利血平原料藥—利血平的測(cè)定—分光光度法

本方法采用分光光度法測(cè)定利血平原料藥中利血平的含量。

本方法適用于利血平原料藥。

供試品加三氯甲烷溶解，無(wú)水乙醇稀釋制成供試液，經(jīng)前處理置紫外可見分光光度計(jì)，于390nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，計(jì)算出其含量。

1. 三氯甲烷

2. 無(wú)水乙醇

3. 硫酸滴定液（0.25mol/L)

4. 0.3%亞硝酸鈉溶液

5. 5%氨基磺酸銨溶液

6. 甲基紅-溴甲酚綠混合指示液

7. 基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉

紫外可見分光光度計(jì)

1. 硫酸滴定液（0.25mol/L)

配制：取硫酸15mL，緩緩注入適量水中，冷卻至室溫，加水稀釋至1000mL，搖勻。

標(biāo)定：取在270~300℃干燥至恒重的基準(zhǔn)無(wú)水碳酸鈉約0.75g，精密稱定，加水50mL使溶解，加甲基紅-溴甲酚綠混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由綠色轉(zhuǎn)變?yōu)樽霞t色時(shí)，煮沸2分鐘，冷卻至室溫，繼續(xù)滴定至溶液由綠色變?yōu)榘底仙�。�?mL硫酸滴定液（0.25mol/L)相當(dāng)于26.50mg的無(wú)水碳酸鈉。根據(jù)本液的消耗量與無(wú)水碳酸鈉的取用量，算出本液的濃度。

取0.1%甲基紅的乙醇溶液20mL，加0.2%溴甲酚綠的乙醇溶液30mL，搖勻。

3.對(duì)照品溶液的制備

精密稱取利血平對(duì)照品適量，按供試品溶液制備方法制成每1mL中約含20µg的溶液，即得對(duì)照品溶液。

4. 供試品溶液的制備

精密稱取供試品約20mg，置100mL量瓶中，加三氯甲烷4mL使溶解，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，精密量取5mL，置50mL量瓶中，加無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至稱取重量的千分之一�！熬�密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。

精密量取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5mL，分別置10mL量瓶中，各加硫酸滴定液（0.25mol/L)1.0mL與新制的0.3%亞硝酸鈉溶液1.0mL，搖勻，置55℃水浴中加熱30分鐘，冷卻，各加新制的5%氨基磺酸銨溶液0.5mL，用無(wú)水乙醇稀釋至刻度，搖勻，另取對(duì)照品溶液與供試品溶液各5mL，除不加0.3%亞硝酸鈉溶液外，分別用同一方法處理后作為各自相應(yīng)的空白，照紫外分光光度法，于波長(zhǎng)390nm處測(cè)定吸收度。

注：分光光度法應(yīng)以配制供試品的同批溶劑為對(duì)照，采用1cm的石英吸收池。以吸收度最大的波長(zhǎng)作為測(cè)定波長(zhǎng)，一般供試品的吸收度讀數(shù)，以在0.3-0.7之間的誤差較小。儀器的狹縫波帶寬度應(yīng)小于供試品吸收帶的半寬度，否則測(cè)得的吸收度偏低。狹縫寬度的選擇，應(yīng)以減少狹縫寬度時(shí)供試品的吸收度不再增加為準(zhǔn)。由于吸收池和溶劑本身可能有空白吸收，因此測(cè)定供試品的吸收度后應(yīng)減去空白讀數(shù)，再計(jì)算含量。

中華人民共和國(guó)藥典，國(guó)家藥典委員會(huì)編，化學(xué)工業(yè)出版社，2005年版，一部，p.263。