公開(公告)號
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CN100348268C
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公開(公告)日
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2007.11.14
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申請(專利)號
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CN99800883.4
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申請日期
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1999.06.07
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專利名稱
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碳化樹脂DNA免疫吸附劑的制備方法
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主分類號
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A61K39/44(2006.01)I
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分類號
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A61K39/44(2006.01)I;G01N33/545(2006.01)I;G01N33/564(2006.01)I;A61P37/00(2006.01)I
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權(quán)
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1998.6.8 CN 98102355.X
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申請(專利權(quán))人
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南開大學(xué)
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發(fā)明(設(shè)計(jì))人
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俞耀庭;陳長治;孔德領(lǐng)
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地址
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300071中國天津南開區(qū)衛(wèi)津路94號
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頒證日
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國際申請
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1999-06-07 PCT/CN1999/000076
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進(jìn)入國家日期
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2000.02.01
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專利代理機(jī)構(gòu)
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上海專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司
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代理人
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徐 迅
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國省代碼
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天津;12
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主權(quán)項(xiàng)
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一種DNA免疫吸附劑的制備方法,它使用炭化樹脂作為載體,在其上固定了有效量的DNA,DNA的含量為0.3-0.5mg/mL樹脂,其特征在于,該方法包括下列步驟: (1)制備炭化樹脂 以5.0-7.5%w/w苯乙烯和7.5-10.0%w/w丙烯腈為單體,以10.0-12.5%w/w二乙烯苯為交聯(lián)劑,以50.0%w/w甲苯和25.0%w/w液體石蠟為致孔劑,單體和交聯(lián)劑的重量與致孔劑的重量比為150.0∶460.0,以0.15-0.3%w/w過氧化苯甲酰為引發(fā)劑,以1-2%聚乙烯醇水溶液為分散介質(zhì),進(jìn)行懸浮聚合,在80℃溫度下反應(yīng)5小時(shí);其中,苯乙烯、丙烯腈、二乙烯苯、甲苯、液體石蠟、過氧化苯甲酰組成有機(jī)相,聚乙烯醇水溶液組成水相,且有機(jī)相中所有組分的含量之和為100%w/w; 然后,在96℃溫度下蒸餾甲苯,再在100℃溫度下將球體聚合物煮沸2-3小時(shí),使其進(jìn)一步聚合和硬化;然后,用熱水洗滌,在50℃溫度下烘干,再用石油醚淋洗脫蠟,獲得三元共聚超大孔樹脂; 將上述樹脂放入電阻爐中,在惰性氣體的保護(hù)下,在100-300℃溫度下預(yù)燒8-10小時(shí),然后升溫至500-800℃,再通入水蒸氣活化0.5-1.0小時(shí)后冷卻,即獲得炭化樹脂; (2)制備炭化樹脂DNA免疫吸附劑 把小牛胸腺DNA溶液與火棉膠乙醚溶液混合均勻后,一邊迅速攪拌,一邊加入經(jīng)過預(yù)處理的炭化樹脂,使液體很快被吸干,然后用50-60℃的熱水浴恒溫淋洗2小時(shí),并不時(shí)攪拌,至溶劑完全揮發(fā),再在50℃溫度下真空干燥2小時(shí),用水漂洗數(shù)遍后裝入洗滌塔淋洗,直到流出液在260nm處無紫外吸收,然后再漂洗數(shù)遍,在50℃真空下干燥,即獲得成品吸附劑。
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摘要
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本發(fā)明提供了一種碳化樹脂DNA免疫吸附劑的制備方法,這種方法以苯乙烯、丙烯腈、二乙烯苯、甲苯、液體石蠟、過氧化苯甲酰、聚乙烯醇水溶液為原料,經(jīng)過制備碳化樹脂和制備碳化樹脂DNA免疫吸附劑兩個階段,能制成DNA含量為0.3-0.5mg/mL樹脂的DNA免疫吸附劑。這種免疫吸附劑的吸附性能高,不含熱原物質(zhì),制造成本低,更加符合臨床醫(yī)用要求,有利于推廣用免疫吸附劑來治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡疾病。
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國際公布
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1999-12-16 WO1999/064071 中
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