方法名稱： |
人工栽培南方紅豆杉—紫杉醇的測(cè)定—HPLC-UV |
應(yīng)用范圍： |
用于對(duì)人工栽培南方紅豆杉枝、葉、皮、種子中紫杉醇含量的測(cè)定 |
方法原理： |
本品細(xì)粉用甲醇-二氯甲烷(1∶1)超聲提取，經(jīng)液相色譜儀分離，在227nm測(cè)定，外標(biāo)法計(jì)算紫杉醇的含量 |
儀器設(shè)備及實(shí)驗(yàn)條件： |
儀器設(shè)備 A lltech 426 型高效液相色譜儀；200型紫外檢測(cè)器；Alltech 外置工作站。 色譜條件 色譜柱：A lltima C18柱(5mm×250mm，5 µm)；柱溫: 室溫；流動(dòng)相: 甲醇-水(65∶35)；流速: 1mL/min；檢測(cè)波長: 227nm； 每次進(jìn)樣量: 20µL |
試樣制備： |
對(duì)照品溶液制備 供試品溶液的制備 將人工栽培南方紅豆杉種子、枝條、葉子和皮于40℃干燥后碾成粉末(過孔徑為0.32 mm的篩)，分別精確稱取2.5g于200mL三角瓶中，用100mL混合溶劑浸泡24 h，次日超聲震蕩提取30min，過濾，殘?jiān)眉状紱_洗3次，合并濾液，30℃下減壓濃縮，提取物用水(50mL×3) 和正己烷(50mL×3) 萃取，水層用二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷萃取液，然后用活性炭(5g)脫色，過濾，濾液于25℃下減壓干燥，用甲醇1mL溶解，0.45µm微孔濾膜過濾，分別配制好種子、枝條、葉和皮的樣品制備液， |
操作步驟： |
精密吸取對(duì)照液以及供試品溶液2Oμl，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，計(jì)算含量。 |
附件： |
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備注： |
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參考文獻(xiàn)： |
李俊，牙啟康，蘇小建等.人工栽培南方紅豆杉紫杉醇的含量分析. 廣西師范大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版).2005，23（2)：68～70 |
