公開(公告)號(hào)
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CN1570133A
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公開(公告)日
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2005.01.26
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申請(qǐng)(專利)號(hào)
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CN200410018000.0
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申請(qǐng)日期
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2004.04.27
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專利名稱
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一種制備人參皂甙Compound-K的方法
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主分類號(hào)
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C12P33/00
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分類號(hào)
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C12P33/00;//(C12P33/00,C12R1∶645)
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分案原申請(qǐng)?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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申請(qǐng)(專利權(quán))人
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復(fù)旦大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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周佩;周偉;李繼揚(yáng);黃海;馮美卿
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地址
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200433上海市邯鄲路220號(hào)
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頒證日
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國(guó)際申請(qǐng)
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進(jìn)入國(guó)家日期
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海正旦專利代理有限公司
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代理人
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包兆宜
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國(guó)省代碼
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上海;31
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主權(quán)項(xiàng)
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一種制備人參皂甙Compound-K的方法,其特征是采用霉菌好氣性發(fā)酵技術(shù)、固定化細(xì)胞技術(shù)和固定化酶技術(shù),直接轉(zhuǎn)化人參總皂甙,生成Compound-K后,進(jìn)行分離純化,含量分析和結(jié)構(gòu)確證,所述方法包括下述步驟:1)分離霉菌菌種;2)發(fā)酵搖瓶發(fā)酵:孢子懸浮液直接接入發(fā)酵培養(yǎng)基,培養(yǎng)60~72小時(shí),人參總皂甙1~5%投料,進(jìn)行轉(zhuǎn)化,發(fā)酵罐發(fā)酵:孢子懸浮液接入種子培養(yǎng)基,將種子培養(yǎng)液按5-10%比例接入發(fā)酵罐,人參總皂甙1~5%投料,轉(zhuǎn)化40~56小時(shí);3)固定化收集菌體,海藻酸鈉包埋法制備固定化細(xì)胞,純化皂甙糖苷酶,以聚乙烯氧化物為載體制備固定化人參皂甙糖苷酶;4)提取分離酒精浸提,正丁醇萃取,活性炭脫色,濃縮制得浸膏,上硅膠柱分離,制備HPLC精制后甲醇-水重結(jié)晶;5)TLC,HPLC方法分析檢測(cè)CompoundK;6)核磁共振和單晶衍射技術(shù)CompoundK結(jié)構(gòu)鑒定。
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摘要
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本發(fā)明屬于藥學(xué)領(lǐng)域,涉及一種制備人參皂甙Compound-K的方法。本發(fā)明采用霉菌好氣性發(fā)酵技術(shù)、固定化細(xì)胞技術(shù)和固定化酶技術(shù),直接以各種人參總皂甙作為底物,發(fā)酵轉(zhuǎn)化制備Compound-K,并將其分離純化,進(jìn)行含量分析和結(jié)構(gòu)確證。檢測(cè)結(jié)果證實(shí),本方法所得產(chǎn)物符合Compound K結(jié)構(gòu)。本方法簡(jiǎn)便易操作,成本低,不需要花費(fèi)人力和財(cái)力進(jìn)行單體皂甙分離,轉(zhuǎn)化率高達(dá)15%,易于制藥或保健品工業(yè)產(chǎn)業(yè)化。
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國(guó)際公布
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