方法名稱: |
紅豆杉樹皮—紫杉醇的測定—HPLC-UV |
應用范圍: |
用于紅豆杉樹皮中紫杉醇含量的測定 |
方法原理: |
本品細粉用無水乙醇超聲提取,經液相色譜儀分離,在227nm測定,外標法計算紫杉醇的含量 |
儀器設備及實驗條件: |
儀器設備 W aters 510高效液相色譜儀;UV-490紫外檢色器。 色譜條件 色譜柱:N ucleo sil7 C18 (250×4.6 mm ,5µm.);流動相:甲醇-水(65∶35);流速:1.0m l/m in;檢測波長:227 nm; |
試樣制備: |
對照品溶液制備 精密稱取紫杉醇對照品約17 mg, 置于10 m l 量瓶中, 用無水乙醇溶解并稀釋至刻度, 搖勻, 得對照品貯備液。 供試品溶液的制備 精密稱取樹皮粉(40目) 8g,置100ml錐形瓶中。加入50ml95%乙醇,超聲波振蕩,提取30min,過濾。藥渣再用90ml 95% 乙醇如法提取3次(30ml×3次),20min/次。合并各次提取液,置250ml圓底燒瓶中,減壓回收溶劑,待殘余物呈糖狀時,轉移至125ml分液漏斗中,加蒸餾水30ml稀釋,用石油醚(BP60~90℃) 萃取2次,30ml/次。然后用二氯甲烷振搖萃取4次,30m l/次。合并各次二氯甲烷萃取液,用適量無水硫酸鈉脫水后,過濾,濾液置250 m l 圓底燒瓶中,常壓回收溶劑至干。殘留物用適量無水乙醇溶解并定容為10ml,即得供試品溶液。 |
操作步驟: |
精密吸取對照液以及供試品溶液1Oμl,分別注入液相色譜儀,按上述色譜條件測定峰面積。計算含量。 |
附件: |
點擊下載 (解壓密碼:52667788.cn) |
備注: |
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參考文獻: |
楊安東,蔣慶宇,徐學民等. 紅豆杉樹皮中紫杉醇反相高效液相色譜法測定. 時珍國醫(yī)國藥.1999,10(8):575~577 |