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檢驗(yàn)標(biāo)本采集手冊(cè)

檢驗(yàn)標(biāo)本采集手冊(cè):一、病人準(zhǔn)備  1.病人狀態(tài)  一般需在安靜狀態(tài)下采集標(biāo)本,因運(yùn)動(dòng)能影響許多項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果;顒(dòng)的影響可分暫時(shí)和持續(xù)性兩類。暫時(shí)性影響如使血漿脂肪酸含量減少;丙氨酸、乳酸含量增高。持續(xù)性影響,如激烈運(yùn)動(dòng)后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測(cè)定值升高,有些恢復(fù)較慢,如ALT在停止運(yùn)動(dòng)1h后測(cè)定,其值仍可偏高30%~50%。  2.飲食  多數(shù)試驗(yàn)要求在采血前禁食12h,因?yàn)轱嬍持械牟煌煞挚?/i>

一、病人準(zhǔn)備
  1.病人狀態(tài)
  一般需在安靜狀態(tài)下采集標(biāo)本,因運(yùn)動(dòng)能影響許多項(xiàng)目的測(cè)定結(jié)果;顒(dòng)的影響可分暫時(shí)和持續(xù)性兩類。暫時(shí)性影響如使血漿脂肪酸含量減少;丙氨酸、乳酸含量增高。持續(xù)性影響,如激烈運(yùn)動(dòng)后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的測(cè)定值升高,有些恢復(fù)較慢,如ALT在停止運(yùn)動(dòng)1h后測(cè)定,其值仍可偏高30%~50%。
  2.飲食
  多數(shù)試驗(yàn)要求在采血前禁食12h,因?yàn)轱嬍持械牟煌煞挚芍苯佑绊憣?shí)驗(yàn)結(jié)果。
  (1) 餐后血液中ALT、GLU、BNU、Na等均可升高,但空腹達(dá)24h以上,可出現(xiàn)低血糖,血中TG、游離甘油及脂肪酸可增高。
  (2) 高脂餐后2~4h采血,多數(shù)人ALP含量增高,主要來(lái)自腸源性同工酶,且與醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)網(wǎng)血型有密切關(guān)系,O型或B型兼為L(zhǎng)e+分泌型者增高更為明顯。
  (3) 高蛋白質(zhì)餐使血漿尿素、血氨增加,但不影響肌酐含量。
  (4) 高比例不飽脂肪酸食物,可減低膽固醇含量;香蕉、菠蘿、番茄可使尿液5-羥色胺增加數(shù)倍。
  (5) 含咖啡因飲料,可使血漿游離脂肪酸增加,并使腎上腺和腦組織釋放兒茶酚胺。
  (6) 食物如含有動(dòng)物血液,可引起糞隱血假陽(yáng)性。
  (7) 飲酒后使血漿乳酸、尿酸鹽、乙醛、乙酸等增加,長(zhǎng)期飲酒者高密度脂蛋白膽固醇偏高、平均血細(xì)胞體積增加、谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶亦較不飲酒的病人為高,甚至可以將這三項(xiàng)作為嗜酒者的篩選檢查。
  
吸煙:癮大者血液一氧化碳血紅蛋白含量可達(dá)8%,而不吸煙者含量在1%以下。此外,兒茶酚胺、血清可的松亦較不吸煙者為高,血液學(xué)方面亦有變化,白細(xì)胞數(shù)增加、嗜酸粒細(xì)胞減少、中性粒細(xì)胞及單核細(xì)胞增多、血紅蛋白偏高、平均紅細(xì)胞體積偏高。吸煙組血漿硫氰酸鹽濃度明顯高于非吸煙組。
  3.藥物
  藥物對(duì)檢驗(yàn)的影響非常復(fù)雜,在采樣檢查之前,以暫停各種藥物為宜,如某種藥物不可停用,則應(yīng)了解可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的影響。
  4.體位
  體位影響血液循環(huán),由于血液和組織間液因體位不同而平衡改變,則細(xì)胞成分和大分子物質(zhì)的改變較為明顯,例如由臥位改為站位,血漿ALB、TP、酶、Ca、膽紅素、Tch及TG等濃度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于體位的因素,在確立參考值時(shí),應(yīng)考慮門(mén)診和住院病人可能存在的結(jié)果差異,故采集標(biāo)本時(shí)要注意保持正確的體位和保持體位的一致性。
  5.時(shí)間
  病人準(zhǔn)備還應(yīng)考慮病人的生物鐘規(guī)律,特別是激素水平分析,如女性生殖激素與月經(jīng)周期密切相關(guān);膽固醇則在經(jīng)前期最高,排卵時(shí)最低;纖維蛋白原在經(jīng)前期最高,血漿蛋白則在排卵時(shí)減少。生長(zhǎng)激素于入睡后會(huì)出現(xiàn)短時(shí)高峰。膽紅素、血清鐵以清晨最高;血漿蛋白在夜間降低;血Ca往往在中午出現(xiàn)最低值。故采血時(shí)間應(yīng)在相同時(shí)間進(jìn)行。

二、標(biāo)本采集
  標(biāo)本采集是直接關(guān)系檢驗(yàn)結(jié)果的基本要素,如果標(biāo)本采集不當(dāng),即使最好的儀器設(shè)備也難以彌補(bǔ)在采集標(biāo)本時(shí)引入的誤差和錯(cuò)誤。
現(xiàn)將各種標(biāo)本的采集要點(diǎn)分述如下:
  (一) 血液標(biāo)本
  采血管分普通管、抗凝管和促凝管三類。常用抗凝劑有草酸鉀、草酸鈉、枸櫞酸鈉、EDTA-K2或EDTA-Na2、肝素、氟化物等。根據(jù)不同的檢驗(yàn)項(xiàng)目,選用合適的抗凝劑十分重要。
  1.選擇抗凝劑注意事項(xiàng):
(1) 含有K+、Na+的抗凝劑不能用于測(cè)定K+、Na+的標(biāo)本。
(2) EDTA、氟化物、草酸鹽等不能用于測(cè)定Ca2+的標(biāo)本,因?yàn)镃a2+可與它們形成不溶性物質(zhì)。
(3) 草酸鹽、氟化物不能用于測(cè)定酶和用酶法測(cè)定的標(biāo)本,因?yàn)樗鼈冇屑せ罨蛞种颇承┟富钚缘淖饔茫绮菟猁}可抑制AMY、ACP、LDH的活性,氟化物則有激活尿素酶、AMY的作用。
(4) 草酸鉀:鈣離子螯合劑,常用量為1~2mg/ml血液。草酸鉀雖仍可應(yīng)用,但使紅細(xì)胞縮小,水分從紅細(xì)胞滲入血漿,使血漿成分濃度相應(yīng)偏低。
(5) 草酸鉀氟化鈉混合抗凝劑:專供葡萄糖測(cè)定用,氟化鈉1g,草酸鉀3g混合,混合劑4mg抗凝1ml血。
(6) 肝素:是一種粘多糖體,可抑制凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,使纖維蛋白原不能轉(zhuǎn)化為纖維蛋白。以15±2.5IU抗凝血液1ml。肝素抗凝血不影響紅細(xì)胞體積,可用于生化及血液學(xué)檢驗(yàn)標(biāo)本,但不可用于篩選DIC的3P和TT試驗(yàn),因肝素與魚(yú)精蛋白作用,發(fā)生沉淀,使3P出現(xiàn)假陽(yáng)性以及肝素的抗凝血酶作用出現(xiàn)產(chǎn)生干擾。
(7) EDTA:與鈣離子絡(luò)合而抗凝,通常血液學(xué)常規(guī)檢驗(yàn)應(yīng)用其鉀鹽EDTA-K2或EDTA-K3 。EDTA-Li2 亦可作為抗凝劑,且可用于大多數(shù)生化檢驗(yàn)。
(8) 使用抗凝劑要注意血與抗凝劑的比,如血沉取106mmol/L的枸櫞酸鈉0.4ml,抽1.6ml血;凝血機(jī)制取0.2ml,抽1.8ml血;血常規(guī)用EDTA抗凝管抽1.5ml血;血生化用肝素抗凝管抽3ml血等。
   2.標(biāo)本采集注意事項(xiàng):
(1) 末梢采血時(shí),務(wù)必清潔消毒,待干燥后穿刺,用1次性采血器。嬰兒可取自腳后跟兩側(cè)處,一般不取手指,采血中不可用力擠壓,以免組織液混入血液,使血液易于凝固和稀釋,出現(xiàn)誤差。
(2) 采靜脈血時(shí)止血帶結(jié)扎過(guò)久,可引起誤差。如以結(jié)扎1min的樣品結(jié)果為基數(shù),則結(jié)扎3min,可使血漿總蛋白增加5%,膽固醇增加5%,鐵增加6%,膽紅素增加8%,乳酸則不能使用止血帶。
(3) 血清標(biāo)本應(yīng)避免溶血,并及時(shí)分離血清,如需隔日檢驗(yàn),應(yīng)封口后冰箱儲(chǔ)存。
(4) 采血用針頭過(guò)細(xì)會(huì)使血K+升高。
(5) 要特別注意采血不能在輸液的同側(cè)進(jìn)行,更應(yīng)杜絕在輸液管內(nèi)采血,因輸液成分會(huì)影響檢測(cè)結(jié)果(使相應(yīng)的結(jié)果偏高,如輸K+、Glu時(shí),可使所測(cè)K+、Glu明顯增高),或使血液稀釋結(jié)果偏低。
(6) 血?dú)夂蚿H值測(cè)定的血液以動(dòng)脈血為原則,且不可漏氣。細(xì)胞培養(yǎng)的樣品要采用無(wú)菌技術(shù),防止污染。
(7) 標(biāo)本采集后,必須在試管或容器上帖上檢驗(yàn)申請(qǐng)單號(hào)碼、住院病人應(yīng)有床號(hào)、姓名,且應(yīng)當(dāng)場(chǎng)核對(duì)無(wú)誤。

  (二) 尿液標(biāo)本
  根據(jù)采集時(shí)間可分為清晨空腹尿、隨機(jī)尿、計(jì)時(shí)尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、癥狀典型時(shí)尿等。
(1) 晨尿?yàn)樽≡翰∪肆裟虻闹饕椒,早晨起床后收集第一次尿,可用尿常?guī)檢驗(yàn)。
(2) 隨機(jī)尿多為門(mén)診就診病人的留尿檢驗(yàn)方法。
(3) 餐后尿?yàn)槭占M(jìn)餐后2h尿,主要用于了解葡萄糖代謝情況,用以篩查隱性糖尿病或輕癥糖尿病。
(4) 計(jì)時(shí)尿應(yīng)于計(jì)時(shí)開(kāi)始時(shí)排空尿液,然后于規(guī)定時(shí)間內(nèi)至截止時(shí)間留尿,計(jì)時(shí)尿多用于腎功能和有形成分排出率的評(píng)估,亦用于計(jì)算淀粉酶或肌酐的排出率。
(5) 24h尿多用于化學(xué)組分的測(cè)定,亦用于泌尿道抗酸桿菌的檢查。
(6) 尿液原則上以不用防腐劑為好,如需12h或24h尿,首選以冷藏為妥,根據(jù)不同的檢驗(yàn)?zāi)康募佑煤线m的防腐劑,例如加40%甲醛1滴于尿液30ml中,適用于細(xì)胞及管型等有形成分的檢查;激素檢驗(yàn)常以鹽酸10ml作為24h尿的防腐劑或硼酸1g加于尿液100ml,麝香草酚0.1g加于尿100ml供抗酸桿菌濃集檢查。

  (三) 糞便標(biāo)本
  采集后及時(shí)送檢,如作原蟲(chóng)阿米巴檢查應(yīng)保持一定的溫度,且立即送檢,立即檢查,如檢查蟯蟲(chóng)則不必送檢糞樣,而應(yīng)于晨起時(shí)排便前用棉拭擦肛門(mén)周?chē)傻孟x(chóng)卵。糞便標(biāo)本應(yīng)不污染容器外表,一般以無(wú)濾漏容器留取5~10g即可。

  (四) 腦脊液、漿膜腔液、關(guān)節(jié)液
  均由臨床醫(yī)師穿刺采樣,檢驗(yàn)科應(yīng)提供專用的各種試管或容器,及時(shí)送送檢。

  (五) 骨髓
  采樣由臨床醫(yī)師穿刺,抽吸量不得超過(guò)0.2ml,涂片送檢。

  (六) 胃及十二指腸液
  一般均在門(mén)診或病房采集后送檢,收樣時(shí)應(yīng)核對(duì)標(biāo)本。胃液分基礎(chǔ)胃酸分泌(ABO)、最大胃酸分泌(MAO)等,十二指腸液分甲、乙、丙、丁管。甲管來(lái)自總膽管為橙黃色,乙管來(lái)自膽囊為黃綠色,丙管來(lái)自膽道為檸檬色,丁管來(lái)自十二指腸液為灰黃或淡黃色,細(xì)菌培養(yǎng)應(yīng)從乙管取樣接種培養(yǎng)基。

  (七) 痰液標(biāo)本
  采集晨間第一口痰,多用于細(xì)胞學(xué)及微生物學(xué)檢查。采樣前應(yīng)先反復(fù)漱口,經(jīng)深呼吸數(shù)次后用力咳痰,不可吐入唾液。微生物培養(yǎng)取樣應(yīng)在抗生素等藥物治療開(kāi)始之前,如已用藥,則應(yīng)選血液藥物濃度最低水平時(shí)采樣。

  (八) 陰道分泌物
  由婦產(chǎn)科醫(yī)師采樣后即時(shí)送檢,如不能及時(shí)送檢,可在37℃加溫?cái)?shù)分鐘后檢查,否則影響滴蟲(chóng)動(dòng)力,易于漏檢。

  (九) 精液和前列腺液
  采集精液應(yīng)在禁欲3~5天后進(jìn)行,且于排精后30min內(nèi)保溫送達(dá)檢驗(yàn)科,容器以廣口玻璃小好,不可貯存于避孕套或塑料瓶?jī)?nèi),收到標(biāo)本后應(yīng)及時(shí)檢查。前列腺液由醫(yī)師作前列腺按摩術(shù)取樣,收到標(biāo)本后亦應(yīng)立即檢查。

  (十) 其他標(biāo)本
  根據(jù)具體檢驗(yàn)項(xiàng)目而定,臨床醫(yī)師在開(kāi)申請(qǐng)單前,應(yīng)同檢驗(yàn)科相關(guān)部門(mén)聯(lián)系并詢問(wèn)詳細(xì)后,注明檢查要求,再采樣并及時(shí)送檢。

  總之,各種檢驗(yàn)標(biāo)本的采集合適與否,直接關(guān)系檢驗(yàn)質(zhì)量,應(yīng)予以重視。

三、標(biāo)本保存和運(yùn)送
  標(biāo)本保存和運(yùn)送是檢驗(yàn)質(zhì)量保證的重要環(huán)節(jié)之一。由于采集的標(biāo)本受各種因素的影響,可能使檢驗(yàn)結(jié)果受或大或小的誤差,因此必須正確掌握標(biāo)本保存和運(yùn)送。
(1) 采樣后須立即送檢的常規(guī)項(xiàng)目:血氨、血沉、血?dú)夥治、酸性磷酸酶、乳酸以及各種細(xì)菌培養(yǎng),特別是厭氧菌培養(yǎng)。
(2) 采樣后0.5h內(nèi)送檢的常規(guī)項(xiàng)目:血糖、電解質(zhì)、血液細(xì)胞學(xué)、體液細(xì)胞學(xué)、涂片找細(xì)菌、霉菌等。
(3) 采樣后1~2 h內(nèi)送檢的常規(guī)項(xiàng)目:各種蛋白質(zhì)類、色素類、激素類、脂類、酶類、抗原、抗體測(cè)定等。
(4) 采樣后2 h以上才能送檢者,則常對(duì)標(biāo)本采取必要的保存手段。對(duì)血糖或乳酸可直接分離血清后冷凍保存,或用NaF作穩(wěn)定劑2~8℃密封保存;K+ 必須分離血清后密封2~8℃存放;ACP須加穩(wěn)定劑后分離血清冷凍保存;對(duì)其他一般項(xiàng)目,可加蓋密封后直接2~8℃存放,但血沉和細(xì)胞學(xué)檢查不能采用此方法。
(5) 標(biāo)本保存1個(gè)月:一般對(duì)檢測(cè)物分離后,-20℃存放。 標(biāo)本需長(zhǎng)期保存(3個(gè)月以上者):對(duì)檢測(cè)物分離后(包括菌種) -70℃保存,還應(yīng)避免反復(fù)凍融。

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