己烯雌酚原料藥－己烯雌酚－高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定己烯雌酚原料藥中己烯雌酚的含量。

本方法適用于己烯雌酚原料藥。

供試品經(jīng)乙醇-水（1：1)溶解并定量稀釋，進入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長254nm處檢測己烯雌酚的峰面積，計算出其含量。

1. 甲醇

2. 乙醇

1. 儀器

1.1 高效液相色譜儀

1.2 色譜柱

十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，理論塔板數(shù)按己烯雌酚反式體峰計算應不低于1000。

1.3 紫外吸收檢測器

2. 色譜條件

2.1 流動相：甲醇 水=80 20

2.2 檢測波長：254nm

2.3 柱溫：室溫

1. 對照品溶液的制備

精密稱取己烯雌酚對照品適量，加乙醇-水（1：1)溶解并定量稀釋制成每1mL中約含己烯雌酚0.1mg的溶液，即為對照品溶液。

2. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品適量，加乙醇-水（1：1)溶解并定量稀釋制成每1mL中約含己烯雌酚0.1mg的溶液，即為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應準確至所稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準確度應符合國家標準中對該體積移液管的精度要求。

分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10mL，注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器于波長254nm處測定，按外標法以己烯雌酚順式體峰面積的1.26倍與己烯雌酚反式體峰面積的和計算出含量。