一種以微生物克隆載體生產治療血管疾病基因藥物血管內皮生長因子-2裸DNA的方法
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公開(公告)號
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CN1467295A
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公開(公告)日
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2004.01.14
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申請(專利)號
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CN03100580.2
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申請日期
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2003.01.20
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專利名稱
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一種以微生物克隆載體生產治療血管疾病基因藥物血管內皮生長因子-2裸DNA的方法
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主分類號
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C12P19/34
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分類號
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C12P19/34;C12N15/12;A61K48/00;A61P9/10;C12Q1/68
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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甘肅亞盛鹽化工業(yè)集團有限責任公司
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發(fā)明(設計)人
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周長生;張金文;陳正華
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地址
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730030甘肅省蘭州市城關區(qū)張掖路219號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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甘肅省專利服務中心
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代理人
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田玉蘭
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國省代碼
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甘肅;62
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主權項
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一種包含有人源性VEGF啟動子(hVEGF promoter)和鼠源性VEGF-2cDNA(mVEGF-2)的載體，其特征在于：該載體的hVEGF啟動子和mVEGF-2定向連接在一起，hVEGF啟動子位于mVEGF-2上游，使mVEGF-2基因被hVEGF啟動子所驅動。
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摘要
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本方法從受孕小鼠胚胎克隆了鼠源性VEGF-2(mVEGF-2)基因，然后從新生兒胎盤克隆人源性VEGF啟動子(hVEGF promoter)，并使mVEGF-2被hVEGFpromoter所驅動，插入哺乳動物表達載體pEGSH中，構建出能夠在原核細胞中以高拷貝數產生大量DNA、并能在原核和哺乳動物細胞中均能表達的載體pEGVPV。用這載體轉化E.coli DH5α后，獲得的DNA拷貝數有2000個/細胞之多，從細胞培養(yǎng)物中分離的DNA產量能夠達到1.5mg/L。本發(fā)明還提供了一種以微生物生產血管內皮生長因子-2(vascular endothelial growth factor2，VEGF-2)DNA藥物的方法。血管內皮生長因子能特異性地作用于血管內皮細胞，強烈促進其增殖和血管形成，并有升高血管通透性的作用。缺血型動物模型實驗表明，向局部缺血組織顯微注射該裸DNA可促進新生血管形成，增強側枝循環(huán)的建立，有效地改善了缺血組織的血液供應。本方法可提供一種治療血管疾病的新方案。
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國際公布
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