方法名稱: |
人工牛黃—膽紅素的測定—紫外可見分光光度法 |
應用范圍: |
本方法采用分光光度法測定人工牛黃中膽紅素的含量。 本方法適用于由牛膽粉、膽酸、豬去氧膽酸、牛黃酸、膽紅素、膽固醇、微量元素等制成的人工牛黃。 |
方法原理: |
供試品經(jīng)三氯甲烷超聲定量提取,過濾,續(xù)濾液置紫外可見分光光度計, 于波長453nm處測定吸收度,計算其膽紅素的量。 |
試劑: |
三氯甲烷 |
儀器設備: |
紫外-可見分光光度計 |
試樣制備: |
對照品溶液的制備 取膽紅素對照品10mg,精密稱定,置100mL棕色量瓶中,加三氯甲烷80mL超聲處理使充分溶解,加三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻。精密量取10 mL,置50 mL棕色量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,制成每1mL含膽紅素20mg的溶液。 |
操作步驟: |
1. 標準曲線的繪制 精密吸取對照品溶液4mL、5mL、6mL、7mL與8mL,分別置25 mL棕色量瓶中,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,照分光光度法,分別在453nm波長處測定吸收度,以吸收度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。 2. 供試品的測定 取本品80mg,精密稱定,置100 mL棕色量瓶中,加三氯甲烷80mL超聲處理使充分溶解,用三氯甲烷稀釋至刻度,搖勻,濾過,棄去初濾液,取續(xù)濾液在453nm波長處測定吸收度,從標準曲線上讀出供試品溶液中膽紅素的重量,計算。 |
參考文獻: |
中華人民共和國藥典,國家藥典委員會編,化學工業(yè)出版社,2005年版,一部,p.4。 |