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免疫球蛋白抗體的提取與純化

 

  【附錄】

  制備單克隆抗體常用的試劑

  1.RPMT-1640培養(yǎng)液 其中含2mmol/L 谷氨酰胺,25 mmol/L Hepes,5×10-5mol/L 2-巰基乙醇2. RPMT-1640完全培養(yǎng)液 上述溶液加10%~20%滅活小牛血

  3.HT母液×100

  次黃嘌呤(H) 1.0×10-2mol/L        136.1mg

  胸腺嘧淀核苷(T) 1.6×10-3mol/L        38.8mg

  蒸餾水                   100ml

  4. A母液×100

  氨基喋呤(A)             4×10-3mol/L 1.76mg

  蒸餾水                   90.0ml

  1mol/LNaOH 0.5ml

  溶解后,加1mol/L HCl 0.5ml,再補(bǔ)加蒸餾水至100ml 。

  5.HAT選擇培養(yǎng)液

  RPMI-1640培養(yǎng)液              80ml

  滅活小牛血清                20ml

  HT母液×100                 1ml

  A母液×100                  1ml

  用5%NaOH調(diào)節(jié) pH至7.4左右。

  6.HT培養(yǎng)液

  RPMI-1640培養(yǎng)液               80ml

  滅活小牛血清                 20ml

  HT母×10                  0 1ml

  用5%NaOH調(diào)節(jié) pH至7.4左右。

  參考文獻(xiàn)

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