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實(shí)用免疫細(xì)胞與核酸:第四章 免疫酶細(xì)胞化學(xué)

免疫酶細(xì)胞化學(xué)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immun52667788.cnocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應(yīng)存在的前提條件下,借助于酶細(xì)胞化學(xué)的手段,檢測某種物質(zhì)(抗原/抗體)在組織細(xì)胞內(nèi)存在部位的一門新技術(shù):即預(yù)先將抗體與酶連結(jié),再使其與組織內(nèi)特…

免疫酶細(xì)胞化學(xué)是免疫細(xì)胞化學(xué)(Immun52667788.cnocytochemistry,ICC)中最常用的方法之一,它是在抗原抗體特異反應(yīng)存在的前提條件下,借助于酶細(xì)胞化學(xué)的手段,檢測某種物質(zhì)(抗原/抗體)在組織細(xì)胞內(nèi)存在部位的一門新技術(shù):即預(yù)先將抗體與酶連結(jié),再使其與組織內(nèi)特異抗原反應(yīng),經(jīng)細(xì)胞化學(xué)染色后,于光鏡或電子顯微鏡下觀察分析的形態(tài)學(xué)研究方法。

40多年前,Cowww.med126.comons及其同事利用熒光色素(FITC)標(biāo)記抗體而開創(chuàng)的免疫熒光抗體技術(shù),具有一定的靈敏性、特異性、操作簡單等優(yōu)點(diǎn),但亦存在抗體用量大,標(biāo)本不能長期保存、需較昂貴的熒光顯微鏡等問題。幾乎在同一時(shí)期,電子顯微鏡在醫(yī)學(xué)生物學(xué)領(lǐng)域中得到了廣泛的應(yīng)用。為克服熒光抗體法的不足、并能在超微結(jié)構(gòu)水平定位抗原物質(zhì)的存在部位,Nakane(1966)等成功地引入了酶代替熒光色素標(biāo)記抗體,進(jìn)行組織細(xì)胞內(nèi)抗原或半抗原的定位,開辟了酶標(biāo)抗體技術(shù)免疫酶細(xì)胞化學(xué)之路。

Sternberger(1970)等人在此基礎(chǔ)上又作了改良,建立了非標(biāo)記抗體酶法以及PAP法。酶標(biāo)抗體法確立至今已經(jīng)27個(gè)春秋,不斷發(fā)展、成熟。各種新技術(shù)的引入,使新抗體相繼問世,應(yīng)運(yùn)而生的抗體制造、經(jīng)銷商遍布世界各地,使ICC技術(shù)得到了更廣泛的推廣和應(yīng)用,成為當(dāng)今形態(tài)學(xué)研究領(lǐng)域中不可缺少的手段;同時(shí)也有為臨床病理診斷、腫瘤性質(zhì)的判定、預(yù)后的估測等提供重要依據(jù),是臨床實(shí)驗(yàn)室常規(guī)檢查法之一。近年,伴隨分子生物學(xué)、分子遺傳學(xué)的驚人進(jìn)步,ICC技術(shù)在基因表達(dá)產(chǎn)物的觀察,細(xì)胞功能動(dòng)態(tài)分析中,亦發(fā)揮著重要作用。在此,結(jié)合,筆者經(jīng)驗(yàn),介紹ICC染色中的主要程序:組織標(biāo)本的固定、切片、染色原理及步驟、結(jié)果判定及一些進(jìn)展、特殊應(yīng)用等供讀者參考。

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