tài)下，易于控制和掌握，所以蛙類的神經(jīng)-肌肉標本常用以研究興奮性、興奮過程、刺激的一些規(guī)律和特性。

【實驗對象】

蟾蜍(或蛙)。

【實驗用品】

蛙類解剖器械一套，鋅銅弓，培養(yǎng)皿，燒杯，任氏液，棉花，線等。

圖1-1  蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本制備（一)

A：破壞腦、脊髓的方法   B、C：剪除軀干前段及內(nèi)臟  D：剝掉后肢皮膚

【實驗步驟】

1．破壞腦和脊髓  取蛙或蟾蜍一只，用蛙針從枕骨大孔垂直插入，向前伸入顱腔，搗毀腦髓；向后插入椎管，搗毀脊髓。如果蛙處于癱瘓狀態(tài)，表示腦和脊髓完全破壞。然后沿兩側腹部將蛙橫斷為上下兩半。并將前半段棄去，保留后半段備用（圖1-1)。

2．剝離皮膚  先剪去尾椎末端及泄殖腔附近的皮膚， 然后從脊柱的斷端撕下皮膚，將

其全部剝?nèi)�，直至趾端。除去�?nèi)臟，將標本放在滴有任氏液的蛙板上。將手及使用過的解剖

器械洗凈（圖1-1)。

3．分離標本為兩部分  沿脊柱正中線將標本勻稱地剪成左右兩半，一半浸入盛有任氏液的燒杯中備用，另一半作進一步剝制。

4．分離坐骨神經(jīng)  在大腿背側的半膜肌與股二頭肌之間用玻璃分針分離出坐骨神經(jīng)。注意：分離時要仔細用剪刀剪斷坐骨神經(jīng)的分支，向上分離至基部，向下分離到腘窩。保留與坐骨神經(jīng)相連的一小塊脊柱，將分離出來的坐骨神經(jīng)搭于腓腸肌上；去除膝關節(jié)周圍以上的全部大腿肌肉，刮凈股骨上附著的肌肉，保留的部分就是坐骨神經(jīng)及股骨。

  5．分離腓腸肌  在跟腱上扎一線，提起結線，剪斷結線后的跟腱，腓腸肌即可分離出來。此時在膝關節(jié)下方將其他所有組織全部剪去，至此，帶有股骨的坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本制備完成（圖1-2)。

6.標本的檢驗  將坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本放置在蛙玻璃板上，用鋅銅弓刺激坐骨神經(jīng)，若腓腸肌迅速發(fā)生收縮反應，說明標本機能良好，制備成功。應及時移放入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中，供實驗之用。

圖1-2  蟾蜍坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本制備（二)

   1.股三頭肌 2.股二頭肌 3.半膜肌   4.股骨   5.腓腸肌   6. 坐骨神經(jīng)

【注意事項】

1．剝制標本時，切忌用金屬器械牽拉或觸碰神經(jīng)干。

2. 分離肌肉時應按層次剪切。分離神經(jīng)時，必須將周圍的結締組織剝離干凈。

3．制備標本過程中，應隨時用任氏液浸濕神經(jīng)和肌肉，防止干燥。

4. 切勿讓蟾蜍的皮膚分泌物和血液等沾污神經(jīng)和肌肉，也不能用水沖洗，否則會影響神經(jīng)肌肉的功能。

【思考題】

1．剝?nèi)テつw的后肢，能用自來水沖洗嗎？為什么？

2．金屬器械碰壓、觸及或損傷神經(jīng)及腓腸肌，可能引起哪些不良后果？

3．如何保持標本的機能正常？

  （劉海云)

實驗2  反射弧的分析

【實驗目的】

1．利用脊髓蛙分析反射弧的組成。

2．探討反射弧的完整性與反射活動的關系。

【實驗原理】

在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的參與下，機體對內(nèi)外環(huán)境變化所作出的有規(guī)律的適應意義的反應稱反射；反射活動的結構基礎是反射弧，包括感受器、傳入神經(jīng)、神經(jīng)中樞、傳出神經(jīng)和效應器五部分。反射弧的任何一部分受到破壞、破損，反射活動將消失。

【實驗對象】

 蛙或蟾蜍。

【實驗用品】

蛙類手術器械，鐵支架，雙凹夾，金屬桿，肌夾，保護刺激電極，刺激器，棉球，紗布，絲線，培養(yǎng)皿，燒杯，0.5﹪硫酸溶液，小濾紙(約1cm×1cm)。

【實驗步驟】

制備脊蛙  

方法1  取蛙一只，用粗剪刀橫向伸向蛙口腔兩側口裂，剪去上方頭顱，保留下頜部分，以棉球壓迫創(chuàng)口止血，然后用肌夾夾住下頜，也可用絲線穿過蛙的下頜，懸掛在固定于鐵支架的金屬桿上，待蛙四肢松軟后，再進行實驗。

方法2  也可用探針由枕骨大孔刺入蛙顱腔搗毀腦組織，保留脊髓，以一小棉球塞入創(chuàng)口止血，然后用肌夾夾住下頜，也可用絲線穿過蛙的下頜，懸掛在固定于鐵支架的金屬桿上，待蛙四肢松軟后，再進行實驗。

【觀察項目】

1．提起穿在右側坐骨神經(jīng)下的細線，剪斷坐骨神經(jīng)，用連續(xù)閾上刺激，刺激右后肢趾，觀察有無反應。

2．分別以連續(xù)刺激，刺激右側坐骨神經(jīng)的中樞端和外周端，觀察該后肢的反應。

3．以探針搗毀蛙的脊髓后再重復上述步驟，觀察有何反應。

【注意事項】

1．制備脊蛙時，顱腦離斷的部位要適當，太高因保留部分腦組織而可能出現(xiàn)自主活動，太低又可能影響反射的產(chǎn)生。

2．用硫酸溶液或浸有硫酸的紙片處理蛙的皮膚后，應迅速用自來水清洗，以清除皮膚上殘存的硫酸，并用紗布擦干，以保護皮膚并防止沖淡硫酸溶液。

3．浸入硫酸溶液的部位應限于一個趾尖，每次浸泡范圍也應一致,切勿浸入太多。

【思考題】

    1．上述實驗結果，哪些反應屬于反射活動，哪些不屬于反射活動，為什么？

2．為什么電刺激坐骨神經(jīng)的中樞端，同側和對側后肢表現(xiàn)出不同的反應？

  （劉海云)

實驗3 骨骼肌的單收縮與強直收縮

【實驗目的】

1．了解骨骼肌收縮的總和現(xiàn)象。

2. 觀察不同頻率的閾上刺激引起肌肉收縮形式的改變。

【實驗原理】

收縮是肌肉興奮的外在表現(xiàn)。肌肉收縮有兩種形式，即等長收縮和等張收縮。給活的肌肉一個短暫的有效刺激，肌肉會發(fā)生一次等長或等張收縮，此稱為單收縮。單收縮的全過程可分為潛伏期、收縮期和舒張期。其具體時間和收縮幅度可因不同動物和肌肉以及肌肉當時的機能狀態(tài)的不同而有所不同。如蛙腓腸肌的單收縮共歷時約0.12s，其中潛伏期約0.01s，收縮期約0.05s，舒張期約0.06s。若給肌肉相繼兩個有效刺激，且使兩個刺激的間隔時間小于該肌肉單收縮的總時程，則引起肌肉的收縮可以總和起來，出現(xiàn)一連續(xù)的收縮，稱之為復合收縮。當給肌肉一串有效刺激時，可因刺激頻率不同，肌肉呈現(xiàn)不同的收縮形式。如果刺激頻率很低，即相繼兩個刺激的間隔時間大于單收縮的總時程，肌肉出現(xiàn)一連串的在收縮波形上彼此分開的單收縮。若逐漸增大刺激頻率，使后一個刺激總是落在前一個刺激引起的肌肉收縮的舒張期，肌肉則呈現(xiàn)鋸齒狀的收縮波形，稱之為不完全強直收縮。再增大刺激頻率使后一個刺激總是落在前一次肌肉收縮的收縮期，肌肉將處于完全的持續(xù)的收縮狀態(tài)，看不出舒張的痕跡，稱之為完全強直收縮。強直收縮的幅度大于單收縮的幅度，并且在一定范圍內(nèi)，當保持刺激的強度和作用時間不變時，肌肉的收縮幅度隨著刺激頻率的增大而增大。

【實驗對象】

蟾蜍或蛙。

【實驗用品】

任氏液，生物信號采集系統(tǒng)，計算機，蛙類手術器械，肌槽，張力換能器，鐵支架，雙凹夾，肌動器，鋅銅弓等。

【實驗步驟】

1．制備坐骨神經(jīng)-腓腸肌標本，方法同基礎性實驗1。

2．連接實驗儀器裝置

（1)固定標本  將肌動器固定于鐵支架上，張力換能器固定在肌動器的正上方，將坐骨神經(jīng)置于肌動器的刺激電極上，股骨斷端固定于肌動器的小孔內(nèi)，再將腓腸肌跟腱上的結扎線與張力換能器的應變片相連；調(diào)整張力換能器與肌動器的距離，保持連線的垂直和適宜的緊張度。

（2)儀器連接  張力換能器與計算機生物信號采集處理系統(tǒng)輸入通道相連；系統(tǒng)的刺激輸出與肌動器上的刺激電極相連。

3．定制實驗，記錄肌肉收縮曲線

（1)打開計算機，啟動生物信號采集處理系統(tǒng)，點擊菜單“實驗模塊”，按計算機提示逐步進入“骨骼肌收縮活動”的實驗項目。設置生物信號采集處理系統(tǒng)適當?shù)膶嶒瀰��?shù)。

（2)記錄肌肉收縮曲線，觀察肌肉收縮的強度與興奮性。

【觀察項目】

1．找出最大刺激強度  先給標本單個弱刺激，然后逐步增大刺激強度，直到剛能描記出收縮曲線時，此時的強度為閾強度。低于閾強度的刺激為閾下刺激。繼續(xù)增大刺激強度，可記錄到收縮曲線逐步升高的曲線圖，直到最后收縮曲線的幅度不再隨刺激強度的增加而增加，即為最大收縮，達到最大收縮反應的最小刺激強度，即為最大刺激強度。

2．單收縮  用閾上刺激作用于坐骨神經(jīng)，刺激頻率較低時，描記出連接的單收縮曲線。

3．不完全強直收縮  隨著刺激頻率的增加，描記出鋸齒狀的不完全強直收縮。

4．完全強直收縮  繼續(xù)逐次增加刺激頻率，描記出平滑的完全強直收縮曲線。

【注意事項】

1．剝皮后需將手及用過的器械洗凈再進行下一步操作。

2．用玻璃分針去除神經(jīng)周圍的結締組織，避免用力牽拉神經(jīng)或用金屬器械夾捏神經(jīng)，以防神經(jīng)受損。

3．標本制成后須放在任氏液中浸泡數(shù)分鐘，使標本興奮性穩(wěn)定。

4．每次連續(xù)刺激一般不超過3s～4s，每次刺激以后必須讓肌肉有一定的休息時間（0.5min～1min)，以防標本疲勞。

5．  用最大刺激強度刺激時，不能刺激過強而損傷神經(jīng)。

【思考題】

1．分析討論肌肉發(fā)生收縮總和的條件與機制。

2．分析討論不完全強直收縮和完全強直收縮的條件與機制。

  （劉海云)

實驗4  紅細胞比容的測定

【實驗目的】

學習測定紅細胞比容的方法。

【實驗原理】

將定量的抗凝血灌注于特制的毛細玻璃管中，定時、定速離心后,有形成分和血漿分離，上層呈淡黃色的液體是血漿，中間很薄一層為灰白色，即白細胞和血小板（或栓細胞)，下層為暗紅色的紅細胞，彼此壓緊而不改變細胞的正常形態(tài)。根據(jù)紅細胞柱及全血高度，可計算出紅細胞在全血中的容積比值，即為紅細胞比容（壓積)。

【實驗對象】

人。

【實驗用品】

草酸鹽抗凝劑(0.8g草酸鉀·H₂O1.2g草酸銨·H₂O 甲醛1ml 蒸餾水至100ml)或10 g·L^-1肝素，橡皮泥或半融化狀態(tài)石蠟，75﹪酒精，毛細玻璃管（內(nèi)徑1.8mm，長75mm)或溫氏分血管,酒精燈，水平式高速毛細管離心機(或普通離心機)，天平，注射器，長針頭，干棉球，刻度尺（精確到mm)。

【實驗步驟】

1．微量毛細管比容法

（1)以抗凝劑濕潤毛細管內(nèi)壁后吹出，讓壁內(nèi)自然風干或于60℃～80℃干燥箱內(nèi)干燥后待用。

（2)取血 常規(guī)消毒，穿刺指（或尾)尖，讓血自動流出，用棉球擦去第一滴血，待第二滴血流出后，將毛細管的一端水平接觸血滴，利用虹吸現(xiàn)象使血液進入毛細管的2/3（約50mm)處。

　 （3)離心  用酒精燈熔封或橡皮泥、石蠟封堵其未吸血端，然后封端向外放入專用的水平式毛細管離心機

2．溫氏分血管比容法

（1)取大試管和溫氏分血管各一支，用抗凝劑處理后烘干備用。

（2)取血  可采取靜脈取血或心臟取血，將血液沿大試管壁緩慢放入管內(nèi)，用涂有凡仕林的大拇指堵住試管口，緩慢顛倒試管2～3次，讓血液與抗凝劑充分混勻，制成抗凝血。

（3)用帶有長注針頭的注射器，取抗凝血2ml將其插入分血管的底部，緩慢放入，邊放邊抽出注射針頭，使血液精確到10cm刻度處。

（4)離心。

【觀察項目】

1．微量毛細管比容法  以12000r·min^-1的速度離心5min，屆時用刻度尺分別量出紅細胞柱和全血柱高度（單位mm)。計算其比值，即得出紅細胞比容。

2．溫氏分血管比容法  將分血管以3000r·min^-1離心30min，取出分血管，讀取紅細胞柱的高度，再以同樣的轉速離心5 min，再讀取紅細胞柱的高度，如果記錄相同，該讀數(shù)的1/10即為紅細胞比容。

【注意事項】

1．選擇抗凝劑必須考慮到不能使紅細胞變形、溶解。草酸鉀使紅細胞皺縮，而草酸銨使紅細胞膨脹，二者配合使用可互相緩解。魚類多用肝素抗凝。

2．血液與抗凝劑混合、注血時應避免動作劇烈引起紅細胞破裂。

3．用抗凝劑濕潤的毛細玻璃管（或溫氏分血管)內(nèi)壁后要充分干燥。血液進入毛細管內(nèi)的刻度讀數(shù)要精確，血柱中不得有氣體。

【思考題】

1．測定紅細胞比容有哪些實際意義？

2．吸血入毛細管時如何防止有氣泡？

  （劉海云)

實驗5  紅細胞沉降率的測定

【實驗目的】

學習測定紅細胞沉降率的方法。

【實驗原理】

血液加抗凝劑后，吸入一血沉降管內(nèi)，靜置一小時后，觀察紅細胞下沉的mm 數(shù)，稱為紅細胞沉降率（ESR)。它是以血漿層的高度來決定，血漿層越高，表示沉降率越快。紅細胞沉降率的正常標準，隨測定方法而異。如成年人血液的正常沉降率，韋氏法：男 0mm～15mm/h、女 0mm～20mm/h；潘氏法：男 5mm～10mm/h、女 6mm～12mm/h。紅細胞的沉降明顯分成三個時期：形成緡錢狀紅細胞簇，迅速下沉及最后聚集。緡錢狀是紅細胞疊連成串，紅細胞的形態(tài)未引起不正常。紅細胞的大小和數(shù)目影響聚集期。貧血癥患者的沉降率增加；紅細胞增多癥患者的沉降率減少；月經(jīng)及懷孕期的沉降率比正常高。

【實驗對象】

 家兔。

【實驗用品】

5ml注射器一個，8號針頭，酒精棉球，血沉降管，血沉降管架，小表面皿，5﹪檸檬酸鈉，定時鐘。

【實驗步驟】

1．血沉管的刻度由上至下為 0mm～100mm，內(nèi)徑1mm，容積約0.15ml�？潭取�0”處有“K”標志，50mm處有“P”標志。用前先以5﹪檸檬酸鈉沖洗一次。

2．吸5﹪檸檬酸鈉至刻度“P”處，吹入小表面皿中。

3．從家兔靜脈采血，擦去第一滴血，將血沉管兩次取血至刻度“K”處，迅速吹入有抗凝劑的小表面皿中，充分混合。

4．以血沉管吸取表面皿中混勻的抗凝血液至“K”處，擦凈管尖血液，直立并固定于血沉管架上。

5．一小時后觀察結果，記錄血沉管中血漿層的高度。

【觀察項目】

1．從定時鐘記時開始，觀察沉降管內(nèi)血漿層的高度。至沉降管靜置1小時為止，立即觀察此刻沉降管內(nèi)血漿層的高度，記下數(shù)值，此值即為ESR值，讀取ESR值時，若紅細胞上端成斜坡或成尖峰形時，應選取斜坡部分的中間水平為確定值。

2．填寫ESR測定報告表，內(nèi)容包括：姓名、性別、年齡、ESR值。

【注意事項】

1．本實驗應該在室溫條件（20℃～25℃)下進行，以排除溫度對實驗的影響。

2．若進行人體測試，必須堅持嚴格的注射器和針頭消毒制度的程序。

3．采用顛倒試管法混勻血液與抗凝劑一般為3～4次，并避免劇烈震蕩，以免破壞紅細胞，影響實驗結果。

4．向沉降管注血時，沉降管內(nèi)不能有氣體混入。

【思考題】

1．引起紅細胞沉降的原理是什么？

2．論述各種影響ESR的因素？

 （劉海云)

實驗6  紅細胞滲透脆性的測定

【實驗目的】

1．學習測定紅細胞滲透脆性的方法。

2．加深對細胞外液滲透張力在維持紅細胞正常形態(tài)與功能重要性方面的理解。

3．觀察不同因素對紅細胞滲透脆性的影響。

【實驗原理】

將紅細胞懸浮于等滲NaCl溶液中，其形態(tài)不變。若置于低滲NaCl溶液中則發(fā)生膨脹破裂，此現(xiàn)象稱為紅細胞滲透脆性。但紅細胞對低滲鹽溶液具有一定抵抗力，其大小可用NaCl溶液濃度的高低來表示。將血液滴入不同濃度的低滲NaCl溶液中，開始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象的NaCl溶液濃度為該血液紅細胞的最小抵抗力（正常為0.42﹪～0.46﹪NaCl溶液)。出現(xiàn)完全溶血現(xiàn)象時的NaCl溶液濃度為該紅細胞的最大抵抗力（正常為0.28﹪～0.32﹪NaCl溶液)。前者代表紅細胞的最大脆性（最小抵抗力)，后者代表紅細胞最小脆性（最大抵抗力)。生理學上將能使懸浮于其中的紅細胞保持正常形態(tài)的溶液稱為等張溶液，不能跨過細胞膜的微粒所形成的力，但等滲溶液并不一定是等張溶液（如1.9﹪的尿素溶液)。

【實驗對象】

家兔。

【實驗用品】

試管架，小試管10支，載玻片，蓋玻片，注射器，8號注射針頭，棉簽，1﹪NaCl溶液，蒸餾水。

【實驗步驟】

1．配制不同濃度的低滲NaCl溶液  取口徑相同的干潔小試管10支，分別編號排列在三個試管架上，按下表所示的配置方法和藥物劑量，分別向各試管內(nèi)加入1﹪NaCl溶液和蒸餾水，便配制好不同濃度的NaCl低滲鹽溶液，每管總量均為2ml。不同濃度低滲氯化鈉溶液的配制（表2-1)。

表1-1不同濃度低滲氯化鈉溶液的配制

2．采血并滴入試管  首先采用干燥的2ml注射器，從家兔的耳緣靜脈采血。然后，向每一個試管滴入1滴血液，并用各試管的低滲NaCl溶液與血液充分混合，在室溫下放置1小時。

【觀察項目】

1．觀察不同濃度低滲NaCl 混合液的顏色和透明度，以確定發(fā)生溶血時的NaCl溶液的濃度。

2．試管內(nèi)液體有明確的顏色分層現(xiàn)象，即上層為近于無色或極淡紅色，而下層為渾濁紅色，表明紅細胞沒有溶解。

3．若試管內(nèi)液體的上層出現(xiàn)透明紅色，而下層為混濁紅色，表明部分紅細胞破壞和溶解，為不完全溶血。注意觀察開始出現(xiàn)不完全溶血的NaCl溶液濃度，即可確定為紅細胞的最小滲透抵抗力，也即紅細胞的最大滲透脆性。

4．若試管內(nèi)液體完全變?yōu)橥该魃�，表明紅細胞完全破壞和溶解，即完全溶血。引起完全溶血的最低NaCl溶液濃度，即可確定紅細胞的最大滲透抵抗力，也即紅細胞的最小滲透脆性。

5．記錄紅細胞的參透脆性范圍，即開始出現(xiàn)不完全溶血的NaCl溶液濃度和完全溶血的最低NaCl溶液濃度。

【注意事項】

1．每支試管內(nèi)血液滴入量應準確無誤（只加一滴)。

2．確保每支試管NaCl溶液的濃度、容量準確。

3．小試管必須清潔、干燥。

4．觀察結果時應以白色為背景。

【思考題】

1．為什么紅細胞在等滲的尿素溶液中迅速發(fā)生溶血？

2．測定紅細胞滲透脆性有何臨床意義？

3．同一個體的不同紅細胞的滲透脆性不一樣，為什么？

  （劉海云  朱大誠)

實驗7  影響血液凝固的因素

【實驗目的】

以血液凝固時間作為指標，熟悉血液凝的固影響因素，加深對生理止血過程的理解。

【實驗原理】

血液凝固是一個酶的有限水解激活過程，在此過程中有多種凝血因子參與。根據(jù)凝血過程起動時激活因子來源不同，可將血液凝固分為內(nèi)源性激活途徑和外源性激活途徑。內(nèi)源性激活途徑是指參與血液凝固的所有凝血因子在血漿中，外源性激活途徑是指受損的組織中的組織因子進入血管后，與血管內(nèi)的凝血因子共同作用而啟動的激活過程。

【實驗對象】

家兔。

【實驗用品】

20﹪氨基甲酸乙酯溶液，肝素（8U/ml)，2﹪草酸鉀溶液，生理鹽水，液狀石蠟，肺組織液（取大鼠肺剪碎，洗凈血液，浸泡于3～4倍量的生理鹽水中，過濾收集的濾液即成肺組織液，存冰箱中備用)，免手術臺，常規(guī)手術器械，動脈夾，動脈插管(或細塑料導管)，注射器，試管8支，小燒杯2個，試管架,竹簽1束(或細試管刷),秒表。

【實驗步驟】

1．麻醉和固定  耳緣靜脈注射氨基甲酸乙酯溶液，按5ml/kg的量，將兔麻醉，仰臥固定于兔手臺上。

2．頸部手術  正中切開頸部，分離左側頸總動脈，遠心端用線結扎阻斷血流，近心端夾上動脈夾。在靠近左總動脈遠心端斜向近心端剪一小切口，插入動脈插管(或細塑料導管)，結扎導管以備取血。

【觀察項目】

1．取兔動脈血10ml，注入兩個小燒杯內(nèi)，一杯靜置，另一杯用帶有橡皮刷的玻棒或竹簽（也可用小號試管刷)輕輕攪拌，數(shù)分鐘后，玻棒或竹簽上結成紅色血團。用水沖洗，觀察纖維蛋白形狀。然后比較兩www.med126.com杯的凝血情況。

2．打開動脈夾，準備好的每支試管中滴入兔血2ml，即刻開始計時，每隔15 s 傾斜一次，觀察血液是否凝固，至血液成為凝膠狀不再流動為止，記錄所經(jīng)歷的時間。6、7、8號試管加入血液后，用拇指蓋住試管口將試管顛倒兩次，使血液與藥物混合。觀察血液是否發(fā)生凝固及發(fā)生凝固的時間，把結果紀錄于表2-2中。

表1-2  不同因素對血液凝固的影響

3．如果加肝素和草酸鉀的試管不出現(xiàn)血凝,可再向兩管內(nèi)分別加入0.025 mol•L^-1的CaCl₂溶液2～3滴,觀察血液是否發(fā)生凝固?

【注意事項】

1．采血的過程盡量要快，以減少計時的誤差。對比實驗的采血時間要緊接著進行。

2．判斷凝血的標準要力求一致。一般以傾斜試管達45度時，試管內(nèi)血液不見流動為準。

3．每支試管口徑大小及采血量要相對一致，不可相差太大。

【思考題】

1．肝素和草酸鉀皆能抗凝，其機理一樣嗎？為什么？

  2．如何加速或延緩血液凝固？試闡明機理。

3．分析上述各因素影響凝固時間的機制。

4．正常人體內(nèi)血液為什么不發(fā)生凝固？

5．如何認識纖維蛋白原在凝血過程中的作用？

（劉海云  朱大誠)

實驗8  出血時間及凝血時間的測定

【實驗目的】

學習測定出血、凝血時間的方法。

【實驗原理】

出血時間是指從出血時起至血液在創(chuàng)口停止流出時止所需的時間，用以檢查凝血過程是否正常。凝血時間是指從血液流出體外時起至凝固時止所需的時間，用以檢查血凝過程的快慢。

【實驗對象】

家兔。

【實驗用品】

消毒采血針，秒表，小濾紙條，酒精棉球，碘酒，毛細玻璃管（長約10cm，內(nèi)徑0.8mm～1.2mm)。

【實驗步驟】

　  1．出血時的測定用酒精棉球將耳垂皮膚消毒，再用無菌干棉球擦干。用采血針刺入皮膚約2mm～3mm 深，讓血流自然流出，勿用手擠壓。

　  2．凝血時的測定  毛細管法穿刺耳垂，讓血自然流出。

【觀察項目】

1．出血時的測定  從穿刺后開始每隔半分鐘用濾紙吸去血滴一次（不要觸及皮膚)，直到血流停止，計數(shù)血滴可知出血時間。通常第一滴血血跡直徑應在 1cm～2cm。此法正常值為1min～3min。

2．凝血時的測定  擦去第一滴血。 用毛細玻璃管吸取第二滴血，直至充滿管腔為止，立即記錄時間。每隔半分鐘折斷毛細玻璃管一小段，約5mm～10mm，直至兩段玻管之間有血絲連接時，表示血液已經(jīng)凝固，此段時間即為凝血時間。正常值為2min～7min。

【注意事項】

1．測定時，最好將毛細管兩端用膠泥封閉，置于37℃水中，以保持溫度恒定。

2．針刺前務必對穿刺局部作好消毒，不可草率。

【思考題】

1．血液從傷口流出，為什么會凝固？

2．測定止血與凝血時間有何實際意義？

 （劉海云)

實驗9  ABO血型鑒定

【實驗目的】

1．學習辨別血型的方法。

2．觀察紅細胞凝集現(xiàn)象，掌握 ABO 血型鑒定的原理。

【實驗原理】

血型是指紅細胞的血型，是根據(jù)紅細胞膜外表面存在的特異性抗原（鑲嵌于紅細胞膜上的糖蛋白和糖脂)來確定的，這種抗原或凝集原是由遺傳決定的�？贵w或凝集素存在于血清中，它與紅細胞的不同抗原起反應，產(chǎn)生凝集，最后溶解。故臨床上在輸血前必須注意鑒定血型，以確保安全輸血。通常輸血反應中大多數(shù)注意 ABO 血型系統(tǒng)。

【實驗對象】

正常人。

【實驗用品】

顯微鏡，載玻片，刺血針，消毒牙簽，A 型和 B 型標準血清，生理鹽水，酒精棉球。

【實驗步驟】

1．取一塊清潔玻片，用蠟筆劃上記號，左上角寫 A 字，右上角寫 B 字。

2．用小滴管吸 A 型標準血清（抗 B)一滴加入左側，用另一小滴管吸 B 型標準血清（抗 A)一滴加入右側。

3．穿刺手指取血，玻片的每側各放入一小滴血，用牙簽攪拌，使每側抗血清和血液混和。每邊用一支牙簽，切勿混用。

 圖1-3  玻片法鑒定ABO血型

【觀察項目】

載玻片靜置室溫下10min～15min 后，觀察有無凝集現(xiàn)象，假如只是A 側發(fā)生凝集，則血型為 B 型；若只是B 側凝集，則為 A 型；若兩邊均凝集，則為AB 型；若兩邊均未發(fā)生凝集，則為 O 型。這種凝集反應的強度因人而異，所以有時需借助顯微鏡才能確定是否出現(xiàn)凝集，血型判斷（圖1-3)。

【注意事項】

1．消毒棉球，采血針應進行高壓滅菌消毒。

2．對受試者的采血處消毒要嚴格認真，采血動作要輕巧。

3．采血針刺后的第1、2滴血，要用消毒棉球檫去，棄之不用，要采用隨后流出之血液。

【思考題】

1．根據(jù)自己的血型，說明你能接受和輸血給何種血型的人，為什么？

2．如何區(qū)別血液的凝集與凝固，其機理是否一樣？

3．輸血前為什么要做交叉配血試驗？

  （劉海云 朱大誠)

實驗10  人體心音聽診

【實驗目的】

學習心音聽診的方法，識別第一心音與第二心音。

【實驗原理】

心音是由心臟瓣膜關閉和心肌收縮引起的振動所產(chǎn)生的聲音。用聽診器在胸壁前聽診，在每一心動周期內(nèi)可以聽到兩個心音。第一心音：音調(diào)較低（音頻為25～40次/s)而歷時較長（0.12s)，聲音較響，是由房室瓣關閉和心室肌收縮振動所產(chǎn)生的。由于房室瓣的關閉與心室收縮開始幾乎同時發(fā)生，因此第一心音是心室收縮的標志，其響度和性質變化，常可反映心室肌收縮強、弱和房室瓣膜的機能狀態(tài)。第二心音：音調(diào)較高（音頻為50次/s)而歷時較短（0.08s)，較清脆，主要是由半月瓣關閉產(chǎn)生振動造成的。由于半月瓣關閉與心室舒張開始幾乎同時發(fā)生。因此第二心音是心室舒張的標志，其響度�？煞从硠用}壓的高低。

【實驗對象】

人。

【實驗用品】

聽診器或心音放大器。

【實驗步驟】

1．受試者安靜端坐，胸部裸露。

2．檢查者帶好聽診器，注意聽診器的耳件應與外耳道開口方向一致（向前)。

以右手的食指、拇指和中指輕持聽診器胸端緊貼于受試者胸部皮膚上，聽診順序依次由左房室瓣聽診區(qū)（左側第5肋間與鎖骨中線交點稍內(nèi)側)→主動脈瓣聽診區(qū)（胸骨右緣第2肋間)→肺動脈瓣聽診區(qū)（胸骨左緣第2肋間)→右房室瓣聽診區(qū)（胸骨右緣第4肋間或胸骨劍突下)（圖1-4)。

【觀察項目】

仔細聽取心音，注意區(qū)分兩心音。如難以區(qū)分兩個心音，可同時用手指觸診心尖搏動或頸動脈脈搏，此時出現(xiàn)的心音即為第一心音。然后再從心音音調(diào)高低、歷時長短認真鑒別兩心音的不同，直至準確辨別為止。

   圖1-4 心臟瓣膜聽診部位示意圖

【注意事項】

1．實驗室內(nèi)必須保持安靜，以利聽診。

2．聽診器耳件應與外耳道方向一致。橡皮管不得交叉、扭結，管切勿與它物摩擦，以免發(fā)生摩擦音影響聽診。

3．如呼吸音影響聽診，可令受試者暫停呼吸片刻。

【思考題】

1．第一心音和第二心音是怎樣形成的？它們有何臨床意義？

2．試比較第一心音和第二心音有何不同？

 （崔艷茹)

實驗11  人體動脈血壓的測定

【實驗目的】

1．掌握正確的人體動脈血壓測量方法。

2．了解動脈血壓間接測量法的原理。

【實驗原理】

1．動脈血壓基本原理

血壓（blood pressure)是指血管內(nèi)血液對單位血管面積的側壓力或側壓強。生理學所說的正常血壓是指主動脈血壓。血壓形成首先需要心血管系統(tǒng)內(nèi)有血液適當充盈，在此基礎上，心臟射血和外周阻力是形成動脈血壓的基本因素。一個心動周期中，動脈血壓所達到的最高值，稱收縮壓(systolic pressure)；所降至的最低值，稱舒張壓(diastolicpressure)。正常情況下，收縮壓小于或等于140mmHg，舒張壓小于或等于90mmHg。我國健康青年人安靜狀態(tài)下收縮壓通常為100mmHg～120mmHg，舒張壓為60mmHg～80mmHg。

2．間接測量血壓的原理

動脈血壓（簡稱血壓)是指動脈內(nèi)的血液對血管壁的側壓強。測量血壓的方法可以分為直接法和間接法。間接法最常用的是聽診法（auscultatory method)，利用充氣袖帶自肢體外加壓以壓閉深部動脈，然后逐漸放氣減壓，并根據(jù)袖帶下緣動脈中血管音（Korotkoff sounds柯氏音)的產(chǎn)生和變化來判斷血管外壓力與血管內(nèi)收縮壓、舒張壓之間的平衡情況，從而間接測定血壓。

【實驗對象】

人。

【實驗用品】

血壓計和聽診器。

【實驗步驟】

1. 熟悉血壓計的結構和使用方法。

2．受試者取坐位，手臂裸露，平放伸置桌上，手心向上，靜坐5分鐘以上(圖1-5)。

3．袖帶下緣距肘窩上方2cm～3cm，松緊適宜。

4．檢查者戴好聽診器，方法同綜合性實驗15，將聽診器的胸件置于肘窩內(nèi)側肱動脈搏動處。

5．給袖帶加壓，待肱動脈搏動消失，再將汞柱升高20mmHg～30mmHg。

【觀察項目】

1．開始緩慢放氣，以2mmHg～4mmHg/秒的速度減壓，仔細聽診，當聽到第一個搏動聲音時血壓計上的數(shù)值為收縮壓。

2．繼續(xù)放氣減壓，聲音則發(fā)生一系列的變化，先由低而高，而后又由高變低，最后聲音完全消失。在聲音突然變低的那一刻，血壓計上所指的刻度值即為舒張壓（圖1-6)。

【注意事項】

1. 室內(nèi)必須安靜。

2. 繞袖帶部位與心臟在同一水平，以避免重力影響。

3. 袖帶松緊適度，以剛好能插入兩個手指為宜，過緊時可能人為加壓，過松則橡皮袋充氣后，其實際加壓幅度顯著減少，由于橡皮袋的伸展而有壓力損失，測定值因而可顯著偏高。

4. 充氣壓迫時間不宜過長，否則可引起全身血管反射性收縮而使血壓升高。

5. 聽診器胸件不能過強地壓住肱動脈，以免因此而發(fā)生的動脈音導致判斷錯誤。

6. 一般應測2次～3次，以兩次比較接近的數(shù)值為準，取其平均數(shù)，或收縮壓取上值，舒張壓取下值。

7. 左右肱動脈有5mmHg～10mmHg壓力差，測血壓應固定一側，不要隨意改變。

8. 在減壓過程中有時可能出現(xiàn)血管音暫時消失，隨后又重新出現(xiàn)，稱無音間隙。可在袖帶充氣前，舉起上臂，促進靜脈回流后再進行充氣、放氣操作，此時無音間隙就不再出現(xiàn)。

圖1-5 血壓測量姿勢示意圖    圖1-6血壓計測量人體動脈血壓方法示意圖

【思考題】

1. 柯氏音的變化規(guī)律？

2. 引起動脈血壓測量誤差的常見原因有哪些？

3. 特殊情況下如休克時的血壓測量？

   （崔艷茹)

實驗12  人體心電圖的描記

【實驗目的】

1．學習心電圖機的使用方法和心電圖波形的測量方法。

2．了解人體正常心電圖各波的波形及其生理意義。

【實驗原理】

心臟機械收縮之前，先產(chǎn)生電激動，心房和心室的電激動可經(jīng)人體組織傳到體表。心電圖是利用心電圖機從體表記錄心臟每一心動周期所產(chǎn)生電活動變化曲線圖形。

心臟的特殊傳導系統(tǒng)由竇房結、結間束（分為前、中、后結間束)、房間束（起自結間束，稱Bachmann束)、房室交界區(qū)（房室結、希氏束)、束支（分為左、右束支，左束支又分為前分支和后分支)以及浦肯野氏纖維（Pukinje fiber)構成。心臟傳導系統(tǒng)與每一心動周期順序出現(xiàn)的心電變化密切相關。正常心電活動始于竇房結，興奮心房的同時經(jīng)結間束傳導至房室結，然后循希氏束-左、右束支-浦肯野氏纖維順序傳導，最后興奮心室。這種先后有序的電激動的傳播，引起一系列電位改變，形成了心電圖上相應的波段。心電圖在臨床應用很廣,它對心率失常、心肌梗死、房室肥大及心肌損傷等方面有重要的臨床意義。

【實驗對象】

人。

【實驗用品】

心電圖機，診斷床，導電糊，酒精棉球。

【實驗步驟】

1．受試者安靜平臥，全身肌肉松弛。

2．接好心電圖機的電源線、地線和導聯(lián)線。接通電源，預熱5min。

3．安放電極把準備安放電極的部位先用酒精棉球脫脂，再涂上導電糊，以減小皮膚電阻。電極應安放在肌肉較少的部位，一般兩臂應在腕關節(jié)上方（屈側)約3cm處，兩腿應在小腿下段內(nèi)踝上方約3cm處。然后用綁帶將電極扎上，務使電極與皮膚接觸嚴緊，以防干擾與基線飄移。

4．連接導聯(lián)線按所用心電圖機之規(guī)定，正確連接導聯(lián)線。V1在胸骨右緣第4肋間，V2在胸骨左緣第4肋間，V4在左鎖骨中線第5肋間，V3在V2和V4之間，V5在左腋前線第5肋間（圖1-7)。四肢連接方法為：上肢分別為左黃和右紅；下肢分別為左綠和右黑。

圖1-7 胸導聯(lián)電極按放示意圖  圖1-8正常心電圖的波形

5．調(diào)節(jié)基線旋動基線調(diào)節(jié)鈕，使基線位于適當位置。

6．輸入標準電壓打開輸入開關，使熱筆預熱10min后，重復按動1mV定標電壓按鈕，再調(diào)節(jié)靈敏度（或增益)旋鈕，標準方波上升邊為10mm。開動記錄開關，記下標準電壓曲線。記錄I、II、III、aVR、aVL、aVF（圖1-9、10)、V1、V2、V3、V4、V5導聯(lián)的心電圖。取下心電圖紙，進行分析。典型正常心電圖的波形如圖1-8所示。

【觀察項目】

1．波幅和時間的測量

（1)波幅  當1mV的標準電壓使基線上移10mm時，縱坐標每一小格（1mm)代表0.1mV。測量波幅時，凡向上的波形，其波幅自基線的上緣測量至波峰的頂點，凡向下的波形，其波幅自基線的下緣測量至波峰的底點。

（2)時間  心電圖紙的走速由心電圖機固定的馬達所控制，一般分為25mm/s和50mm/s兩檔，常用的是25mm/s。這時心電圖紙上橫坐標的每小格（1mm)代表0.04s。

2．波形的辨認和分析

（1)心電圖各波形的分析  在心電圖記錄紙辨認出各導聯(lián)的p波、QRS綜合波和T波，并根據(jù)各波的起點確定P-R間期和Q-T間期。

（2)心率的測定  首先測量相鄰兩個心動周期P波（或相鄰兩個R波)的間隔時間T。T代表心動周期的長短，可取6個心動周期的平均值來計算心率。

  心率=60/T（次/min)

（3)心電圖各波段的分析測量  選擇一段I導聯(lián)基線平穩(wěn)的心電圖，測量p波、QRS綜合波和T波的時程、電壓、以及P-R間期和Q-T間期的時程。

  圖1-9 標準導聯(lián)示意圖

圖1-10 加壓肢體導聯(lián)示意圖

【注意事項】

記錄時如果出現(xiàn)干擾，應檢查地線是否接好，導聯(lián)電極是否松動，被檢查者肌肉是否放松。

【思考題】

1．說明心電圖各波的生理意義。如果P-R間期延長而超過正常值，說明什么問題？

2．為何不同導聯(lián)所記錄的心電圖在波形上有很大的區(qū)別？

3．P-R間期與Q-T間期的正常值與心率有什么關系？

  （崔艷茹)

實驗13  腸系膜微循環(huán)的觀察

【實驗目的】

觀察蟾蜍腸系膜微循環(huán)中各類血管的血液流動情況。

【實驗原理】

微循環(huán)區(qū)域是血液與組織液直接進行物質交換的場所，在組織較薄的部位(如蟾蜍腸系膜)，易于透光，可以借助顯微鏡來觀察微循環(huán)中小動脈、毛細血管和小靜脈的血流情況。

【實驗對象】

蟾蜍或蛙。

【實驗用品】

蛙類手術器械，顯微鏡，玻璃板或載玻片，塑料杯或玻璃杯（直徑7 mm～8mm、高3 mm～4mm邊緣光滑)或蛙循環(huán)板（帶孔的薄木板，孔直徑2.5cm～3.0cm)，2ml注射器，滴管，大頭針，任氏液。

【實驗步驟】

1．破壞腦和脊髓  方法見基礎性實驗13。

2．將已破壞腦和脊髓的蟾蜍背位置于蛙循環(huán)板上，使腹部靠近循環(huán)板孔，再將載玻片的一端靠腹部并蓋在循環(huán)板上，用手術鑷提起靠近循環(huán)板的腹部皮膚，右手用手術剪在蟾蜍右側腹壁剪一長約1.5cm的縱向開口，輕輕拉出小腸袢，用兩個大頭針輕輕固定需要觀察的小腸段兩端并暴露在顯微鏡下可觀察腸系膜的血液循環(huán)（圖1-11，圖1-12)。

圖1-11暴露小腸袢  圖1-12顯微鏡下可觀察腸系膜的血液循環(huán)

【觀察項目】

在低倍顯微鏡下，分辨小動脈、小靜脈和毛細血管，觀察其中血流速度、特征以及血細胞在血管內(nèi)流動的情況（表1-3)。

表1-3 低倍鏡下動脈、靜脈、小動脈、小靜脈及毛細血管的區(qū)別

【注意事項】

1．提夾腹壁肌時只能夾肌層，不能牽連內(nèi)臟器官。

2．手術操作要仔細，避免出血造成的視野模糊。

3．試驗中，應滴加適量的任氏液，以免標本干燥。

【思考題】

1．為什么不同血管中血液流動狀態(tài)不同？

2．動脈血流為什么有軸流和壁流？

  （崔艷茹)

實驗14  胸膜腔內(nèi)壓的觀察

【實驗目的】

1．學習測定胸膜腔內(nèi)壓力的方法。

2．觀察呼吸運動過程中胸膜腔內(nèi)負壓的變化及其影響因素。

【實驗原理】

正常呼吸時，胸膜腔內(nèi)壓低于外界的大氣壓，故稱為胸內(nèi)負壓，胸內(nèi)負壓形成的主要條件有胸膜腔的密閉性和肺的回縮力。在呼吸過程中，由于胸廓的擴大和縮小引起肺擴張和回縮，肺的回縮力隨肺的擴張而增大，隨肺的回縮而減小，這樣，表現(xiàn)為吸氣時胸內(nèi)負壓增大，呼氣時則相反。而當人工氣胸時，胸膜腔的密閉性受到破壞，胸膜腔內(nèi)的負壓消失，肺的擴張也受到影響。

【實驗對象】

家兔。

【實驗用品】

生物醫(yī)學實驗處理系統(tǒng)，壓力換能器，哺乳動物手術器械一套，兔手術臺，氣管插管，20ml注射器，50cm長的橡膠管1根，20﹪氨基甲酸乙酯，生理鹽水，紗布和線，胸腔內(nèi)插管，水檢壓器。

【實驗步驟】

1．動物手術

（1)麻醉與固定  用20﹪氨基甲酸乙酯進行麻醉，劑量為1g/kg體重。經(jīng)兔耳緣靜脈緩慢注入，待兔麻醉后，仰臥位固定于兔手術臺上。

（2)頸部手術  作頸正中切口，氣管插管。

（3)胸部手術  將兔右側胸部(相當于右腋前線第4、5肋間區(qū)域)的皮毛剪去，然后將胸內(nèi)插管針頭于右腋前線上的第4、5肋間處、沿第5肋骨上緣穿過胸壁，插入胸膜腔，當看到水檢壓器水柱隨呼吸運動而上下移動時，說明插管針頭已進入胸膜腔，應停止進針，并固定針頭的位置（圖1-13)。

圖1-13 胸膜腔內(nèi)壓的直接測量

2．實驗裝置與連接

（1)胸腔內(nèi)插管的導管通過一“Y”管分別與水檢壓計和一壓力換能器相連，壓力換能器的輸入連線連至生物醫(yī)學實驗系統(tǒng)的CH1，注意水檢壓計的零點應與胸壁插入點位于同一水平線上。

（2)啟動計算機，進入生物醫(yī)學實驗處理系統(tǒng)主界面，從實驗模塊中找出呼吸運動項目，調(diào)節(jié)適當?shù)撵`敏度和掃描速度。

（3)實驗中注意一方面觀察計算機顯示的曲線變化，另一方面觀察從水檢壓計上讀取的數(shù)據(jù)并做好記錄。

【觀察項目】

1．觀察實驗條件下平靜吸氣和平靜呼氣時，胸內(nèi)負壓的數(shù)值。

2．用力或加強呼吸時胸內(nèi)負壓的變化：將50cm 長的橡膠管套上氣管插管的側管上，以增大呼吸的無效腔，使動物出現(xiàn)用力呼吸，觀察此時吸氣和呼氣時，胸內(nèi)負壓的數(shù)值。

3．憋氣時胸內(nèi)壓的變化：分別在呼氣末、吸氣末及手堵住氣管插管的側管開口，使兔不能吸入或呼出氣體而造成憋氣，觀察此時胸內(nèi)負壓的變化。

【注意事項】

1．胸膜腔穿刺時，不宜用力過猛，以免造成肺組織損傷出血。

2．進行憋氣實驗時，應注意憋氣時間不宜過長，以防動物死亡。

【思考題】

1．平靜呼吸時胸膜腔內(nèi)壓為什么始終低于大氣壓？

2．憋氣時，胸膜腔內(nèi)壓有何變化？是否可以高于大氣壓？為什么？

   （崔艷茹  朱大誠)

實驗15  人體體溫測量

【實驗目的】

掌握人體體溫的測定方法。

【實驗原理】

體溫是指機體內(nèi)部的溫度, 有深部溫度及表層溫度之分, 是反映人體健康狀況的重要指標之一, 其準確性直接影響到疾病的診斷、治療和護理。由于深部溫度不易測試, 臨床上常用腋窩、口腔、直腸等處溫度來代表機體體溫。

【實驗對象】

人。

【實驗用品】

水銀體溫計，75﹪酒精，紅外熱像儀。

【實驗步驟】

1．接觸式測溫法（水銀體溫計)

（1)測體溫時，要先把體溫計上的水銀柱甩到35°以下，用酒精棉球擦拭消毒后再用。

（2)測腋下溫度時，要先擦去腋窩的汗，再把體溫計有水銀的一頭放入腋部中央夾緊，10min后取出。

（3)測直腸的溫度時，用肛門體溫計。測溫時，要將其慢慢地插入肛門3cm～4cm。測量時間3min～5min。使用后要用肥皂水洗凈。但腹瀉、便秘的病人不要應用此法。

（4)在口中測體溫比腋下更準確。首先要把體溫計洗凈，水銀部分用冷水蘸蘸再放入口中。要把體溫計斜放在舌系帶旁，測體溫時輕輕地閉住嘴，不要說話。

2．非接觸式測溫法（紅外熱像儀)

測量時需保證檢測距離3m～5m, 被檢者正面對準鏡頭1s即可。

【觀察項目】

1．記錄腋下體溫值。

2．記錄口腔體溫值。

3．記錄直腸體溫值。

【注意事項】

1．看體溫計數(shù)字時，應橫持體溫計緩慢轉動，取水平線位置觀察水銀拄所示溫度刻度。

2．若是午后發(fā)燒的話，夜里一定要再測一次，第二天早晨起床也一定要再測一次。

3．測量的體溫要記錄下來，提供給醫(yī)生，以便得到正確的診斷和治療。

4．體溫計用完之后，最好用75﹪的酒精消毒。傳染病病人用過的體溫計，更應消毒。

【思考題】

1．三種體溫測量各有何優(yōu)缺點？

2．哪種測量方法能更準確反映體溫？

 （崔艷茹)

實驗16 視敏度的測定

【實驗目的】

學習使用視力表測定視敏度的方法。

【實驗原理】

視敏度又稱視力，是指眼分辨物體細微結構的能力，以能分辨空間二點的最小距離為衡量標準。對人來說，是用來檢查視網(wǎng)膜中央凹精細視覺的分辨能力。臨床規(guī)定，當能分辨二點間的最小視角為一分角時（指這二點與相距5m遠的眼所形成的視角)，視力為1.0，這二點間的距離約為1.5mm，相當于視力表第10行字的每一筆劃所間隔的距離。因此，在距視力表5m處能分辨第10行字，為正常視力，若采用對數(shù)視力表（5分記錄)記錄該視力（1分角)應記為5.0,其計算公式為:受試者視力=5-logα’(視角)（圖1-14)。由于中央凹處的視錐細胞較密集，直徑較小，所以，視力可大于此數(shù)值。

圖1-14  視力表原理圖

【實驗對象】

    人。

【實驗用品】

    遠視力表及近視力表［使用標準對數(shù)視力表（也稱對數(shù)視力表)或國際標準視力表（也稱小數(shù)視力表)］，遮眼板，指點字用小木棍一根（一端稍細，并帶紅色或黑色)，竹簽。

【實驗步驟】

1．遠視力檢查

（1)將視力表掛在光線充足而均勻的地方，讓受試者在距離5m遠處測試。視力表上第10行字應與受試者眼同高。

（2)受試者用遮眼板遮住一眼，另一眼看視力表，按實驗者的指點從上而下進行識別，直到能辨認最小的字行為止，以確定該眼視力。同法確定另一眼視力。

（3)若受試者對最上一行字也不能辨認，則須令受試者向前移動，直至能辨認最上一行字為止，并按上述公式推算視力。

2．近視力檢查

這項檢查應使用國際標準近視力表進行。

檢查方法：

被檢者坐在桌前，手持近視力表，在光線充足又無直射陽光處被檢，視力表與眼保持30cm距離。檢查順序為先右眼后左眼，檢查一眼時，另一眼用遮眼板遮住、檢查者用竹簽指點，在E字形近視力表上能認清1.0以上者為近視力正常，只能認清0.9或以下者為不正常。如不能辨認，也可將視力表放遠或移近，直至被檢者能認清表上1.0以上的視標為止，但應注明距離，如在20cm處才能認清1.0的視標，則記錄為1.0/20cm。其他具體要求與遠視力檢查相同。

【觀察項目】

1．近視力。

2．遠視力。

【注意事項】

1．利用自然光檢查時，應在光線充足的室內(nèi)，視力表上的第10行字與受試者眼睛應在同一高度。

2．受試者與視力表的距離應準確。

3．用遮眼板時，勿壓眼球，以防影響測試。

【思考題】

1．近視眼形成的原因是什么？

2．測定視力有何生理及臨床意義？

（崔艷茹)

實驗17  視野測定

【實驗目的】

學習視野計的使用方法和視野的檢查方法。

【實驗原理】

視野是單眼固定注視正前方時所能看到的空間范圍。借助此種視野檢查可以了解整個視網(wǎng)膜的感光功能，并有助于判斷視覺傳導通路及視覺中樞的機能。正常人的視野范圍在鼻側和額側的較窄，在顳側和下側的較寬。在相同的亮度下，白光的亮度最大，紅光次之，綠光最小。不同顏色視野的大小，不僅與面部結構有關，更主要的是取決于不同感光細胞在視網(wǎng)膜上的分布情況。

【實驗對象】

    人。

【實驗用品】

視野計，各色(白、紅、黃或藍、綠)視標，視野圖紙，鉛筆。

【實驗步驟】

1．觀察視野計的結構和熟悉使用方法。視野計的樣式頗多，最常用的是弧形視野計（圖1-15)。它是一個安在支架上的半圓弧形金屬板，可繞水平軸旋轉360°。圓弧上有刻度，表示由該點射向視網(wǎng)膜周邊的光線與視軸之間的夾角，視野界限即以此角度表示。在圓弧內(nèi)面中央裝一個固定的小圓鏡，其對面的支架上附有可上下移動的托頜架。

2．將視野計對著充足的光線放好(對于某些具有光源視標的視野計，則按照儀器說明書的要求，將視野計放在暗室內(nèi))，令受試者把下頜放在托架上，使受試眼眼眶下緣靠在眼眶托上。先將弧架擺在水平位置，調(diào)整托頜架的高度，使眼恰與弧架的中心點位于同一水平面上。遮住另一眼，令受試眼注視弧架的中心點。檢測者從周邊向中央慢慢移動弧架上插有白色紙片的視標架，隨時詢問受試者是否看到視標。當受試者回答看到時，就將視標回移一些，然后再向前移，復試一次。待得出一致結果后，就將受試者剛能看得到視標時，視標所在的點劃在視野圖紙的相應經(jīng)緯度上。如果視野計的后方附有隨著視標移動的針尖，針尖能準確地放視野圖紙的盤向前推，就能在視野圖紙的相應經(jīng)緯度上扎出一個記號。

3．將弧架轉動45°，重復上述操作步驟。如此繼續(xù)，8個方向，在視野圖紙上得出8個點。將此8個點依次連接起來，就得出白色視野的范圍（圖1-16)。

4．按照相同的操作方法，測定紅、黃或藍、綠色視野。對有光源視標的用具要在暗室測視野者，當用有色光標時，需注意光亮視野(此時尚不能認清顏色)和色覺視野是否一致。

5．依同樣的方法，測定另一眼的視野。

【觀察項目】

    1．根據(jù)上述檢測方法，在視野圖紙上標記每種顏色的8個點。

    2．連接每種顏色的8個點，則得到該種顏色的視野圖（雙眼紅、黃或藍、綠色各色視覺的視野)。

圖1-15  視野計  圖1-16 正常視野圖（左眼)

【注意事項】

1．視野計要對著光線放好，受試者背光而坐。

2．在實驗過程中受試者略休息，避免因眼睛疲勞而影響實驗結果。

3．測試過程中受試者被測的一側眼睛一定要固定注視弧架上的中心點，眼球不得轉動，而是用余光觀察視標。測顏色視野一定要看清是什么顏色的視標方為有效。

【思考題】

1．一患者左眼顳側視野、右眼鼻側視野發(fā)生缺損，請判斷其病變的可能部位。

2．夜盲癥患者的視野將會發(fā)生什么變化?為什么?

3．視交叉病變時，患者視野將出現(xiàn)何種改變?為什么?

（崔艷茹  朱大誠)

實驗18 聲音的傳導途徑

【實驗目的】

1．掌握聲音的傳導途徑，比較氣傳導和骨傳導的異同點。

2．掌握氣傳導和骨傳導的檢測方法，學會鑒別聽力障礙的方法。

【實驗原理】

外界聲波傳入內(nèi)耳的途徑有兩條：一是聲波經(jīng)外耳道引起鼓膜振動,再經(jīng)聽骨鏈和卵圓窗膜傳入耳蝸,稱為氣傳導（氣導)，是引起正常聽覺的主要途徑。另一條是聲波直接引起顱骨的振動，從而引起耳蝸內(nèi)淋巴的振動，這種傳導方式稱為骨傳導（骨導)。正常人氣導的效率遠大于骨導。臨床上，若氣導時間大（長)于骨導時間，稱為任內(nèi)試驗陽性；反之，若氣導時間縮短而小于骨導時間，則稱為任內(nèi)試驗陰性。用來比較兩耳骨傳導的試驗叫魏伯試驗。當耳的傳導功能異常時，氣導和骨導的正常關系受到破壞。依據(jù)以上兩種試驗結果可鑒別傳導性耳聾和神經(jīng)性耳聾。

【實驗對象】

    人。

【實驗用品】

    音叉（頻率為256Hz或512Hz)，橡皮錘，棉球。

【實驗步驟】

1．比較同側耳的氣導和骨導的試驗（任內(nèi)試驗)。

（1)安靜環(huán)境中，受試者取坐位。檢查者用橡皮錘敲響音叉使其振動后，立即置于受試者一側顳骨乳突部，受試者可聽到音叉的響聲并隨時間延長而響度逐漸減弱至消失。當受試者剛剛聽不到響聲時，迅速將音叉移至其外耳道口，則受試者又可重新聽到響聲。反之，先置音叉于外耳道口處，當聽不到聲音時再將音叉移至乳突部，受試者仍聽不到聲音。這說明正常人氣導時間比骨導時間長，即任內(nèi)試驗陽性（+)。

（2)用棉球塞住同側外耳道口（模擬氣導障礙)，重復上述實驗步驟，則氣導等于或小于骨傳導時間，臨床上稱為任內(nèi)試驗陰性（－)。

2．比較兩耳骨傳導的試驗（魏伯試驗)。

（1)將振動的音叉柄置于受試者前額正中發(fā)際處，比較兩耳所聽到的聲音強度。

（2)用棉球塞住一側耳孔，重復上述實驗，詢問受試者聽到的聲音強度偏向哪側。

【觀察項目】

根據(jù)實驗步驟中任內(nèi)試驗和魏伯試驗兩種方法，臨床上可大致確定正常耳以及判斷耳聾的性質（表1-4)。

【注意事項】

1．室內(nèi)保持安靜，盡量減少外界干擾。

2．音叉嚴禁在硬物上敲擊，以防損壞。

3．要使音叉振動方向正對外耳道口，不能觸及耳廓及頭發(fā)。

【思考題】

1．氣導與骨導有何區(qū)別？

2．傳音性耳聾和感音性耳聾的發(fā)生與表現(xiàn)有何不同？

3．用任內(nèi)試驗和魏伯試驗怎樣鑒別傳導性耳聾和神經(jīng)性耳聾？

表1-4   聲音傳導測試結果判斷

 （崔艷茹)