2017年執(zhí)業(yè)藥師藥物分析章節(jié)知識(shí)點(diǎn)（13)
第五章 分光光度法
第一節(jié) 可見紫外分光光度法
掌握可見--紫外分光光度法的基本原理和測(cè)定方法。掌握可見紫外分光光度法在藥物鑒別、檢查和含量測(cè)定中的應(yīng)用。熟悉儀器的校正和檢定方法;紫外吸收光譜與物質(zhì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系。了解紫外分光光度計(jì)的基本結(jié)構(gòu)。
一、基本原理
波長(zhǎng)200～400nm范圍稱為紫外光區(qū)，400～760nm稱為可見光區(qū)。物質(zhì)吸收紫外和可見光區(qū)電磁波而產(chǎn)生的吸收光譜稱為紫外-可見吸收光譜。
1.光源：紫外光區(qū)通常采用氫燈或氘燈，可見光區(qū)采用鎢燈。
2.吸收池：玻璃池適用于370nm以上的可見光區(qū)，石英池適用于紫外、可見光區(qū)，通常僅在紫外光區(qū)使用。
三、紫外吸收光譜與物質(zhì)結(jié)構(gòu)的關(guān)系：紫外可見吸收光譜屬分子吸收光譜，是由分子的外層價(jià)電子躍遷產(chǎn)生的，也稱電子光譜。它與原子光譜的窄吸收帶不同。每種電子能級(jí)的躍遷會(huì)伴隨若干振動(dòng)和轉(zhuǎn)動(dòng)能級(jí)的躍遷，使分子光譜呈現(xiàn)比原子光譜復(fù)雜得多的寬帶吸收。
當(dāng)分子吸收紫外可見區(qū)的輻射后，產(chǎn)生價(jià)電子躍遷。這種躍遷有三種形式：
(1)形成單鍵的σ電子躍遷。(2)形成雙鍵的π電子躍遷。 (3)未成鍵的n電子躍遷。
通常，未成鍵的孤對(duì)電子較易激發(fā)，成鍵電子中π電子較相應(yīng)的σ電子具有較高的能量，反鍵電子則相反。故簡(jiǎn)單分子中n→π* 躍遷需能量最小，吸收帶出現(xiàn)在長(zhǎng)波方向;n→σ*及n→π* 躍遷的吸收帶出現(xiàn)在較短波段;σ→σ*躍遷吸收帶則出現(xiàn)在遠(yuǎn)紫外區(qū)。
例題：物質(zhì)分子吸收紫外光后，電子躍遷的類型為：A. n→σ* B. n→π* C. π→π* D. σ→σ* E .σ→π* 答案ABCD
四、吸收度的測(cè)定方法醫(yī)學(xué)全.在.線.提供. 52667788.cn
1.對(duì)溶劑的要求：能充分溶解樣品，與樣品無相互作用，揮發(fā)性小，在測(cè)定波長(zhǎng)處的吸收要符合要求。
2.空白對(duì)照實(shí)驗(yàn)：將配制溶液用溶劑(空白溶液)裝入?yún)⒈瘸乩�，調(diào)節(jié)儀器，使吸收度為0，去除溶劑和容器吸收、光散射。反射的影響。
3.測(cè)定波長(zhǎng)確證：為提高測(cè)定方法靈敏度，減少測(cè)定誤差，吸收度一般在λmax處測(cè)定。
4.供試品溶液濃度：使吸收度在0.3～0.7范圍內(nèi)。
5.儀器的狹縫寬度：以減少狹縫寬度時(shí)，供試品溶液吸收度不再增加為準(zhǔn)。
五、應(yīng)用
1.鑒別：(1)對(duì)比吸收光譜特征參數(shù)：核對(duì)供試品溶液λmax、 、A是否符合規(guī)定。可同時(shí)用幾個(gè)峰位作為鑒別依據(jù)
(2)比較吸收度比值的一致性：吸收峰較多時(shí)，規(guī)定幾個(gè)波長(zhǎng)處吸收度比值作為鑒定標(biāo)準(zhǔn)
(3)對(duì)比吸收光譜一致性
2.雜質(zhì)檢查
藥物在紫外-可見光區(qū)有明顯吸收，而雜質(zhì)吸收弱;或雜質(zhì)有明顯吸收而藥物無吸收，可通過控制吸收度限度來控制雜質(zhì)量。
3.含量測(cè)定
(1)對(duì)照品比較法：供試品溶液和對(duì)照品溶液濃度及測(cè)定條件應(yīng)盡可能一致
(2)吸收系數(shù)法：需對(duì)儀器進(jìn)行嚴(yán)格校正和檢定
(3)計(jì)算分光光度法：通過數(shù)學(xué)處理消除樣品中干擾組分的干擾
