| 公開(公告)號 | CN1289681C |
| 公開(公告)日 | 2006.12.13 |
| 申請(專利)號 | CN03117329.2 |
| 申請日期 | 2003.02.20 |
| 專利名稱 | 乙型肝炎病毒siRNA表達載體的構建以及抗病毒治療應用 |
| 主分類號 | C12N15/86(2006.01)I |
| 分類號 | C12N15/86(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N5/10(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I |
| 分案原申請?zhí)? | |
| 優(yōu)先權 | |
| 申請(專利權)人 | 重慶醫(yī)科大學 |
| 發(fā)明(設計)人 | 黃愛龍;唐 霓;張秉強;閆 歌 |
| 地址 | 400010重慶市渝中區(qū)醫(yī)學院路1號 |
| 頒證日 | |
| 國際申請 | |
| 進入國家日期 | |
| 專利代理機構 | |
| 代理人 | |
| 國省代碼 | 重慶;85 |
| 主權項 | 一種用于構建靶向乙型肝炎病毒的小干擾性RNA分子的表達載體，其特征在于該表達載體含有下述三對序列中的一對： (1)上游序列：5’-TCGAGCTCCAGTTCAGGAACAGTATTCGTACTGTTCCTGAACTGGAGTTTTT-3’ 下游序列：5’-CTAGAAAAACTCCAGTTCAGGAACAGTACGAATACTGTTCCTGAACTGGAGC-3’ (2)上游序列：5’-TCGAGTCACCATACTGCACTCAGGTTCGCCTGAGTGCAGTATGGTGATTTTT-3’ 下游序列：5’-CTAGAAAAATCACCATACTGCACTCAGGCGAACCTGAGTGCAGTATGGTGAC-3’ (3)上游序列：5’-TCGAGGCCAAGTCTGTACAGCATCTTCGGATGCTGTACAGACTTGGCTTTTT-3’ 下游序列：5’-CTAG AAA GCCAAGTCTGTACAGCATCCGAAGATGCTGTACAGACTTGGCC-3’。 |
| 摘要 | 乙型肝炎病毒siRNA表達載體的構建以及抗病毒治療應用，本發(fā)明屬基因工程技術領域。本發(fā)明根據(jù)siRNA的設計原則，分別選擇HBV包膜蛋白(MS)編碼區(qū)69nt-87nt，聚合酶(P)編碼區(qū)708nt-726nt，核心蛋白(C)編碼區(qū)2052nt-2070nt的核苷酸序列，設計相應的siRNA序列，用BLAST軟件進行同源分析證實為HBV高度保守序列后，化學合成單鏈寡核苷酸，體外經(jīng)退火形成雙鏈DNA，與真核表達載體pTZU6+1連接，酶切鑒定和序列測定分析表明成功構建了三種靶向乙型肝炎病毒(HBV)基因序列的siRNA表達載體。上述表達載體通過陽離子脂質(zhì)體介導與HBV真核表達載體pHBV共轉染肝癌細胞HepG2后，采用免疫熒光和Abbott實驗均證實HBV siRNA具有較強抑制病毒復制和表達的作用。 |
| 國際公布 |
