香連丸—黃連素的測定—高效液相色譜法

本方法采用高效液相色譜法測定香連丸中黃連素的含量。

本方法適用于中成藥香連丸。

供試品于容量瓶中，加HCl－CH₃OH超聲提取，放冷，搖勻，濾過，濾液注入高效液相色譜儀進行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處檢測黃連素的吸收值，計算出其含量。

1.甲醇（色譜純)

2.乙腈（色譜純)

3.鹽酸

1儀器

1.1高效液相色譜儀

1.2色譜柱

μBONDAPAK-C₁₈(3.9mm×250mm,10μm)

1.3紫外吸收檢測器

2色譜條件

2.1流動相：乙腈 磷酸鹽緩沖液(PH5.2) 甲醇 ＋1.3％SDS = 5 6 1 1

2.2檢測波長：345nm

1.稱取供試品

精密稱取香連丸（過3號篩)1.116g。

2.對照品溶液的制備

精密稱取105℃干燥至恒重的鹽酸小檗堿對照品11.36mg置于50mL容量瓶中，加適量乙醇使溶解，并加乙醇至刻度，作為鹽酸小檗堿對照品溶液。

3. 標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備

分別精密吸取上述鹽酸小檗堿對照品溶液1mL,2mL,3mL,4mL置10mL容量瓶中，用乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線的系列濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。

4.供試品溶液的制備

將供試品置50mL容量瓶中，加HCl-CH₃OH(1:100)至刻度超聲處理30min，放冷至室溫，加HCl-CH₃OH至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。

注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取體積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對該體積移液管的精度要求。

1.標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

將上述系列標(biāo)準(zhǔn)濃度的對照品溶液，各進樣10μL，以峰面積積分值對濃度進行回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

2.供試品溶液的測定

分別精密吸取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL注入高效液相色譜儀，用紫外吸收檢測器，于波長345nm處測定黃連素的峰面積積分值，用外標(biāo)法計算出黃連素的含量。

陳向陽，吳韶銘，施芬.香連丸中黃連素的HPLC法測定.中成藥，1998，20(9):15-17