方法名稱： |
明目地黃丸-丹皮酚測定-高效液相色譜法 |
應(yīng)用范圍： |
本方法采用高效液相色譜法測定明目地黃丸中丹皮酚的含量。 本方法適用于中成藥明目地黃丸。 |
方法原理： |
供試品加硅藻土研細(xì)，加甲醇超聲提取，定容，濾過，用高效液相色譜儀進(jìn)行色譜分離，用紫外吸收檢測器，于波長274nm處檢測丹皮酚的吸收值，計(jì)算其含量。 |
試劑： |
1. 甲醇(色譜純) 2. 丹皮酚對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所，供含量測定用) |
儀器設(shè)備： |
1 儀器 1.1 高效液相色譜儀 1.2 色譜柱：十八烷基硅膠鍵合硅膠為填充劑(LUNA C18 色譜柱，250mm×4.6mm) 1.3紫外吸收檢測器 1.4超聲發(fā)生器 2 色譜條件 2.1流動(dòng)相：甲醇，流速1.0min/ml 2.2檢測波長：274nm 2.3柱溫：室溫 |
試樣制備： |
1. 對(duì)照溶液的制備 精密稱取丹皮酚對(duì)照品12.5mg，置50ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度搖勻；精密吸取2ml置25ml容量瓶，加甲醇到刻度，搖勻即得濃度為20μg/mL的丹皮酚對(duì)照品溶液 2. 供試品溶液的制備 取明目地黃丸適量(大蜜丸、小蜜丸1.5g，水蜜丸1g、濃縮丸1g)，精密稱定，加1.0g硅藻土研細(xì)，置100mL量瓶中，加甲醇超聲提取30min后，冷卻，加甲醇定容，搖勻，濾過，作為供試品溶液。 |
操作步驟： |
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的建立 精密吸取丹皮酚對(duì)照品溶液(20μg/ml)1、4、8、12、20μL，注入液相色譜儀測定，以峰面積Y從縱坐標(biāo)，進(jìn)樣量X為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程Y=8356160X 483850，r=0.9999；線性范圍為0.02～0.4μg。 2.供試品含量測定 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液20μL注入高效液相色譜儀，紫外吸收檢測器，于274nm處測定丹皮酚的吸收值，計(jì)算出其含量。 注：“精密稱取”系指稱取重量應(yīng)準(zhǔn)確至所稱取重量的千分之一�！熬芰咳 毕抵噶咳◇w積的準(zhǔn)確度應(yīng)符合國家標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)該體積移液管的精度要求。 |
參考文獻(xiàn)： |
王勝利，唐春華，HPLC法測定明目地黃丸中丹皮酚，實(shí)用中西藥結(jié)合臨床，2002，2(2)：51 |
