生物制品不得含有雜菌（有專門規(guī)定者除外)，滅活菌苗、疫苗不得含有活的本菌、本毒。在制造過程中應由制造部門按各制品制造及檢定規(guī)程規(guī)定進行無菌試驗，分裝后的制品須經(jīng)質(zhì)量檢定部門做最后檢定。各種生物制品的無菌試驗除有專門規(guī)定者外，均應按照本規(guī)程的規(guī)定進行。
1 抽樣
1.1原液及半成品
原液及半成品應每瓶分別進行無菌試驗，其抽樣量應至少為0.1%，但不得少于1.0ml。
1.1.1 大罐稀釋的制品抽樣數(shù)量不得少于10ml。
1.1.2 原液及半成品每開瓶一次，應如上法抽驗。
1.2 成品
每亞批均應進行無菌試驗，樣品應隨機抽取，應具有代表性（包括分裝過程的前、中、后樣品)。
1.2.1分裝量在100支（瓶)或以下者抽檢不少于5支，101～500支（瓶)者抽檢不少于10支（瓶)，501～10000支（瓶)者抽檢不少于20支（瓶，10001支（瓶)以上者抽檢40支（瓶)。
1.2.2每瓶裝量20ml以上的凍干血液制品，每柜凍干200瓶以下者抽檢2瓶，200瓶及以上者抽檢4瓶。6～20ml抽檢量加倍。5ml和5ml以下者按1.2.1項抽檢。
1.3凡規(guī)定需作支原體檢查的制品，均應在半成品時按亞批進行檢查，成品可不再做。
2 無菌試驗用培養(yǎng)基（培養(yǎng)基處方可附錄1)
2.1 檢查制品中本菌是否存活應采用適于本菌發(fā)育生長的培養(yǎng)基（在半成品時檢查，有專門規(guī)定者除外)。
2.2 檢查需氧性和厭氧性雜菌應采用硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基。檢查不含汞類防腐劑制品中的需氧性和厭氧性雜菌時，該培養(yǎng)基中可不加硫乙醇酸鹽。
檢查霉菌和腐生菌應采用改良馬丁培養(yǎng)基。
檢查混濁制品可采用不含瓊脂的硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基。檢查活菌苗時可加大瓊脂含量，做成斜面。
2.3 檢查支原體應采用豬胃消化液半固體或牛心消化液半固體培養(yǎng)基。
2.4 生物制品無菌試驗用培養(yǎng)基亦可用經(jīng)檢定合格的干燥培養(yǎng)基配制。
2.5 無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度，乙型溶血性鏈球菌（32210株)應達到10-8，短芽胞桿菌（7316株)和生孢子梭狀芽胞桿菌（64941株)應達到10-7，白色念珠菌（ATCc 10231)和臘葉芽枝霉應達到10-6。
2.6 生物制品無菌試驗培養(yǎng)基由質(zhì)量檢定部門與培養(yǎng)基制造部門會同進行靈敏度試驗。每當更換主要原材料時，應進行靈敏度試驗，合格后方可應用（靈敏度試驗法見附錄2、3)。
2.7 各生產(chǎn)單位的質(zhì)量檢定部門應定期抽檢無菌試驗培養(yǎng)基的靈敏度，檢定所應定期抽檢各所的無菌試驗培養(yǎng)基。
3 無菌試驗方法
3.1 無菌試驗取樣、移種等全部操作，應在無菌操作室內(nèi)或無菌條件下進行，無菌操作室應經(jīng)常保持清潔，在每次操作前，應徹底消毒。
3.2 菌苗、疫苗、類毒素、抗毒素類制品及粘稠不易過濾的血液制品應用直接接種法進行無菌試驗。人白蛋白及人丙種球蛋白（包括各種劑型及應用途徑的制品)應用薄膜過濾法進行無菌試驗，其他血液制品亦可用薄膜過濾法或直接接種法進行。
3.3 直接接種法
3.3.1 菌苗、疫苗、類毒素、抗毒素類制品
3.3.1.1 每安瓿裝量5.0ml以上者（不含552667788.cn/sanji/.0ml)取樣不應少于1.0ml，裝量在5.0ml以下者（含5.0ml)取樣不得少于0.5ml，裝量不足0.5ml者，全部吸取。
3.3.1.2 含防腐劑的制品，接種量與培養(yǎng)基的比例：用苯酚或氯仿作防腐劑者至少為1:20，用汞作防腐劑者或制品內(nèi)含有甲醛、抗生素者至少為1:50。先按此比例接種于硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基內(nèi)增菌，于20～25℃培育3～4天后移種至硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、適宜的瓊脂斜面、改良馬丁培養(yǎng)基各2管，每管0.5ml。將硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基、適宜的瓊脂斜面各1管置30～35℃培育，其余各管置20～25℃培育，培育時間除有專門規(guī)定者外共為8天。
3.3.1.3 不含防腐劑制品，裝量在5.0ml以下者（包括5.0ml)每10支安瓿混合，裝量在5.0ml以上者每7支安瓿混合，將混合后的樣品直接接種一組培養(yǎng)基，分別置20～25℃、30～35℃培育，培育時間共為8天。
3.3.1.4 支原體培養(yǎng)基臨用時將半固體煮沸10～15分鐘后，冷卻到56℃左右，加入未滅能馬血清或滅能小牛血清和酵母浸液（培養(yǎng)基、血清、酵母浸液之比為7:2:1)，并可酌情加入適量青霉素或醋酸鉈，充分搖勻，等冷至35～37℃時種入待檢樣品0.5～1.0ml，共接種2支培養(yǎng)基，置35～37℃培育14天。
3.3.1.5 混濁和接種后不能判定結果的制品，可取規(guī)定量的樣品接種于不含瓊脂的硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基（200ml)內(nèi)進行增菌培養(yǎng)，3～4天后移種。培養(yǎng)基種類和支數(shù)、培育溫度同3.3.1.252667788.cn/rencai/項，共培育8天后判定結果。
3.3.2 血液制品
3.3.2.1 取規(guī)定抽樣數(shù)，按下列規(guī)定，從每瓶抽取樣品，并全部接種完。
樣品每瓶裝量不足1.0ml者，抽取全量，1～20ml以下者（不含20ml)，抽取1.0ml以上，每支裝量為15ml的培養(yǎng)基，接種1.0ml。
樣品每瓶裝量以下者（不含)抽取5.0ml以上,100ml及以上者按15%抽樣，每支裝量為40ml的培養(yǎng)基，接種5.0ml。
應接種的培養(yǎng)基支數(shù)依取樣的總量而定。接種硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基與改良馬丁培養(yǎng)基支數(shù)之比為2:1。
接種后將硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基總支數(shù)的1/2置30～35℃培育，其余置20～25℃培育，改良馬丁培養(yǎng)基置20～25℃培育，培育時間不少于14天。
3.4 薄膜過濾法
濾膜孔徑為0.22～0.3μm。
取規(guī)定抽檢樣品數(shù)，每瓶裝量100ml及100ml以下者取全量，100ml以上者取半量加入滅菌薄膜過濾器內(nèi)，加壓或減壓過濾。如為含汞防腐劑者，在樣品過濾后，應用滅菌生理鹽水或其他適宜溶劑沖洗濾膜3次，每次100ml。過濾后，無菌取出濾膜，分別放入硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基2支及改良馬丁培養(yǎng)基1支（每支裝量不少于40ml，高度不得低于7cm)。如果使用一個過濾裝置，則將該膜剪成三等分，分別放入規(guī)定培養(yǎng)基中。將濾膜放入培養(yǎng)基后，一支硫乙醇酸鹽培養(yǎng)基置30～35℃培育，其余各支培養(yǎng)基置20～25℃培育。培育時間不少于7天。
最好采用全封閉式一次性微孔過濾集菌器，要求每支培養(yǎng)器培養(yǎng)裝量為100ml。
3.5 檢查厭氧性雜菌用培養(yǎng)基需加熱驅氧者，必須冷卻到45℃以下再行接種。
3.6 凍干制品按使用說明書或瓶簽規(guī)定的稀釋量稀釋后進行無菌試驗。
4 判定
4.1 無雜菌生長判為合格（有專門規(guī)定者除外)。
4.2 無菌試驗發(fā)現(xiàn)雜菌生長，可復試。該制品量應加倍。若復試仍有同樣雜菌生長，該制品判為不合格。如為不同雜菌生長，可第二次復試，復試樣品為第一次復試量的2倍，若仍有雜菌生長該制品判為不合格。支原體陽性者不復試，該批制品判為不合格。
4.3 成品無菌試驗不合格的亞批數(shù)占整批的30%以上時，由質(zhì)量檢定部門會同有關部門根據(jù)具體情況，全部或部分廢棄。
