公開(公告)號
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CN1970779A
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公開(公告)日
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2007.05.30
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申請(專利)號
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CN200610048875.4
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申請日期
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2006.12.06
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專利名稱
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一種使用Sepharose 4FF凝膠對細(xì)菌多糖進行純化的方法
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主分類號
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C12P19/04(2006.01)I
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分類號
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C12P19/04(2006.01)I;C08B37/00(2006.01)I;C12R1/46(2006.01)N;C12R1/42(2006.01)N;C12R1/21(2006.01)N;C12R1/01(2006.01)N
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(專利權(quán))人
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云南沃森生物技術(shù)有限公司
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發(fā)明(設(shè)計)人
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黃 鎮(zhèn);向左云
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地址
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650106云南省昆明市高新區(qū)云南省大學(xué)科技園2期A3幢4樓
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構(gòu)
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昆明正原專利代理有限責(zé)任公司
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代理人
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劉明哲
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國省代碼
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云南;53
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主權(quán)項
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一種使用Sepharose 4FF凝膠對細(xì)菌多糖進行純化的方法,具體步驟是: (1)采用生物反應(yīng)器對細(xì)菌進行發(fā)酵培養(yǎng); (2)于對數(shù)生長后期殺菌,離心收集上清液; (3)制備粗制多糖; (4)對粗制多糖進行預(yù)處理,用截留分子量10~100kD的超濾膜超濾濃縮至多糖濃度為2~50mg/ml; (5)以2~15%柱體積上樣于Sepharose 4FF凝膠柱,以含0.02~1.0mol/L氯化鈉或氯化鈣的洗脫液洗脫,收集Kd0.5之前的組分; (6)洗脫液加入乙醇至終濃度50-90%沉淀多糖,離心收集多糖沉淀; (7)沉淀分別用無水乙醇、丙酮各洗滌2次; (8)經(jīng)冷凍干燥,獲得高純度的精制多糖。
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摘要
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本發(fā)明一種使用Sepharose 4FF凝膠對細(xì)菌多糖進行純化的方法,屬于生物技術(shù)領(lǐng)域,其步驟為在對細(xì)菌多糖進行預(yù)處理后,使用Sepharose 4FF凝膠對細(xì)菌多糖進行純化,收集Kd 0.5之前的組分,可獲得純度高,內(nèi)毒素含量低的細(xì)菌多糖。本發(fā)明獲得的純度高、內(nèi)毒素含量低的細(xì)菌多糖適合于制備細(xì)菌多糖疫苗及細(xì)菌多糖結(jié)合疫苗。
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國際公布
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