荷葉—槲皮素、荷葉堿—HPLC-UV

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方法名稱：	荷葉—槲皮素、荷葉堿—HPLC-UV
應(yīng)用范圍：	用于荷葉中槲皮素、荷葉堿的含量測(cè)定
方法原理：	1.本品粉末用甲醇超聲提取，提取液再用鹽酸、甲醇酸化處理，經(jīng)液相色譜儀分離，在270nm處測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算槲皮素的含量。 2.本品粉碎后，用氨水-氯仿超聲提取，蒸干，用甲醇溶解，經(jīng)液相色譜儀分離，在270nm處測(cè)定，按外標(biāo)法計(jì)算荷葉堿的含量。
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件：	儀器設(shè)備德國(guó)戴安Summit 高效液相色譜儀；UVD170U 多波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器；Chromeleon色譜工作站。色譜條件　 1.槲皮素島津CLC-ODS柱(6.0×150mm )；流動(dòng)相：甲醇-0.4%磷酸溶液(48∶52)；流速：1.0mL ·min^-1；檢測(cè)波長(zhǎng)：360nm； 2.荷葉堿　島津CLC2ODS 柱( 6.0×150mm )；流動(dòng)相：甲醇-水-二乙胺(75∶25∶0. 01) ；流速1.0 mL ·m in^-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：270 nm。
試樣制備：	對(duì)照品溶液的制備 1.精密稱取槲皮素對(duì)照品，加甲醇溶解并制成0. 032 m g·mL^-1的溶液，作為對(duì)照品溶液。 2.精密稱取荷葉堿對(duì)照品置量瓶中，加甲醇超聲使溶解并制成0. 306 m g ·mL^-1 的溶液，作為對(duì)照品溶液供試品溶液的制備 1.精密稱取藥材粉末約1g，置錐形瓶中，精密加入甲醇50mL，稱定重量，超聲處理20min，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液10 mL，加甲醇10 mL、25% 鹽酸溶液5mL，搖勻，置水浴中加熱回流30min，迅速冷卻至室溫，甲醇定容至50mL量瓶中，作為供試品溶液。　 2.取藥材粉末1 g，精密稱定，置錐形瓶中，加濃氨水約0.5mL 使?jié)櫇瘢芗尤肼确?0mL，加熱回流1h，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状挤执纬暼芙獠⒍ㄈ葜?5 mL 量瓶中，搖勻，用微孔濾膜(0.45μm) 濾過，作為供試品溶液。
操作步驟：	分別吸取兩種對(duì)照品溶液和兩種供試品溶液各10μL，注入液相色譜儀，按擬定色譜條件測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算槲皮素、荷葉堿含量。
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備注：
參考文獻(xiàn)：	鄔曉鷗，熊英. 荷葉質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究. 現(xiàn)代中藥研究與實(shí)踐.2004.18（4)：27～29