概述
雞新城疫(NewcastleDisease)是由副粘病毒引起的一種高度接觸性傳染病,主要侵害雞和火雞,其他禽類和野禽也能感染,亦可感染人。本病常呈敗血癥經(jīng)過,其特征是呼吸困難,下痢和神經(jīng)癥狀。主要病理變化為粘膜和漿膜出血,腺胃粘膜出血具有診斷意義。
本病于1926年首先發(fā)現(xiàn)于印度尼西亞,同年,發(fā)現(xiàn)于英國新城,經(jīng)Doyle研究證明,本病的病原與雞瘟病原(禽流感病毒)不同,為了有別于雞瘟,即根據(jù)發(fā)現(xiàn)地名而命名,故名新城疫,此后本病迅速向世界各地傳播。
我國首先報道雞新城疫,是1935年發(fā)生在河南,當(dāng)時認(rèn)為是雞瘟流行。梁英、馬聞天等(1946)通過病原分離才證實我國流行的所謂雞瘟是新城疫,以后在四川、上海、廣西都發(fā)現(xiàn)有新城疫流行,50年代本病在全國各地廣泛流行。本病是雞病中危害最嚴(yán)重的一種,死亡率很高,造成較大經(jīng)濟損失,F(xiàn)在我國各地普遍開展免疫接種,免疫監(jiān)測和綜合防制措施,許多省區(qū)雞新城疫已基本得到控制。
最急性新城疫:死亡照片
病原
(1)、病毒的形態(tài)和結(jié)構(gòu)
雞新城疫病毒在分類上是屬于副粘病毒科(Paramyxoviridae)副粘病毒屬(Paramyxovirus)。成熟的病毒粒子近圓形,多數(shù)呈蝌蚪狀,直徑為120~300nm。具有囊膜,內(nèi)含有一長螺旋狀核衣殼,直徑17~18nm,囊膜外有長約8~12nm的糖蛋白(HN和F)纖突。螺旋形核衣殼是由一個與蛋白相聯(lián)結(jié)的單股RNA所形成,具有RNA聚合酶活性,它被一個雙層脂質(zhì)膜所包裹,脂質(zhì)膜內(nèi)襯有一層特殊的M蛋白,而脂質(zhì)膜的外層又被具有纖突的糖蛋白所覆蓋,使外形呈花穗狀。新城疫病毒的基因組包括6組基因,用于編碼6種病毒結(jié)構(gòu)蛋白。有3種與病毒的脂質(zhì)膜有關(guān),即覆蓋在病毒囊膜表面的纖突上的血凝素和神經(jīng)氨酸酶活性的(HN)糖蛋白、融合(F)糖蛋白,以及脂膜內(nèi)的非糖基化內(nèi)膜蛋白(M)。另外3種與基因組RNA有關(guān),它們是核殼蛋白(NP)、磷蛋白(P)、高分子量蛋白(L)。融合糖蛋白F是起病毒與細(xì)胞融合、溶血使其病毒穿過細(xì)胞膜作用。HN和F各有一個前身結(jié)構(gòu)HN0和F0,它們?nèi)狈ι飳W(xué)活性,但可通過蛋白裂解變成HN和F,F(xiàn)蛋白被認(rèn)為是新城疫病毒毒株毒力的主要決定因素。新城疫病毒的HN糖蛋白含有血細(xì)胞凝集和神經(jīng)氨酸酶兩種活性,具有病毒粒子與細(xì)胞受體最初結(jié)合和受體破壞活性,HN特異性抗血清和單抗能抑制融合,證明病毒的吸附是融合的一種前提,這樣病毒的穿透才能發(fā)生。
最急性新城疫:病雞腸道出血,腫脹,外觀可見出血斑
(2)、病毒的培養(yǎng)特性
雞新城疫病毒能適應(yīng)于雞胚,病毒以尿囊腔接種于9~10日齡雞胚,在雞胚能迅速繁殖。雞胚接種病毒后的死亡時間,隨病毒毒力和接種劑量而不同,強毒株一般在28-72h死亡,多數(shù)在36-48h死亡;弱毒株感染雞胚死亡時間可延長至5~6天。死亡的胎兒全身充血或出血;頭部和足趾部出血更為常見。江漢湖等(1987)報道,應(yīng)用新城疫病毒的不同毒株感染雞胚,發(fā)現(xiàn)強毒株接種雞胚后,胚體的血凝價(HA)和尿囊液相同水平,而中等毒力和弱毒株尿囊液HA價都比胚體高,有的弱毒株感染雞胚后,胚體測不出HA價。鵪鶉胚和鵝胚對新城疫病毒也有易感性。新城疫病毒可以在多種細(xì)胞培養(yǎng)上生長繁殖,包括雞胚、猴腎和Hela細(xì)胞。最常用的是雞胚成纖維細(xì)胞,細(xì)胞培養(yǎng)中病毒感染的最初表現(xiàn)為合胞體形成的細(xì)胞致病作用,但細(xì)胞培養(yǎng)物的病毒HA價比雞胚低,有的測不出來。有的毒株在細(xì)胞培養(yǎng)時不出現(xiàn)細(xì)胞致病作用,但具有血吸附作用,可利用它來檢查其病毒在細(xì)胞培養(yǎng)上生長繁殖情況。由于病毒的細(xì)胞致病作用,使感染的細(xì)胞形成空斑,強毒株形成空斑大,低毒力的毒株或弱毒株如果培養(yǎng)中不加入鎂離子和乙二胺四乙酸二鈉(DEAE)則不能顯示出空斑。哈爾濱獸醫(yī)研究所李德山報道(1984),新城疫I系疫苗毒株在雞胚成纖維細(xì)胞上形成大小不等空斑,中等空斑占多數(shù),其毒力較強,小空斑對雛雞毒力弱,因此可以利用空斑技術(shù)來選擇毒力弱而免疫原性好的疫苗株。李一經(jīng)(1990)報道,從黑龍江不同地區(qū)分離7株新城疫強毒,經(jīng)空斑測定出現(xiàn)中、小清亮空斑,中空斑的毒力均大于同源的小空斑,這說明52667788.cn/shouyi/yu/shuichan/病毒株的毒力越強,空斑也越大?瞻哂袩o色和紅色之分,它與病毒毒力無關(guān)。
最急性新城疫:病雞出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,扭頸,呈觀星狀
(3)、病毒對紅細(xì)胞的凝集特性
雞新城疫病毒具有一種血凝素,可與紅細(xì)胞表面受體連結(jié),使紅細(xì)胞凝集。所有新城疫病毒株都有凝集多種動物紅細(xì)胞的作用,但以雞的紅細(xì)胞為最好。豚鼠和人的‘O’型紅細(xì)胞亦能凝集,對牛、羊的紅細(xì)胞凝集不穩(wěn)定,馬和豬的紅細(xì)胞不凝集,但有個別弱毒株可以凝集馬的紅細(xì)胞。新城疫病毒在0.1%福爾馬林的作用下,血凝性明顯減弱,但Lasota弱毒株較為穩(wěn)定。病毒和紅細(xì)胞結(jié)合不是永久性的,經(jīng)過一定的時間,病毒與紅細(xì)胞脫離又懸于液體中,這稱為解脫現(xiàn)象,其原因是病毒表面有一種神經(jīng)氨酸酶,而紅細(xì)胞表面受體含有神經(jīng)氨酸,當(dāng)它被酶破壞后,病毒即與紅細(xì)胞脫離。因此,對新城疫病毒進行血凝試驗時,應(yīng)及時觀察其血凝反應(yīng),否則得不到正確的結(jié)果。隨著病毒株不同,其解脫的時問有差異,一般弱毒株解脫時間快,強毒株解脫較慢。新城疫病毒對紅細(xì)胞的凝集能力,可被抗新城疫血清所抑制,這種抑制作用具有特異性,因此可利用它進行病毒鑒定,診斷,與真性雞瘟(禽流感)類別診斷,還可用以測定疫苗的免疫效果,進行流行病學(xué)調(diào)查。
禽流感病毒也能凝集多種動物的紅細(xì)胞,由于它凝集動物的紅細(xì)胞范圍更為廣泛,據(jù)中國獸藥監(jiān)察所以甲系新城疫病毒與千葉系禽流感病毒的比較結(jié)果,可以看出凝集紅細(xì)胞的動物種類有明顯的差別。
最急性新城疫:病雞從口腔流出酸臭粘液
(4)、新城疫病毒的抗原性和毒力
根據(jù)我國各地分離病毒株進行病毒交互免疫試驗和中和試驗,未發(fā)現(xiàn)有不同血清型。但是從交叉血凝抑制試驗和雞胚中和試驗,證明不同地區(qū)病毒的抗原性是有差異的。據(jù)劉立人和中國獸藥監(jiān)察所報道,對國內(nèi)不同地區(qū)分離到15株強毒株,進行毒力比較,其毒力存在很大的差異,它隨宿主與外界條件之間的相互關(guān)系而發(fā)生改變,如在易感雞群中流行時,可使毒力增強,在具有不同程度免疫力的雞群中流行時,毒力有所減弱,出現(xiàn)有的毒株只能使雛雞發(fā)病,有的毒株對雛雞也不能引起嚴(yán)重癥狀或不致病,這樣可從雛雞中分離到自然弱毒株。新城疫病毒的毒力測定很難通過血清學(xué)的方法如紅細(xì)胞凝集試驗、血凝抑制試驗、流行病學(xué)、癥狀和病理變化來判定,它區(qū)分的標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)國際通用的:1.最小致死量病毒致死雞胚的平均時間(MDT);2.1日齡雛雞腦內(nèi)注射的致病指數(shù)(ICPI);3.6周齡雞靜脈注射的致病指數(shù)(IVPI);4.病毒凝集紅細(xì)胞后解脫速率;5.病毒血凝素對熱穩(wěn)定性。
按照上述標(biāo)準(zhǔn)可將新城疫病毒的毒力大小分為3大類:(1)低毒力株(弱毒株)Lentogenic;(2)中等毒力株Mesogenic;(3)強毒力株Velogenic。
最急性新城疫:病雞腹部脂肪出現(xiàn)細(xì)小的出血點
(5)、病毒在雞體內(nèi)分布
雞新城疫病毒存在于病雞的所有組織和器官內(nèi),包括病雞的血液,病雞的分泌物和排泄物均含有病毒,以腦、肺、脾含毒量最多,骨髓里病毒維持時間最長。因此分離病毒時多采用病雞的肺、脾和腦作為接種材料。
(6)、病毒的理化特性
雞新城疫病毒對熱的抵抗力較其他病毒強,一般在60℃經(jīng)30min,55℃經(jīng)45min即死亡。在37℃可存活7~9天,在-20℃經(jīng)幾個月,在-70℃經(jīng)幾年感染力不受影響。在新城疫暴發(fā)后經(jīng)2~8周,仍能從雞舍污染物、蛋殼、羽毛中分離到病毒。病毒對pH較穩(wěn)定,在pH2~12的環(huán)境下,作用1h時不受影響。病毒對化學(xué)消毒劑的抵抗力不強,一般常用的消毒劑,如苛性鈉、福爾馬林、5%漂白粉、抗毒威等在5~20min內(nèi)即可將病毒滅活。青霉素、鏈霉素和0.02%硫柳汞對新城疫病毒沒有作用,一般常用它作為病毒分離和制造疫苗時以防止細(xì)菌污染。
最急性新城疫:病雞喉頭和氣管粘膜充血、出血
流行病學(xué)
雞、火雞及野雞對本病都有易感性,其中以雞最易感,其次是野雞。不同品種的雞和年齡對本病的感受性也有差異,來航雞及雜種雞比本地雞感受性高,幼雛和中雛的感受性比老齡雞高,死亡率也高,而且在自然感染中,雛雞多表現(xiàn)為急性型。除雞外其他禽類和鳥類也能感染,火雞和珍珠雞易感性比雞低。動物園里野禽如孔雀、燕八哥、鸚鵡、烏鴉、鵪鶉等都能分離到新城疫病毒,在我國動物園里有孔雀自然感染本病的病例。據(jù)周永連報道(1990),在貴州發(fā)現(xiàn)越冬的黑頸鶴和灰鶴暴發(fā)新城疫,從病死鶴的肝、脾和腦分離到新城疫強毒株,回歸雞與自然病例相似,近幾年來,我國飼養(yǎng)的肉鴿、信鴿和鵪鶉中有流行新城疫的報道,據(jù)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)報道(1983),以新城疫病毒的強毒株人工感染不同日齡的鵪鶉,結(jié)果幼齡鵪鶉對新城疫病毒很敏感,感染后72h死亡,成年鵪鶉耐受性較強,感染后在成年鵪鶉的血清中可測出新城疫血凝抑制抗體。水禽不能自然感染,但可從鴨、鵝、天鵝中分離到病毒,據(jù)國內(nèi)報道從外觀健康的家鴨泄殖腔內(nèi),分離到低毒力、中等毒力和強毒力株的新城疫病毒。同時鴨的卵黃和血清中,亦能檢出新城疫抗體。從麻雀體內(nèi)亦可分離出新城疫病毒和檢出抗體,在新城疫流行的雞場內(nèi),從1只麻雀的呼吸道和泄殖腔分離到1株新城疫病毒,經(jīng)生物學(xué)鑒定,證明是強毒株。哺乳動物對本病有抵抗力,人類常因接觸病雞和弱毒疫苗而被感染,主要是引起眼結(jié)膜炎。據(jù)報道,一個實驗室工作人員在收獲雞胚時,因新城疫病毒濺人眼內(nèi)而引起感染,24h內(nèi)出現(xiàn)眼結(jié)膜炎。在職業(yè)人群中,采用ELISA和HI的方法,在血清中均能檢出陽性。從上述易感性來看,新城疫病毒適應(yīng)的宿主譜較廣,特別是水禽和飛鳥,雖然還沒有發(fā)現(xiàn)自然感染病例,但是這些禽類可以排毒,也是一種威脅,所以對雞新城疫病毒的生態(tài)學(xué)方面應(yīng)引起關(guān)注。
雞新城疫的主要傳染來源是病雞和帶毒雞,受感染雞在癥狀出現(xiàn)前24h,其分泌物和排泄物中發(fā)現(xiàn)有新城疫病毒。潛伏期的病雞所生的蛋,也含有病毒。如果蛋內(nèi)含有病毒時,在孵化過程中可致死雞胚,死亡雞胚中病毒能存活數(shù)天。痊愈雞帶毒和排毒的情況則不一致,多數(shù)在癥狀消失后5~7天就停止排毒。在流行停止后的帶毒雞常呈慢性經(jīng)過,一般癥狀消失,但仍遺留有神經(jīng)癥狀的病雞,保留這些慢性病雞,是造成本病繼續(xù)流行的原因。本病傳播途徑主要是呼吸道和消化道,雞感染后2天或出現(xiàn)癥狀前1天,開始將病毒釋放出呼吸道散布在空氣中,持續(xù)幾天,當(dāng)健康雞吸入病毒后發(fā)生感染。本病傳染也可通過病雞和健康雞的直接接觸,在自然感染情況下,與病雞同群的有感受性的雞,很少能幸免感染。其次通過帶毒雞的遷移,肉蛋品的運輸以及屠宰的下腳料如羽毛、蛋殼、血、內(nèi)臟、消化道的內(nèi)容物、病雞排泄物等污染飼料和飲水、用具等都可傳播本病,如果不加妥善處理和嚴(yán)格消毒,在短時間內(nèi)即放入健康雞是極為危險的。病毒也可以通過損傷的皮膚和粘膜進入機體,還可以通過活媒介物傳播,如蚊叮咬,飼養(yǎng)員和獸醫(yī)人員串圈而傳播。野鳥在傳播本病中有一定意義,以人工感染雞新城疫的麻雀和鴿的糞便喂健康雞,可引起發(fā)病死亡,證明帶毒的麻雀和鴿能成為本病的傳播者。
近年來,在我國屢有發(fā)現(xiàn)免疫雞群仍發(fā)生新城疫的流行,其主要特征以呼吸道和神經(jīng)系統(tǒng)癥狀為主,而典型的新城疫病理變化,如腺胃粘膜出血,腸粘膜出血,盲腸扁桃體壞死等卻少見,往往須經(jīng)實驗室診斷才能確診為新城疫。發(fā)病率和死亡率波動較大,據(jù)內(nèi)蒙古農(nóng)牧學(xué)院調(diào)查4個雞群最高發(fā)病率為85%,最低為15%;病死率高者可達(dá)80%,最低為15%,從調(diào)查中發(fā)現(xiàn)免疫雞群發(fā)生新城疫的因素很多,其主要原因是疫苗接種時母源抗體過高;疫苗質(zhì)量和保存不當(dāng);免疫接種的程序不合理;其他疫病的干擾以及新城疫強毒株毒力不同,因而造成雞群免疫狀態(tài)的差異,低抗體水平的免疫雞不能抵抗強毒的侵襲,引起本病的傳播。
本病一年四季均可發(fā)生,但以春、秋兩季較多,這取決于不同季節(jié)中新雞的數(shù)量,雞只流動情況和適于病毒存活及傳播的外界條件,例如雞舍通風(fēng)不良,長期保持有較高濃度的氨氣,使雞群抵抗力下降,當(dāng)有新城疫強毒株存在時而發(fā)生本病的流行。此外,當(dāng)前引種渠道很多,購人貌似健康帶毒雞,并將其合群飼養(yǎng);就形成大量傳染源的散布。如果宰殺病雞或帶毒雞的血水、羽毛、污水、內(nèi)臟及污染的環(huán)境不經(jīng)妥善處理,也是造成本病流行的常見因素。易感雞群遭受新城疫強毒株侵害時,可迅速傳播,呈毀滅性流行,發(fā)病率和死亡率可高達(dá)90%以上。
雞新城疫在一個雞群流行時,往往在開始病死雞不多,表面上還是平靜的,實際上此時病毒已在全群中傳播,多數(shù)雞處于潛伏期中。以后的4~6天內(nèi),發(fā)病率呈直線上升,病死率也呈直線上升,且多表現(xiàn)為急性型。當(dāng)一個雞群流行疫病時,死亡數(shù)每天呈直線上升,一天死亡達(dá)數(shù)百只,應(yīng)首先懷疑為新城疫。雞買賣活動頻繁,在收購大批雞中很可能接觸到病雞,并且運輸工具也常成為病毒的攜帶者。
最急性新城疫:病雞拉稀黃綠便
臨床癥狀
潛伏期長短,與病毒毒力侵入雞體內(nèi)的病毒量以及個體的抵抗力有關(guān),人工感染為2~5天,自然感染時潛伏期一般為3~5天,毒力弱的可延至20天。根據(jù)臨診表現(xiàn)和病程長短,病雞的癥狀可分為最急性、急性、亞急性或慢性三種類型。
最急性型此型多見于流行初期,突然發(fā)病,常無特征性癥狀而突然死亡,雛雞和中雛為多見。
急性型在發(fā)病初期體溫升高,一般可達(dá)43~44"C,病雞精神沉郁,食欲減退或消失,渴欲增加。病雞不喜走動,獨棲一隅,羽毛松亂無光澤,垂頭縮頸,翅膀下垂,冠和肉髯發(fā)紺,眼半閉或全閉,似昏睡狀態(tài)。產(chǎn)蛋母雞出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降或停止,而且軟殼蛋增多,蛋殼顏色變淺(褐色蛋)。隨著病程延長,病雞出現(xiàn)咳嗽,呼吸困難,吸氣時常伸展頭頸作開口呼吸,時常發(fā)出‘咯咯’的叫聲。
嗉囊滿脹,內(nèi)充滿多量酸臭液體及氣體,將病雞倒提起,酸臭液體即從VI中流出?谇缓捅乔环置谖镌龆,病雞為了排出其中的粘液,時時搖頭和頻頻吞咽。病雞常出現(xiàn)下痢,排出黃白色或黃綠色的稀糞,有時混有少量血液。
有的病雞出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,如兩腿麻痹,站立不穩(wěn),共濟失調(diào)或作圓圈運動,頭頸向后仰翻,或向下扭轉(zhuǎn),有時置于背部上。最后體溫下降,不久在昏迷中死亡,1月齡雞病程較短,成年雞病程長些,病死率都很高。
亞急性或慢性型初期癥狀與急性相似,不久后癥狀漸見減輕,同時出現(xiàn)神經(jīng)癥狀。病雞翅膀和腿麻痹,表現(xiàn)跛行或站立不穩(wěn),頭頸向后或向一側(cè)扭曲。有的病雞貌視正常,但受到驚動時,突然伏地旋轉(zhuǎn),動作失調(diào),反復(fù)發(fā)作,終于癱瘓或半癱瘓。有的病雞因吃食受到影響漸漸消瘦,終歸死亡。此型多發(fā)生于流行后期的成年雞,病死率較低。
近幾年來,在免疫雞群中發(fā)生新城疫,往往表現(xiàn)亞臨床癥狀或非典型,發(fā)病率較低,一般在10%~30%,病死率也低,一般在15%~45%。主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀和神經(jīng)系統(tǒng)障礙,當(dāng)呼吸系統(tǒng)癥狀減輕時,亦趨向于康復(fù),少數(shù)病雞遺留頭頸扭曲。產(chǎn)蛋雞(周齡大的)感染新城疫,主要出現(xiàn)產(chǎn)蛋下降,還伴有呼吸道癥狀,病死率很低。
最急性新城疫:病雞腺胃乳頭出血
病理變化
雞新城疫主要病理變化表現(xiàn)為全身敗血癥,以呼吸道和消化道最為嚴(yán)重?谇缓脱屎砀秸骋,咽部粘膜充血,偶有出血。嗉囊壁水腫或附著一層象米糠樣滲出物,嗉囊內(nèi)充滿酸臭液體及氣體。腺胃粘膜乳頭的尖端或分散在粘膜上有出血點,特別在腺胃和肌胃交界處出血更為明顯。腺胃粘膜腫脹,肌胃角質(zhì)層下有出血斑,有時形成粟粒狀不規(guī)則的潰瘍。
小腸前段出血明顯,尤其是十二指腸粘膜和漿膜出血。盲腸扁桃體腫大、出血和壞死,這種壞死呈島嶼狀隆起于粘膜表面。在慢性或非典型病例,直腸粘膜的皺褶呈條狀出血,有的在直腸粘膜上可見黃色纖維素性壞死點。
呼吸道病變見于鼻腔及喉充滿污濁的粘液和粘膜充血,偶有出血。氣管內(nèi)積有多量粘液,氣管環(huán)出血明顯,支氣管和肺沒有見到明顯肉眼變化,有時可見肺瘀血或水腫。心冠和腹部脂肪見有出血。
產(chǎn)蛋母雞的卵泡和輸卵管顯著充血,卵泡膜極易破裂以致卵黃流入腹腔引起卵黃腹膜炎,肝、脾無特殊病變,腎多表現(xiàn)充血及水腫,輸尿管內(nèi)積有大量尿酸鹽。腦膜充血或出血.而腦實質(zhì)無眼觀變化,僅于組織學(xué)檢查時,見有明顯的非化膿性腦炎病變。
病理變化與雞群免疫狀態(tài)有關(guān),有部分免疫力雞的癥狀、死亡率和病理變化與易感雞感染新城疫病毒有顯著不同。用新城疫強毒株感染易感雞時,可發(fā)生典型新城疫癥狀和病變,腺胃乳頭和粘膜出血明顯,肌胃有出血和潰瘍,腸道粘膜和漿膜有明顯出血,盲腸扁桃體出血和潰瘍,而且死亡率很高。而有部分免疫力的雞感染后,出現(xiàn)輕微臨診癥狀,主要表現(xiàn)為呼吸系統(tǒng)和神經(jīng)癥狀,腺胃出血不明顯,病變檢出率低,往往以非典型出現(xiàn)。據(jù)國內(nèi)報道,非典型新城疫的病例中,以直腸粘膜和盲腸扁桃體出血的比例增多,腸道粘膜和漿膜出血也比典型新城疫少。因此,在一個雞場發(fā)生疫情時,懷疑為非典型新城疫時,盡可能多解剖幾例病死雞,總會發(fā)現(xiàn)有腺胃乳頭和粘膜少量出血點,可作綜合診斷的補充。
本病組織學(xué)檢查時,在病雞不同器官中可見充血、水腫和出血等病變,有的還發(fā)現(xiàn)壞死變性。如用新城疫病毒以氣霧法感染雞時,在感染后4~5天,經(jīng)組織學(xué)檢查,發(fā)現(xiàn)消化道粘膜明顯充血、水腫和細(xì)胞浸潤,這種細(xì)胞以淋巴細(xì)胞為主,而且充滿粘膜層。氣囊由于結(jié)締組織增生,可見有水腫、細(xì)胞浸潤及密度增加。神經(jīng)系統(tǒng)組織學(xué)檢查見有明顯的急性非化膿性腦炎病變。腦血管呈局灶性充血,小靜脈中有血栓形成,血管周圍有淋巴細(xì)胞和膠質(zhì)細(xì)胞集聚,形成血管套。在血管和膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)特別明顯的地方,可見神經(jīng)節(jié)細(xì)胞發(fā)生營養(yǎng)不良性的變化和壞死,如尼氏小體溶解,細(xì)胞體腫大或萎縮,細(xì)胞核的移位或消失,神經(jīng)細(xì)胞消失等。在感染新城疫的病雞,神經(jīng)膠質(zhì)有病灶,神經(jīng)元變性和血管周圍淋巴細(xì)胞浸潤以及內(nèi)皮細(xì)胞肥大,此病變遍布于神經(jīng)索、延髓、中腦和小腦。延髓的病變應(yīng)與雞腦脊髓炎相區(qū)別,在雞腦脊髓炎中可見延髓神經(jīng)元的中央染色質(zhì)溶解,這種現(xiàn)象在新城疫卻很少見。
最急性新城疫:病雞腺胃乳頭出血,腺胃表面有大量粘液
診斷鑒別
典型的新城疫可根據(jù)流行病學(xué)資料,癥狀和具有特征性的病理變化可作出初步診斷,但是有的雞群有部分免疫力或感染新城疫病毒的毒力不是太強,往往缺乏典型新城疫的癥狀和病理變化,因此尚須進行病原學(xué)和血清學(xué)診斷,其診斷程序有下面幾種。
(一)流行病學(xué)和臨診癥狀的診斷
本病對雞特別易感,流行特點是具有高度接觸傳染性,易感雞的發(fā)病率和病死率都很高,達(dá)90%以上。自然感染僅見雞和火雞,鴨、鵝和野禽有抵抗力,但可帶毒。非典型新城疫多發(fā)生在免疫雞群,以二免前后雞發(fā)病最多,發(fā)病率和死亡率低于典型新城疫。具有特征性癥狀,見病雞體溫升高,嗉囊滿脹內(nèi)積有多量酸臭液體,呼吸困難,并有‘咯咯’叫聲,翅和腿麻痹,病程長者有神經(jīng)癥狀,頭頸向一側(cè)或向后扭曲。產(chǎn)蛋母雞感染新城疫時,主要表現(xiàn)為產(chǎn)蛋量急劇下降,幾天內(nèi)由80%降到40%~45%,軟殼蛋明顯增多,死亡很少,僅見有拉稀。產(chǎn)蛋恢復(fù)到正常時間不一,短者2~3周,長者2個月。
(二)病理學(xué)診斷
本病病理變化主要特征為各器官粘膜充血和出血,腸道粘膜和漿膜以及腹部脂肪明顯出血,腺胃乳頭和粘膜出血,盲腸扁桃體出血和潰瘍,這一病變具有診斷意義。非典型新城疫多見不到這些典型的病理變化,只要多剖檢一些病死雞,可能見到雞新城疫固有病變,直腸段粘膜出血和盲腸扁桃體出血比例增多,因此一定要結(jié)合實驗室工作才能獲得確診。
最急性新城疫:泄殖腔充血,出血
(三)實驗室診斷
根據(jù)流行病學(xué)、癥狀和病理變化還不能確診時,必須依賴實驗診斷,如果條件許可,取病死雞的病料分別接種易感雞和免疫雞,若免疫雞不死而易感雞死亡時,便可確定為雞新城疫。若免疫雞和易感雞都死亡,細(xì)菌檢查又是陰性,可排除新城疫,可能是其他病毒性傳染病。但診斷雞新城疫最可靠的方法是進行病毒分離和鑒定。
1.病毒的分離雞出現(xiàn)癥狀后,大多數(shù)器官和分泌物含有多量的病毒,作為分離病毒的材料最好選發(fā)病初期的病雞脾、肺和腦,病料要求新鮮。發(fā)病中、后期取腦或骨髓作分離病毒的材料,如果死雞已腐敗,最好是從骨髓分離。一定要做到無菌手術(shù)取病料,將病料置于消毒的勻漿器內(nèi),研磨成乳劑,加入滅菌生理鹽水做成10倍稀釋成懸浮液,靜置或離心后取上清液,按每毫升加入青霉素和鏈霉素各500單位,置37℃溫箱作用30~60rain。以上清液0.1ml接種于9~10日齡雞胚尿囊腔內(nèi)。接種后的雞胚放在37℃溫箱內(nèi)繼續(xù)孵育,并每天檢查雞胚一次。若為強毒株,在接種后48~72h即可致死雞胚;若為弱毒株,3~6天致死雞胚。死亡的雞胚收獲尿囊液,作細(xì)菌檢查,將收集的雞胚尿囊液供作病毒鑒定。由雞新城疫病毒致死的雞胚,胚體全身充血、出血,以頭、翅和趾部尤為明顯。病毒分離是很重要的,除對發(fā)病雞場作出最后確診外,還可以對新分離的病毒進行生物學(xué)特性測定,以確定其病毒的毒力。
上述病料還可以接種到雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)上,若是新城疫病毒,在感染細(xì)胞呈融合性病變,此時紅細(xì)胞凝集反應(yīng)陽性。
病料也可以接種于體重1000g的易感雞,每雞皮下注射0.5ml。若是新城疫病毒的強毒株,在接種后3天出現(xiàn)癥狀,試驗雞精神萎頓,嗦囊脹滿積液,排出黃白色稀糞,第4~5天死亡,剖解見腺胃乳頭有出血點,腸道粘膜出血。并且還可從病死雞分泌物和實質(zhì)器管中回收到病毒。
2.病毒的鑒定前面已提到,新城疫病毒具有凝集禽類和某些哺乳動物的紅細(xì)胞的特性,所以病毒分離出來后,還須作紅細(xì)胞凝集試驗(HA),但僅憑HA還不能確定為新城疫病毒,象禽流感病毒、禽腺病毒都能凝集禽類紅細(xì)胞。于是首先檢查所分離到病毒是否有血凝特性,若出現(xiàn)HA者,必須與已知抗雞新城疫病毒的血清進行血凝抑制試驗(HI),如果所分離到病毒能被這種特異性抗體所抑制,才能最后證明該病毒是新城疫病毒。雞新城疫病毒HI方法有多種,如全量法即試管法;B-微量法;全血平板法等。HI除作為病毒鑒定外,還可利用雞新城疫病毒來鑒定感染雞群的血清中是否有抑制紅細(xì)胞凝集的抗體,如果可疑病雞的血清能抑制新城疫病毒對紅細(xì)胞的凝集,即可判定該雞患新城疫。感染雞群中出現(xiàn)HI抗體,病程在10~15天,HI抗體的效價可達(dá)1:1280。現(xiàn)在可利用HI測定,以比較雞群發(fā)病前后HI抗體效價的變化,就可以認(rèn)為該雞群是否有新城疫感染。如果一個雞群在發(fā)病前HI抗體平均值為5~61og2,半個月后采血測定HI效價平均值為9~l0log2,就可證明該群雞已感染了新城疫強毒。由此可見,HI的測定在流行病學(xué)調(diào)查和判定是否新城疫有實用價值。但還應(yīng)該注意的是,HI檢測可確定疫苗免疫的效果,或可提供免疫計劃的依據(jù)。
3.血清中和試驗既可用已知抗雞新城疫病毒的血清來鑒定可疑病毒,又可用已知的新城疫病毒來測定雞血清中是否含有特異性抗體,以確定雞群是否感染過雞新城疫。中和試驗可在雞胚或細(xì)胞培養(yǎng)以及易感雞中進行。其方法是,在雞新城疫免疫血清(或待檢血清)中,加入一定量的待檢病毒(或已知病毒),兩者混合均勻后,注射9~10日齡雞胚(非免疫雞所生的蛋),或雞胚成纖維細(xì)胞,或者有易感性的雞,并設(shè)立不加血清的病毒對照。結(jié)果注射血清和病毒混合材料的雞胚或雞不死亡;雞胚成纖維細(xì)胞無病變,而對照組死亡或細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)病變,則可肯定待檢病毒是新城疫病毒。
4.熒光抗體技術(shù)本方法是將一類熒光性染料結(jié)合于抗體免疫球蛋白上,成為熒光性染料標(biāo)記抗體。當(dāng)此標(biāo)記抗體與相應(yīng)的抗原相遇,可發(fā)生免疫特異性結(jié)合,標(biāo)記在抗體上的熒光染料也被帶到抗原一抗體復(fù)合體上。此種復(fù)合體在紫外線照射下,被激發(fā)產(chǎn)生光亮的熒光(黃綠色、紅色或藍(lán)色),可以在熒光顯微鏡下看到。這種免疫熒光法對雞新城疫病毒檢查具有高度特異性和敏感性,而且其有快速的優(yōu)點。作為熒光技術(shù)檢查的材料以脾為首選,也可采肺和肝,按常規(guī)方法用冷凍切片制成標(biāo)本,然后將新城疫熒光抗體稀釋成一定工作濃度,滴加入經(jīng)固定的切片標(biāo)本上,在37℃染色30min,取出立即用PBS(pH8.0)反復(fù)洗3次,然后滴加0.1%伊文思藍(lán),作用2~3s后,再用PBS沖洗;然后用9:1緩沖甘油封固,鏡檢。在熒光顯微鏡見熒光者為雞新城疫病毒所在部位。
5.酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)此方法能夠檢驗雞新城疫病毒在細(xì)胞培養(yǎng)中生長情況,如有新城疫病毒生長,在細(xì)胞核邊緣可見到明顯棕褐色酶染斑點,未接種新城疫病毒的細(xì)胞或新城疫病毒不能在細(xì)胞培養(yǎng)中生長,則完全看不到酶染斑點。它能直接檢出病雞或帶毒雞的泄殖腔和El腔中新城疫病毒。此方法比HA和HI、免疫熒光技術(shù)等更加敏感,特異性更強,是快速而準(zhǔn)確的診斷方法。目前辣根過氧化物酶標(biāo)記羊抗兔結(jié)合物已有商品出售,應(yīng)用比較方便,不要熒光顯微鏡。為了提高ELISA的敏感性和特異性,又發(fā)展雙夾心ELISA,斑點-ELISA法用于新城疫診斷。
6.應(yīng)用單克隆技術(shù)診斷新城疫應(yīng)用淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)成功地建立了能分泌對雞新城疫病毒特異的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,據(jù)江蘇農(nóng)學(xué)院報道已建立有NDV—HY—23、NDV—HY—33、FNl、FN7等細(xì)胞株,用單克隆抗體對人工感染和自然病例進行免疫熒光檢查,選用腦、肺、脾和盲腸扁桃體檢出率較高。它不僅可用于新城疫的診斷,而且司以進行新城疫部分毒株的毒力定型。
最急性新城疫:產(chǎn)蛋雞患最急性雞新城疫出現(xiàn)卵泡變形、血腫和破裂
(四)鑒別診斷
雞新城疫在發(fā)病初期癥狀不典型,主要表現(xiàn)為呼吸道癥狀,這樣很可能與呼吸道傳染病如傳染性支氣管炎、傳染性喉氣管炎相混淆。有的呈現(xiàn)敗血癥很容易與禽霍亂相混淆。就新城疫癥狀和病理變化與真性雞瘟很類似應(yīng)注意區(qū)別。
1.與禽霍亂的區(qū)別禽霍亂可侵害各種家禽,鴨最易感染,呈急性敗血癥經(jīng)過時,病程短,病死率高。慢性病例有關(guān)節(jié)腫大,但無神經(jīng)癥狀,剖檢時見全身出血,肝有小點壞死,肝組織作觸片見有兩極著色的巴氏桿菌。雞新城疫在自然條件下不引起鴨發(fā)病,病程比急性禽霍亂長,但常常出現(xiàn)神經(jīng)癥狀,剖檢時肝沒有灰白色小點壞死,腺胃粘膜出血,肝組織觸片鏡檢未見細(xì)菌。
2.與傳染性喉氣管炎的區(qū)別該病傳播很快,發(fā)病率較高,死亡率低。它主要癥狀是呼吸困難,咳嗽,喉頭水腫、充血和出血,有時在喉頭附著一層黃白色假膜,消化道沒有變化,無神經(jīng)癥狀,上述這些特征可以與新城疫相區(qū)別。
3.與真性雞瘟的區(qū)別真性雞瘟與新城疫區(qū)別較為困難。根據(jù)人工感染觀察,此病的潛伏期和病程都比新城疫短,一般為18~24h,病程由10幾小時至1天,沒有顯著的呼吸困難,嗉囊內(nèi)沒有大量積液,無神經(jīng)癥狀。頭部常有水腫,眼瞼、肉髯腫脹。剖檢時常見皮下水腫和黃色膠樣浸潤。粘膜、漿膜和脂肪組織出血較新城疫更為明顯和廣泛,腸粘膜常不形成潰瘍。但確切區(qū)別還須通過病毒分離和血清學(xué)試驗等實驗室檢查。
近幾年我國有報道,當(dāng)一個雞場發(fā)生新城疫流行時,還發(fā)現(xiàn)兩種傳染病并發(fā)或繼發(fā),如傳染性法氏囊病繼發(fā)新城疫,新城疫和雞支原體病混合感染等,這樣不但病死率提高了,而且給診斷帶來一定的難度,務(wù)必加強實驗室診斷工作。
最急性新城疫:腸道出血點
最急性新城疫:腸道密集的小出血點
防治措施
雞新城疫防制,需要采取綜合防制措施,即杜絕傳染源,開展經(jīng)常性消毒,加強檢疫,定期對健康雞免疫接種,建立免疫監(jiān)測等。
(一)平時的衛(wèi)生防疫措施
對養(yǎng)雞業(yè)來說,預(yù)防本病的發(fā)生,重點做好平時的防疫工作,對集約化養(yǎng)雞更是如此,其措施有:
1.杜絕病原侵入雞群控制和消滅新城疫流行,最根本措施是杜絕新城疫病毒侵入易感雞群,這就需要有嚴(yán)格的衛(wèi)生防疫制度,防止帶毒雞(包括鳥類)和污染物品進入雞群,進出雞場的人員和車輛必須經(jīng)過消毒,飼料來源要安全,嚴(yán)禁從疫區(qū)引進種蛋和雛雞。新購進的雞需經(jīng)檢疫,并嚴(yán)格隔離飼養(yǎng)2周以上,再經(jīng)新城疫疫苗免疫接種后,證明健康者,方可與原有雞合群飼養(yǎng),隨時觀察雞群的健康情況,發(fā)現(xiàn)有可疑病雞,立即隔離,并采取緊急措施。為了杜絕傳染源傳入,有條件的雞場盡可能做到自繁自養(yǎng),種雞場、孵化廳、育雛、育成和生產(chǎn)雞群須分區(qū)域飼養(yǎng),加強種雞群疫病的監(jiān)測。
2.嚴(yán)格執(zhí)行消毒措施消毒是防止新城疫傳播的一項重要措施,其目的是切斷病原的傳播途徑,特別是大型養(yǎng)雞場,應(yīng)該有完善的消毒設(shè)施,雞場進出口應(yīng)設(shè)消毒池。飼養(yǎng)員和工作人員進入飼養(yǎng)區(qū)要經(jīng)消毒后,更換工作服和鞋靴方可進入,進入場區(qū)的車輛和用具也要經(jīng)消毒,應(yīng)該形成一個制度,做到臨時性和定期消毒相結(jié)合。
肉用雞場可以采用全進全出的飼養(yǎng)法,在進雞前對雞舍進行1~2次嚴(yán)格消毒,待全群雞出售完畢再進行1~2次雞舍清潔和徹底消毒,這樣可避免雞群疾病的傳播機會,但平時對雞舍周圍環(huán)境也應(yīng)定期進行消毒。
3.合理做好雞群預(yù)防接種免疫接種是增強雞群的特異免疫力,使雞群保持堅強的免疫狀態(tài),抵抗新城疫病毒的感染,因此給雞群合理進行疫苗接種,是防制雞新城疫關(guān)鍵措施之一。做好免疫接種應(yīng)根據(jù)當(dāng)?shù)匾卟×餍星闆r,雞場衛(wèi)生防疫制度嚴(yán)密與否,飼養(yǎng)類型,雞的種類(肉雞或蛋雞),雛雞母源抗體效價的高低以及前次免疫的HI抗體情況等,來確定采取哪類疫苗,什么日齡免疫和免疫次數(shù),免疫的方法。近年來我國對新城疫的免疫程序進行大量研究,積累了許多經(jīng)驗,使新城疫的免疫程序更加科學(xué)化和合理化,這對控制和消滅新城疫起著重要作用。
對農(nóng)村分散飼養(yǎng)的雞如何做好免疫接種,是值得研究的問題,因為雛雞來源廣泛而復(fù)雜,造成母源抗體水平差異較大,由于分散飼養(yǎng)給疫苗免疫接種帶來一定困難。以前采取春秋兩季由防疫員負(fù)責(zé)進行,這樣必定造成免疫接種密度不高,造成新城疫時有發(fā)生。有的地區(qū)采用,在孵坊里對出殼雛雞進行免疫接種,也取得良好免疫效果,到2~3月齡時再用雞新城疫I系疫苗加強免疫一次,這樣可以提高免疫接種密度,而且對農(nóng)村散養(yǎng)雞控制新城疫有實用價值。在農(nóng)村開展新城疫免疫接種時,應(yīng)注意的問題是,做好疫苗的冷藏和保管,千萬禁止使用過期的疫苗,在較短時間內(nèi)對一個村莊的雞全部接種完畢,免疫接種中特別注意針頭的更換和消毒,防止通過針頭傳播本病。在農(nóng)村開展免疫時,經(jīng)常遇到幾個村莊的雞只用一只針頭接種完畢,結(jié)果免疫后2~3天流行新城疫。
4.建立免疫監(jiān)測制度為了保證各次免疫接種獲得良好免疫效果,避免免疫接種工作的盲目性,必須通過免疫監(jiān)測的方法,檢查免疫雞群中HI抗體效價。根據(jù)HI抗體水平確定首免和再次免疫時間,是最科學(xué)的方法。免疫監(jiān)測也是制訂免疫程序的依據(jù)。
HI抗體測定,會受到許多因素的影響,同一份抗血清在不同實驗室測定其結(jié)果不同,為了獲得準(zhǔn)確結(jié)果,一方面對操作人員進行訓(xùn)練,另一方面應(yīng)設(shè)立標(biāo)準(zhǔn)抗血清做對照,從而使HI抗體測定標(biāo)準(zhǔn)化。一般在首免后10~14天,抽檢免疫雞HI抗體水平。抽樣比例大雞群按0.2%,500羽雞群按3%~5%。以后每間隔3~4周抽檢一次,使用I系疫苗免疫的雞群,每隔2個月抽檢一次,通過免疫監(jiān)測手段,可以判定疫苗的免疫效果,當(dāng)發(fā)現(xiàn)HI抗體沒有上升,應(yīng)及時檢驗疫苗的品質(zhì),或檢查是否有其他的疾病影響,并及時采取補救措施,改換疫苗或改變免疫方法以及同時注意其他病免疫接種。免疫監(jiān)測還能判定該雞場是否受到新城疫強毒的感染。因為各類疫苗免疫雞后,正常情況HI抗體效價保持一定的水平,當(dāng)發(fā)現(xiàn)該雞群HI抗體突然上升很高,比原來的抗體效價增加了3個滴度以上,說明該雞群可能感染了新城疫強毒,那么必須注意其他雞群防疫措施。
在免疫監(jiān)測中亦發(fā)現(xiàn),有些免疫雞的HI抗體效價較低,但是用新城疫強毒攻擊后獲得保護,這說明新城疫除體液免疫外,還有細(xì)胞免疫作用。國內(nèi)有報道免疫雞T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞數(shù)量多于對照雞。
最急性新城疫:患雞腺胃乳頭出血,肌胃粘膜(角質(zhì)膜剝?nèi)?皺襞的嵴部出血。腺胃粘膜乳頭及其周圍有小點出血;肌胃角質(zhì)膜下的粘膜面有點狀或斑狀出血
(二)發(fā)生雞新城疫時的措施
雞場里一旦發(fā)生本病,應(yīng)采取緊急措施,防止疫情的擴大。首先采取隔離飼養(yǎng),報告獸醫(yī)檢查,經(jīng)確診為新城疫后,及時報告當(dāng)?shù)卣瑒澏ㄒ邊^(qū)進行封鎖。其次,及時應(yīng)用新城疫疫苗進行緊急接種,接種的順序是,假定健康群→可疑群→病雞群。實踐證明,即使是病雞群及時用疫苗進行緊急接種后,也能減少一部分死亡。必要時可以用高免血清或卵黃抗體進行注射也能控制本病發(fā)展,待病情穩(wěn)定后再用疫苗接種。第三,采取緊急消毒,對雞舍、運動場以及用具等,用5%~10%漂白粉,2%燒堿溶液,或抗毒威等進行徹底消毒,待消毒后30min再清掃。垃圾、糞便和剩余飼料經(jīng)無害處理,然后再進行第二次消毒。第四,疫區(qū)內(nèi)病死雞尸體和宰殺的內(nèi)臟及排泄物應(yīng)深埋或焚燒,或者尸體和內(nèi)臟經(jīng)高溫處理后作肥料。第五,農(nóng)村發(fā)生雞新城疫時,要停止家禽市場的交易,包括家禽的產(chǎn)品。雞要關(guān)閉飼養(yǎng),禁止自由散放。第六,疫區(qū)內(nèi)當(dāng)最后一個病雞死亡或撲殺后2周,對被污染的區(qū)域通過嚴(yán)格的終末消毒后,方可解除封鎖。
最急性新城疫:患最急性雞新城疫的雞泄殖腔肛道粘膜點狀或片狀出血
最急性新城疫:盲腸小點出血,盲腸扁桃體出血,回腸粘膜出血壞死
最急性新城疫:腺胃,肌胃出血,腸棗核形出血,壞死
最急性新城疫:腺胃乳頭出血,腸棗核形出血,壞死